专利名称: |
一种三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体在检测三氯生和/或三氯卡班中的用途 |
摘要: |
本发明提供了一种三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体在检测三氯生和/或三氯卡班中的用途,并具体提供了一种检测样品中痕量三氯生和/或三氯卡班的方法,包括利用免疫亲和柱‑超高效液相色谱串联质谱的检测方法。其中,免疫亲和柱中基质与三氯生和三氯卡班的单克隆抗体偶联。本发明提供的检测方法灵敏度高,精密度、回收率、LOD和LOQ均能满足检测分析的要求,有效解决前处理中样品净化不理想的问题,并减少样品基质干扰,缩短分析时间,提高回收率,可以在复杂基质中,特别是各类食品中特异性地检测痕量三氯生和/或三氯卡班,不会出现假阳性的检测结果。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
北京;11 |
申请人: |
北京市疾病预防控制中心 |
发明人: |
邵兵;姚凯;张晶;温凯;杨蕴嘉;沈建忠 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2019-07-17T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-09-27T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201910645174.6 |
公开号: |
CN110286240A |
代理机构: |
北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) |
代理人: |
艾变开 |
分类号: |
G01N33/94(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
申请人地址: |
100013 北京市东城区和平里中街16号 |
主权项: |
1.一种三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体在检测三氯生和/或三氯卡班中的用途,其特征在于,所述三氯生单克隆抗体是通过式I所示的三氯生半抗原制备得到,所述三氯卡班单克隆抗体是通过式II所示三氯卡班半抗原制备得到, 2.如权利要求1所述的用途,其特征在于,制备所述三氯生单克隆抗体所用的三氯生人工抗原如式III所示,是式I所示三氯生半抗原和载体蛋白结合得到;制备所述三氯卡班单克隆抗体所用的三氯卡班人工抗原如式IV所示,是式II所示三氯生半抗原和载体蛋白结合得到, 3.如权利要求1或2所述的用途,其特征在于,所述检测的方法包括免疫分析方法、生物传感器、表面增强拉曼散射;所述的免疫分析方法包括免疫亲和层析、酶联免疫分析、胶体金免疫层析、化学发光免疫分析或悬浮阵列。 4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于,所述检测的方法还包括与超高效液相色谱、质谱或者超高效液相色谱与质谱联用。 5.一种三氯生半抗原化合物,结构如式I所示: 6.一种三氯生人工抗原,结构如式III所示,其中,三氯生半抗原与载体蛋白的偶联比为0.5-1:1,优选为0.7:1。 7.一种检测三氯生和/或三氯卡班的方法,包括以下步骤:采用三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体制备免疫亲和柱,利用免疫亲和柱对三氯生和/或三氯卡班进行选择性结合和富集后,再检测三氯生和/或三氯卡班,其特征在于,制备所述的三氯生单克隆抗体所用的三氯生半抗原如式I所示,制备所述的三氯卡班单克隆抗体所用的三氯卡班半抗原如式II所示, 8.一种检测三氯生和/或三氯卡班的方法,包括以下步骤:采用三氯生单克隆抗体和/或三氯卡班单克隆抗体制备免疫亲和柱,利用免疫亲和柱对三氯生和/或三氯卡班进行选择性富集和提纯后,再检测三氯生和/或三氯卡班,其特征在于,所述的三氯生单克隆抗体所用的三氯生人工抗原如式III所示,制备所述的三氯卡班单克隆抗体所用的三氯卡班人工抗原如式IV所示, 9.如权利要求7或8所述的方法,其特征在于,包括以下步骤: 1)将样品上样于免疫亲和柱、洗脱; 2)检测洗脱产物中三氯生和/或三氯卡班。 10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,步骤1)中免疫亲和柱的填料中基质与单克隆抗体的体积比为1:1~1:1.5;和/或 步骤2)中检测三氯生和/或三氯卡班采用超高效液相色谱和质谱联用的方法; 所述的样品选自食品、体液、污水、纺织或日化用品;和/或所述检测包括样品前处理,所述的固体样品前处理包括将固体样品与乙腈混合、超声,离心取上清,氮吹;所述的液体样品前处理包括将液体样品超声脱气;优选的免疫亲和柱层析的操作条件是上样液为15-20vol%甲醇含量的PBS溶液;和/或洗脱液为纯甲醇;和/或当样品为固体时,洗脱液和样品的体积质量比为3-5:1(mL/g);当样品为液体时,洗脱液和样品的体积比为3-5:10;和/或洗脱液使用玻璃纤维过滤器进行过滤。 |
所属类别: |
发明专利 |