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原文传递一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法

专利名称：	一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法
摘要：	本发明提供一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法，该方法是基于原位反应的离子液体液‑液微萃取技术，检测人体体液中的三氯生、甲基三氯生的方法体液包括血液、尿液等，方法包括以下步骤：S1：取体液样品置于离心管中，加入萃取剂后进行首次超声萃取，得到超声后样品；S2：在步骤S1得到的超声后样品中加入NH4PF6、与NH4PF6等摩尔质量的NaOH，进行原位反应后得到浑浊液；S3：对浑浊液后进行1～5min的再次超声处理、14min的冷却处理和4～14min的离心处理，待浑浊液中的固相与液相分离后，取下层固相用氮气吹干，得到处理完成的样品；S4：稀释步骤S3中得到的样品，再用色谱仪检测该样品中的三氯生与甲基三氯生。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	温州医科大学
发明人：	王学东;周佩佩;高佳佳;王慧利;刘伟;李艳艳
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201811528539.9
公开号：	CN109738561A
代理机构：	温州名创知识产权代理有限公司
代理人：	陈加利
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	325006 浙江省温州市瓯海区东方南路38号温州市国家大学科技园孵化器
主权项：	1.一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法，其特征在于：该方法基于原位反应的离子液体液-液微萃取技术检测人体体液中的三氯生、甲基三氯生，所述体液包括血浆和尿液，该方法包括以下步骤： S1：取体液样品置于离心管中，加入萃取剂后进行首次超声萃取，超声时间小于5min，得到超声后样品，所述萃取剂为[C12MIM]Br、[C14MIM]Br、[C16MIM]Br、[C12MIM]Cl、[C14MIM]Cl和[C16MIM]Cl中的一种； S2：在步骤S1得到的超声后样品中加入阴离子交换剂NH4PF6、与NH4PF6等摩尔质量的NaOH，进行原位反应后得到浑浊液； S3：对所述浑浊液后进行1～5min的再次超声处理、13～14min冷却处理和10～14min的离心处理，待浑浊液中的固相与液相分离后，取下层固相用氮气吹干，得到处理完成的样品； S4：稀释步骤S3中得到的样品，再用色谱仪检测该样品中的三氯生与甲基三氯生。 2.根据权利要求1所述的一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法，其特征在于：色谱条件为：流动相为乙腈和超纯水，流速为1.0mL min-1，流动相比例为乙腈：超纯水＝75：25，进样量为20μL，检测波长为278nm，柱温30℃。 3.根据权利要求2所述的一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法，其特征在于：所述体液为血清，所述体液处理方法还包括前处理步骤：取血清置于离心管中后加入乙腈涡旋震荡2min，再经85℃水浴15min，冷却后再经5000rpm离心15min，将离心后得到的上清液经0.45μm微孔滤膜过滤，再经10000rpm离心5min，得到二次离心后产物，取该产物的上层清液稀释5倍后作为参与后续处理的体液样品。 4.根据权利要求2所述的一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法，其特征在于：所述体液为尿液，所述体液处理方法还包括前处理步骤：取尿液置于离心管中，经4000rpm离心10min后得到离心后产物，取该产物的上清液再经0.22μm微孔滤膜过滤，过滤后的上层清液稀释5倍后作为参与后续处理的体液样品。 5.根据权利要求1至4中任一所述的一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法，其特征在于：步骤S1中，萃取剂为[C12MIM]Br，对应4ml体液样品加入0.02g萃取剂；步骤S1中的超声时间为2.14min；步骤S2中，对应4ml体液样品加入0.07g NH4PF6；步骤S3中的冷却处理为使用冰水混合物对样品冷却13.63min。 6.根据权利要求4所述的一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法，其特征在于：步骤S3中的超声时间为2min。 7.根据权利要求4所述的一种基于原位反应微萃取技术的体液中三氯生与甲基三氯生检测方法，其特征在于：步骤S3中的离心时间为10min。
所属类别：	发明专利