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原文传递一种用于水样中多种抗生素的检测方法

专利名称：	一种用于水样中多种抗生素的检测方法
摘要：	本发明公开了一种用于水样中多种抗生素的检测方法，该方法的检测步骤包括：水样经抽滤后取适量，加入Na2EDTA并调节pH值，选用HLB小柱进行固相萃取，甲醇洗脱，洗脱液氮吹后复溶，采用高效液相色谱串联质谱法进样分析。本发明首次建立了同时对该多种抗生素定性及定量的检测方法，该方法的灵敏度高，检测结果准确，能满足地表水样中若干种目标抗生素在宽浓度范围内的准确定量测定，具有良好的实用性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	东莞市食品药品检验所
发明人：	魏志雄;刘丹丹;蓝明雄;王昆鹏;廖瑜;钟玮
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910361233.7
公开号：	CN110243953A
代理机构：	东莞市神州众达专利商标事务所(普通合伙)
代理人：	刘汉民
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	523000 广东省东莞市松山湖高新技术产业开发区黄芪街7号
主权项：	1.一种用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤： 101、水样的前处理：使用微孔滤膜对水样进行过滤，取过滤后水样，向过滤后水样中加入Na2EDTA并使其溶解，再用稀酸调节pH值至2.5-3.5，得到前处理水样； 102、水样中抗生素的富集：将前处理的水样经自动固相萃取仪进行萃取，并选用经活化的HLB小柱进行痕量抗生素富集，后以甲醇洗脱，收集洗脱液，氮吹至干后复溶，滤过，作为待测液； 103、水样的检测：采用高效液相色谱串联质谱法，流动相梯度洗脱，待测液进样分析。 2.根据权利要求1所述的用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于所述的抗生素为头孢拉定、头孢克肟、头孢丙烯、头孢羟氨苄、头孢孟多酯、磺胺甲恶唑、磺胺二甲嘧啶、甲硝唑、替硝唑、氟康唑、酮康唑、克霉唑、诺氟沙星、环丙沙星、依诺沙星、氟罗沙星、舒巴坦及氯霉素的任意一种。 3.根据权利要求1所述的用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于所述101步骤中，取过滤后水样和Na2EDTA的用量为：1000ml水样加入0.5gNa2EDTA，并超声振荡使Na2EDTA溶解。 4.根据权利要求3所述的用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于水样的前处理中，所述的微孔滤膜材质为聚醚砜，内径为25mm，孔径为0.22μm或0.45μm；pH调节终点可接受范围为3.0±0.1。 5.根据权利要求1所述的用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于所述102步骤中，水样中抗生素的富集中，HLB小柱规格为6cc/200mg或6cc/500mg，依次用10ml甲醇、5ml超纯水和5ml0.1％甲酸水溶液进行活化，以5～8ml/min的速度上样，并以10～16ml超纯水淋洗，最后用10ml甲醇以1ml/min速度洗脱；且洗脱后的液体在30～40℃水浴条件下氮气吹干，再加1ml乙腈-水(10:90，含0.1％甲酸)溶解，并过0.22μm尼龙材质的微孔滤膜。 6.根据权利要求5所述的用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于所述HLB小柱以6ml/min的速度上样，并以12ml超纯水淋洗，最后用10ml甲醇以1ml/min速度洗脱；洗脱液在35℃水浴条件下氮气吹干；乙腈-水的用量比例为10:90，且乙腈-水中含0.1％甲酸。 7.根据权利要求5所述的用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于所述103步骤水样检测中，所述的高效液相色谱串联质谱法液相色谱条件包括使用C18色谱柱(100mm×2.0mm×3μm)，进样体积为10μl，柱温为35℃，流速为0.2ml/min，流动相为乙腈和0.1％甲酸水溶液，进行梯度洗脱。 8.根据权利要求7所述的所述的一种水样中18种抗生素的检测方法，其特征在于所述103步骤水样检测中，所述的高效液相色谱串联质谱法质谱参数包括：喷雾管雾化气(Gas1)、辅助加热气(Gas2)流速均为50psi、气帘气(Curtain Gas)为25psi、辅助加热温度为550℃、电离电压(IS)分别为+5500V(正离子)及-4500V(负离子)。 9.根据权利要求1所述的用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于所述103步骤中，以抗生素目标物保留时间及特征离子对(m/z)进行定性，以峰面积按标准曲线法进行定量。 10.根据权利要求9所述的用于水样中多种抗生素的检测方法，其特征在于所述103步骤中，检出抗生素，用标准曲线法分别计算样品中各抗生素的质量浓度，计算方法为：式中： ρi——水样中抗生素组分的含量，ng/l； mi——标准曲线法计算水样中抗生素组分的质量浓度，ng/ml； V——最终定容体积，ml； Vs——水样取样体积，l。
所属类别：	发明专利