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原文传递一种三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体在检测三氯生和/或三氯卡班中的用途

专利名称：	一种三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体在检测三氯生和/或三氯卡班中的用途
摘要：	本发明提供了一种三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体在检测三氯生和/或三氯卡班中的用途，并具体提供了一种检测样品中痕量三氯生和/或三氯卡班的方法，包括利用免疫亲和柱‑超高效液相色谱串联质谱的检测方法。其中，免疫亲和柱中基质与三氯生和三氯卡班的单克隆抗体偶联。本发明提供的检测方法灵敏度高，精密度、回收率、LOD和LOQ均能满足检测分析的要求，有效解决前处理中样品净化不理想的问题，并减少样品基质干扰，缩短分析时间，提高回收率，可以在复杂基质中，特别是各类食品中特异性地检测痕量三氯生和/或三氯卡班，不会出现假阳性的检测结果。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京市疾病预防控制中心
发明人：	邵兵;姚凯;张晶;温凯;杨蕴嘉;沈建忠
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910645174.6
公开号：	CN110286240A
代理机构：	北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	艾变开
分类号：	G01N33/94(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100013 北京市东城区和平里中街16号
主权项：	1.一种三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体在检测三氯生和/或三氯卡班中的用途，其特征在于，所述三氯生单克隆抗体是通过式I所示的三氯生半抗原制备得到，所述三氯卡班单克隆抗体是通过式II所示三氯卡班半抗原制备得到， 2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，制备所述三氯生单克隆抗体所用的三氯生人工抗原如式III所示，是式I所示三氯生半抗原和载体蛋白结合得到；制备所述三氯卡班单克隆抗体所用的三氯卡班人工抗原如式IV所示，是式II所示三氯生半抗原和载体蛋白结合得到， 3.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述检测的方法包括免疫分析方法、生物传感器、表面增强拉曼散射；所述的免疫分析方法包括免疫亲和层析、酶联免疫分析、胶体金免疫层析、化学发光免疫分析或悬浮阵列。 4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述检测的方法还包括与超高效液相色谱、质谱或者超高效液相色谱与质谱联用。 5.一种三氯生半抗原化合物，结构如式I所示： 6.一种三氯生人工抗原，结构如式III所示，其中，三氯生半抗原与载体蛋白的偶联比为0.5-1:1，优选为0.7:1。 7.一种检测三氯生和/或三氯卡班的方法，包括以下步骤：采用三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体制备免疫亲和柱，利用免疫亲和柱对三氯生和/或三氯卡班进行选择性结合和富集后，再检测三氯生和/或三氯卡班，其特征在于，制备所述的三氯生单克隆抗体所用的三氯生半抗原如式I所示，制备所述的三氯卡班单克隆抗体所用的三氯卡班半抗原如式II所示， 8.一种检测三氯生和/或三氯卡班的方法，包括以下步骤：采用三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体制备免疫亲和柱，利用免疫亲和柱对三氯生和/或三氯卡班进行选择性富集和提纯后，再检测三氯生和/或三氯卡班，其特征在于，所述的三氯生单克隆抗体所用的三氯生人工抗原如式III所示，制备所述的三氯卡班单克隆抗体所用的三氯卡班人工抗原如式IV所示， 9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)将样品上样于免疫亲和柱、洗脱； 2)检测洗脱产物中三氯生和/或三氯卡班。 10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤1)中免疫亲和柱的填料中基质与单克隆抗体的体积比为1:1～1:1.5；和/或步骤2)中检测三氯生和/或三氯卡班采用超高效液相色谱和质谱联用的方法；所述的样品选自食品、体液、污水、纺织或日化用品；和/或所述检测包括样品前处理，所述的固体样品前处理包括将固体样品与乙腈混合、超声，离心取上清，氮吹；所述的液体样品前处理包括将液体样品超声脱气；优选的免疫亲和柱层析的操作条件是上样液为15-20vol％甲醇含量的PBS溶液；和/或洗脱液为纯甲醇；和/或当样品为固体时，洗脱液和样品的体积质量比为3-5:1(mL/g)；当样品为液体时，洗脱液和样品的体积比为3-5：10；和/或洗脱液使用玻璃纤维过滤器进行过滤。
所属类别：	发明专利