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原文传递肺癌血清诊断标志物及其应用、肺癌相关可溶性蛋白的分离鉴定方法

专利名称：	肺癌血清诊断标志物及其应用、肺癌相关可溶性蛋白的分离鉴定方法
摘要：	本发明涉及一种肺癌血清诊断标志物及其应用以及肺癌相关可溶性蛋白的分离鉴定方法。该肺癌血清诊断标志物包括表达上调全长可溶性hMSH3蛋白、表达下调的全长可溶性hMSH6蛋白、和表达下调的分子量为45KD‑50KD的可溶性hMSH6蛋白片段中的至少一种。本发明为进一步探索hMSH2及其互作蛋白的可溶形式在Vγ9δ2T细胞介导的癌症免疫逃逸中的作用和意义，创造性地对肺癌患者进行研究分析，利用血清蛋白提取、免疫印迹和/或免疫共沉淀等技术手段，明确了血清中可溶性hMSH2、hMSH3、hMSH6的存在形式与表达差异，并对与可溶性hMSH2互作的其它蛋白的可溶形式进行了筛测、分离、纯化、鉴定，为进一步探索hMSH2及其互作蛋白在Vγ9δ2T细胞介导的肺癌天然免疫中的作用提供了技术支持。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州市妇女儿童医疗中心
发明人：	代玉梅;蓝姣利
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910496459.8
公开号：	CN110244047A
代理机构：	广州华进联合专利商标代理有限公司
代理人：	林青中
分类号：	G01N33/574(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	510000 广东省广州市人民中路318号
主权项：	1.一种肺癌血清诊断标志物，其特征在于，包括相对于健康人血清的表达上调的分子量为130KD的全长可溶性hMSH3蛋白、表达下调的分子量为160KD的全长可溶性hMSH6蛋白、和表达下调的分子量为45KD-50KD的可溶性hMSH6蛋白片段中的至少一种。 2.如权利要求1所述的肺癌血清诊断标志物，其特征在于，还包括相对于健康人血清的表达下调的分子量为70KD的全长可溶性Hsp70蛋白。 3.如权利要求1或2所述的肺癌血清诊断标志物在制备肺癌诊断试剂、诊断芯片、诊断试剂盒或检测设备中的应用。 4.一种肺癌血清诊断芯片，其特征在于，其上固定有如权利要求1或2所述的肺癌血清诊断标志物对应的抗体，所述抗体能与相应的标志物特异性结合。 5.如权利要求4所述的肺癌血清诊断芯片，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体。 6.一种肺癌相关可溶性蛋白的分离鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：提取肺癌患者血清样品中的血清蛋白；使用hMSH2蛋白、hMSH3蛋白和hMSH6蛋白的相关抗体对提取的血清蛋白利用免疫印迹方法和/或免疫共沉淀方法进行分离鉴定。 7.如权利要求6所述的肺癌相关可溶性蛋白的分离鉴定方法，其特征在于，还包括在提取肺癌患者血清样品中的血清蛋白之后去除血清蛋白中的白蛋白和免疫球蛋白的步骤，后续分离鉴定时是对去除了白蛋白和免疫球蛋白的血清蛋白进行分离鉴定。 8.如权利要求7所述的肺癌相关可溶性蛋白的分离鉴定方法，其特征在于，还包括使用BCA蛋白浓度检测法对去除了白蛋白和免疫球蛋白的血清蛋白进行浓度检测的步骤。 9.如权利要求6～8中任一项所述的肺癌相关可溶性蛋白的分离鉴定方法，其特征在于，使用免疫印记方法对肺癌患者血清样品与健康人血清样品进行目的蛋白的存在形式与表达差异进行检测分析。 10.如权利要求6～8中任一项所述的肺癌相关可溶性蛋白的分离鉴定方法，其特征在于，使用抗体-琼脂偶联旋转柱免疫共沉淀方法对肺癌患者血清样品与健康人血清样品进行目的蛋白及与目的蛋白互作的其他蛋白的存在形式进行筛选、分离、纯化和鉴定分析。
所属类别：	发明专利