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一种基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法
| 专利名称： | 一种基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法。该方法是由核酸适配体特异性地识别癌症标志物，在结合量子点后，可以用于成像的研究。利用这种方法，以循环肿瘤细胞表面的上皮细胞黏附分子为目标物，实现了激光共聚焦显微镜下的成像。这种方法快速，灵敏，特异性优良，成像清晰准确，是一种具有潜在应用前景的方法。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 上海;31 |
| 申请人： | 复旦大学 |
| 发明人： | 朱丽娜;刘芸;乔亮;刘宝红 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-06-27T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-09-20T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910565325.7 |
| 公开号： | CN110261359A |
| 代理机构： | 上海正旦专利代理有限公司 |
| 代理人： | 张磊 |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21 |
| 申请人地址： | 200433 上海市杨浦区邯郸路220号 |
| 主权项： | 1.一种基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法，其特征在于：具体步骤如下： （1）在核酸适配体序列的末端修饰生物素，得到核酸适配体-生物素（aptamer-biotin）； （2）在量子点CdSe上修饰链霉亲和素（SA），得到QDs-SA； （3）在清洗干净的ITO玻璃上修饰13nm的纳米金颗粒，滴加核酸适体，室温孵育14小时，再加入巯基乙醇封闭30分钟，最后加入癌症标志物，每一步结合后均用缓冲溶液（50mMTris-HCl）清洗，氮气吹干； （4）向步骤（3）的基底中加入步骤（1）得到的aptamer-biotin，室温孵育1小时，用缓冲溶液（50mM Tris-HCl）清洗，氮气吹干； （5）向步骤（4）中加入步骤（2）得到的QDs-SA，室温孵育1小时，用缓冲溶液（50mM Tris-HCl）清洗，氮气吹干； （6）在激光共聚焦显微镜下，设置波长458nm激发，在500-600nm范围内采集图像数据。 2.根据权利要求1所述的基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法，其特征在于，步骤（3）所述癌症标志物为上皮细胞黏附分子(EpCAM)。 3.根据权利要求2所述的基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法，其特征在于：步骤（3）所述上皮细胞黏附分子的浓度为10aM-500nM，体积为5µL-10µL。 4.根据权利要求1所述的基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法，其特征在于：步骤（3）所述的aptamer-biotin的体积为1µL至5µL，浓度5µM-10µM。 5.根据权利要求1所述的基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法，其特征在于：步骤（3）所述的QDs-SA体积为1µL至5µL，浓度5µM-10µM。 6.根据权利要求1所述的基于激光共聚焦显微镜的癌症标志物成像方法，其特征在于：步骤（6）所述的激光共聚焦显微镜的激发波长在405-488nm范围内。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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