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原文传递一种赛州黄檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用

专利名称：	一种赛州黄檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用
摘要：	本发明公开了一种赛州黄檀HPLC标准指纹图谱，包括13个特征峰，以保留时间最长的所述特征峰为参照峰，13个特征峰的相对保留时间分别为：0.367，0.524，0.545，0.560，0.657，0.668，0.692，0.704，0.735，0.756，0.803，0.918，1.000，RSD％<0.3％；其中相对保留时间为0.803的特征峰的峰面积最大。本发明还公开了赛州黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法和应用，通过相似度分析以及对比特征峰的有无，可有效的进行赛州黄檀真伪鉴别。本发明为赛州黄檀真伪鉴定提供了新的技术手段，可作为现有真伪识别方法的一种验证和补充，结果准确可靠。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心
发明人：	魏建华;吴剑光;林隆强;李冠斯;刘玉莉
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910243613.0
公开号：	CN110031574A
代理机构：	上海旭诚知识产权代理有限公司
代理人：	郑立
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	515031 广东省汕头市大华路11号主楼
主权项：	1.一种赛州黄檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，包括13个特征峰，以保留时间最长的所述特征峰为参照峰，13个所述特征峰的相对保留时间分别为：0.367，0.524，0.545，0.560，0.657，0.668，0.692，0.704，0.735，0.756，0.803，0.918，1.000，RSD％<0.3％；其中相对保留时间为0.803的所述特征峰的峰面积最大。 2.如权利要求1所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，13个所述特征峰的相对峰面积分别为：0.5193，0.6501，0.1654，0.3058，1.3638，1.1233，1.4133，0.2776，0.1861，0.7472，2.9318，0.5195，1.000，RSD<1.0。 3.一种如权利要求1所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、供试品溶液的制备：称取赛州黄檀心材部分木屑，置于50mL离心管中，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液；步骤二、将步骤一制得的所述供试品溶液进行HPLC检测，以水为流动相A，乙腈为流动相B，流速为1.0mL/min，检测波长为290nm，柱温为30℃，流动相采用梯度洗脱方式：从0～20min，所述流动相B的体积百分含量由8％提高至23％，所述流动相A的体积百分含量由92％降低至77％；从20～33min,所述流动相B的体积百分含量为23％，所述流动相A的体积百分含量为77％；从33～43min，所述流动相B的体积百分含量由23％提高至30％，所述流动相A的体积百分含量由77％降低至70％；从43～53min,所述流动相B的体积百分含量30％，所述流动相A的体积百分含量为70％；从53～69min，所述流动相B的体积百分含量由30％提高至38％，所述流动相A的体积百分含量由70％降低至62％；从69～76min，所述流动相B的体积百分含量38％，所述流动相A的体积百分含量为62％；从76～91min，所述流动相B的体积百分含量由38％提高至49％，所述流动相A的体积百分含量由62％降低至51％；从91～92min，所述流动相B的体积百分含量49％，所述流动相A的体积百分含量为51％；从92～95min，所述流动相B的体积百分含量由49％降低至8％，所述流动相A的体积百分含量由51％提高至92％；从95～103min，所述流动相B的体积百分含量8％，所述流动相A的体积百分含量为92％。 4.如权利要求3所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述赛州黄檀心材部分木屑的称取量为0.2g，所述甲醇的加入量为5mL，所述高纯水的加入量为5mL，所述震摇的时间为5min，所述微孔滤膜的孔径为0.2μm。 5.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，还包括步骤三、分析比较多批来源不同的赛州黄檀的HPLC检测结果，得到由其共有特征峰构成的所述赛州黄檀HPLC标准指纹图谱。 6.如权利要求5所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述步骤三具体为：将7批来源不同的所述赛州黄檀的HPLC检测结果导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”，选取时间窗宽度为0.2min，以中位数生成对照谱图，经过校正后自动匹配，生成赛州黄檀指纹图谱共有模式，并计算所述7批来源不同的赛州黄檀的HPLC检测结果与所述赛州黄檀指纹图谱共有模式的相似度，使得所述相似度在0.8以上，得到由其共有特征峰构成的所述赛州黄檀HPLC标准指纹图谱。 7.如权利要求6所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，具体包括如下步骤：步骤一、特征峰的筛选方法是根据与最大峰面积比排序，去除与最大峰面积比小于0.06的峰；步骤二、将没有参加指纹图谱构建的其他经GB/T 18107-2017《红木》国标鉴定为赛州黄檀的样品的HPLC检测图谱与步骤一所得的赛州黄檀的共有峰进行比对，删除多出的共有峰。经过多次比对，最后留下来的共有峰作为稳定出现的特征峰，构成所述赛州黄檀HPLC标准指纹图谱。 8.如权利要求1所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱在鉴别赛州黄檀真伪方面的应用。 9.如权利要求8所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱在鉴别赛州黄檀真伪方面的应用，其特征在于，疑似赛州黄檀的样品的HPLC指纹图谱与所述赛州黄檀HPLC标准指纹图谱对比，若其相似度≥0.8以及存在共有特征峰，则鉴定结果为赛州黄檀。 10.如权利要求8所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱在鉴别赛州黄檀真伪方面的应用，其特征在于，所述疑似赛州黄檀的样品的HPLC指纹图谱采用了如权利要求3-7任意一项所述的方法。
所属类别：	发明专利