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原文传递一种非洲紫檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用

专利名称：	一种非洲紫檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用
摘要：	本发明公开了一种非洲紫檀HPLC标准指纹图谱，涉及红木真伪鉴定领域，其包括9个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以所述峰面积最大的特征峰为参照峰，9个所述特征峰的相对保留时间分别为：0.102，0.118，0.136，0.502，0.586，0.612，0.664，0.700，1.000，RSD％<0.3％；本发明还公开了非洲紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法和应用，其通过相似度分析以及对比特征峰的有无，可有效的进行非洲紫檀真伪鉴别。本发明为非洲紫檀真伪鉴定提供了新的技术手段，可作为现有真伪识别方法的一种验证和补充，结果准确可靠。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心
发明人：	魏建华;梁希扬;魏霜;吴剑光;林文
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910243616.4
公开号：	CN110018261A
代理机构：	上海旭诚知识产权代理有限公司
代理人：	郑立
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	515031 广东省汕头市大华路11号主楼
主权项：	1.一种非洲紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括9个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大，以所述峰面积最大的所述特征峰为参照峰，9个所述特征峰的相对保留时间分别为：0.102，0.118，0.136，0.502，0.586，0.612，0.664，0.700，1.000，RSD％<0.3％。 2.如权利要求1所述的非洲紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，9个所述特征峰的相对峰面积分别为：0.0404，0.0224，0.1981，0.0526，0.0639，0.0582，0.1234，0.3436，1.000，RSD<0.8。 3.一种如权利要求1所述的非洲紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、供试品溶液的制备：称取非洲紫檀心材部分木屑，置于50mL离心管中，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液；步骤二、将步骤一制得的所述供试品溶液进行HPLC检测。 4.如权利要求3所述的非洲紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述非洲紫檀心材部分木屑的称取量为0.2g，所述甲醇的加入量为5mL，所述高纯水的加入量为5mL，所述震摇的时间为5min，所述微孔滤膜的孔径为0.2μm。 5.如权利要求3所述的非洲紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤二中所述HPLC检测的色谱条件设置如下：色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱，填料粒径5μm，柱长250mm，柱内径4.6mm；以水为流动相A，乙腈为流动相B，流速为1.0mL/min；检测波长为290nm，柱温为30℃。 6.如权利要求5所述的非洲紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，流动相采用梯度洗脱方式：从0～20min，所述流动相B的体积百分含量由8％提高至23％，所述流动相A的体积百分含量由92％降低至77％；从20～33min,所述流动相B的体积百分含量为23％，所述流动相A的体积百分含量为77％；从33～43min，所述流动相B的体积百分含量由23％提高至30％，所述流动相A的体积百分含量由77％降低至70％；从43～53min,所述流动相B的体积百分含量30％，所述流动相A的体积百分含量为70％；从53～69min，所述流动相B的体积百分含量由30％提高至38％，所述流动相A的体积百分含量由70％降低至62％；从69～76min，所述流动相B的体积百分含量38％，所述流动相A的体积百分含量为62％；从76～91min，所述流动相B的体积百分含量由38％提高至49％，所述流动相A的体积百分含量由62％降低至51％；从91～92min，所述流动相B的体积百分含量49％，所述流动相A的体积百分含量为51％；从92～95min，所述流动相B的体积百分含量由49％降低至8％，所述流动相A的体积百分含量由51％提高至92％；从95～103min，所述流动相B的体积百分含量8％，所述流动相A的体积百分含量为92％。 7.如权利要求3所述的非洲紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，还包括步骤三、分析比较6批来源不同的非洲紫檀的HPLC检测结果，得到由其共有特征峰构成的所述非洲紫檀HPLC标准指纹图谱。 8.如权利要求7所述的非洲紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤三具体包括以下步骤：将所述6批来源不同的非洲紫檀的HPLC检测结果导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”，选取时间窗宽度为0.2min，以中位数生成对照谱图，经过校正后自动匹配，生成非洲紫檀指纹图谱共有模式，并计算所述6批来源不同的非洲紫檀的HPLC检测结果与所述非洲紫檀指纹图谱共有模式的相似度，使得所述相似度在0.8以上，得到由所述共有特征峰构成的所述非洲紫檀HPLC标准指纹图谱。 9.如权利要求1所述的非洲紫檀HPLC标准指纹图谱在鉴别非洲紫檀真伪方面的应用方法，其特征在于，疑似非洲紫檀的样品的HPLC指纹图谱与所述非洲紫檀HPLC标准指纹图谱对比，若其相似度≥0.8以及存在共有特征峰，则鉴定结果为非洲紫檀。 10.如权利要求9所述的应用方法，其特征在于，具体包括如下步骤：当所述疑似非洲紫檀的样品的HPLC指纹图谱采用与建立所述非洲紫檀标准指纹图谱完全相同的色谱条件得到时，将所述疑似非洲紫檀的样品的HPLC指纹图谱与所述非洲紫檀HPLC标准指纹图谱导入相似度分析软件，与9个所述共有特征峰8.934min、10.395min、11.929min、44.057min、51.479min、53.745min、58.290min、61.465min、87.777min，进行校正，并进行Mark峰匹配，对于所述相似度≥0.8，且以所述峰面积最大峰作为所述参照峰，分别计算与所述共有特征峰对应的相对保留时间为0.102，0.118，0.136，0.502，0.586，0.612，0.664，0.700，1.000，RSD％<0.3％，鉴定结果为所述非洲紫檀。
所属类别：	发明专利