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原文传递基于超高效液相色谱串联三重四级杆质谱检测牛奶中23种兽药的方法

专利名称：	基于超高效液相色谱串联三重四级杆质谱检测牛奶中23种兽药的方法
摘要：	本发明提供一种基于超高效液相色谱串联三重四级杆质谱检测牛奶中23种兽药的方法。本发明用乙腈(含2％甲酸)提取牛奶样品中目标化合物，经Oasis PRiME HLB小柱净化后，氮气吹扫，用5％甲醇水溶液溶解残余物后分析；以水‑甲醇为流动相，用HSS T3色谱柱分离目标化合物，采用电喷雾电离串联三重四级杆质谱在多反应监测模式下进行测定，外标法定量。23种兽药化合物的检出限在0.005～3.026μg·kg‑1之间，定量限在0.1～10μg·kg‑1之间，加标回收率在70.98％～118.63％之间，相对标准偏差在0.14％～11.55％之间，该方法简单快捷、准确可靠。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京农业质量标准与检测技术研究中心
发明人：	王卉;韩平;刘庆菊;罗娜;王冬
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910658954.4
公开号：	CN110261529A
代理机构：	北京路浩知识产权代理有限公司
代理人：	黄爽
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	100097 北京市海淀区曙光花园中路9号北京市农林科学院
主权项：	1.一种检测牛奶中23种兽药残留的方法，其特征在于，包括样品前处理和采用超高效液相色谱串联三重四级杆质谱法对供试样品进行检测；其中，样品前处理所用提取试剂为含2％甲酸的乙腈溶液。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每1g牛奶样品用4mL所述提取试剂进行提取；优选地，具体方法为将二者充分混合，然后在7000rpm下离心5min，取上清液进行SPE净化。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述样品前处理还包括用Oasis PRiMEHLB柱对牛奶样品提取后所得上清液进行净化。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品前处理包括：取1g牛奶样品，加入4mL的含2％甲酸的乙腈溶液，充分混合，在7000rpm下离心5min；取上清液过Oasis PRiMEHLB柱进行净化，以除去样品中的磷脂和脂肪，再用氮气将其吹干；用1mL 5％的甲醇水溶液定容，微孔滤膜过滤，作为供试样品。 5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所用液相色谱检测使用以下流动相：水相为含有0.05-0.15％甲酸的水溶液；有机相为含有0.05～0.15％甲酸的甲醇；优选地，使用以下流动相：水相为含有0.1％甲酸的水溶液；有机相为含有0.1％甲酸的甲醇。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，梯度洗脱过程如下： 0～0.15min：水相的体积百分比为98％，余量为有机相； 0.15～1.95min：水相的体积百分比为98％至74％，余量为有机相； 1.95～2.95min：水相的体积百分比为74％至65％，余量为有机相； 2.95～7.50min：水相的体积百分比为65％至1％，余量为有机相； 7.50～8.00min：水相的体积百分比为1％，余量为有机相； 8.00～8.01min：水相的体积百分比为1％至98％，余量为有机相； 8.01～10.00min：水相的体积比为98％，余量为有机相。 7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，超高效液相色谱的色谱柱选用反相硅胶柱，优选为ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱；和/或，流速为0.45～0.6mL·min-1，优选为0.45mL·min-1；和/或，柱温为40～45℃，优选为45℃；和/或，进样体积为3～6μL，优选为5μL。 8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，质谱条件包括：离子源：电喷雾电离源ESI；离子源温度为150℃；毛细管电压：3.5kV；氮气作为脱溶剂气；脱溶剂气温度为550～600℃；脱溶剂气流速为850～1000L·h-1；碰撞气体为氩气；碰撞气流速(氩气)：0.15mL·min-1；锥孔气流速：150L·h-1。 9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，采用外标法以峰面积进行定量检测。 10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，所述23种兽药为：氧氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、环丙沙星、恩诺沙星、二氟沙星、沙氟沙星、达氟沙星、羟氨苄青霉素、氨苄青霉素、青霉素G、邻氯青霉素、头孢噻呋、西马特罗、甲硝唑、呋喃它酮、群勃龙、甲基睾丸酮、丙酸睾酮、氯丙嗪、沙丁胺醇、呋喃唑酮、己烯雌酚。
所属类别：	发明专利