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原文传递一种食源性纳米颗粒分离及定量分析的方法

专利名称：	一种食源性纳米颗粒分离及定量分析的方法
摘要：	本发明公开了一种食源性纳米颗粒的分离及定量分析的方法。该方法包括如下步骤：(1)河蚬热加工获得河蚬汤，然后对所述河蚬汤进行离心，获取上清液，最后对上清液进行冷冻干燥处理，获得冻干粉；(2)利用毛细管电泳对冻干粉溶液中的功能性纳米颗粒进行分离；(3)通过线性回归方程计算步骤(2)中获得的功能性纳米颗粒的浓度或单位体积个数。本发明具有分离快速、分离效果好、灵敏度高、重现性好、检测限低、进样量少，可对功能性纳米颗粒进行定量分析等优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江工商大学
发明人：	杨多佳;余兆硕;柯李晶;高观祯;汪惠勤;周建武;饶平凡;邹坚桥;彭彰文
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910373788.3
公开号：	CN110286098A
代理机构：	浙江千克知识产权代理有限公司
代理人：	李欣玮
分类号：	G01N21/33(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	310018 浙江省杭州市江干区下沙高教园区学正街18号
主权项：	1.一种食源性纳米颗粒分离及定量分析的方法，所述食源性纳米颗粒为河蚬汤中功能性纳米颗粒，其特征在于，包括如下步骤： (1)河蚬热加工获得河蚬汤，然后对所述河蚬汤进行离心，获取上清液，最后对上清液进行冷冻干燥处理，获得冻干粉； (2)利用毛细管电泳对冻干粉溶液中的功能性纳米颗粒进行分离； (3)通过线性回归方程y＝3162.5x-377.19计算步骤(2)中获得的功能性纳米颗粒的浓度；其中x代表浓度，单位为mg/ml，y代表峰面积；或者，通过线性回归方程y＝69.18x-42.946计算步骤(2)中获得的功能性纳米颗粒的单位体积个数；其中，x代表功能性纳米颗粒的单位体积个数，单位为particles/mL，y代表峰面积。 2.根据权利要求1所述的一种食源性纳米颗粒定量分析的方法，其特征在于，所述热加工的具体工艺为：将河蚬用蒸馏水洗净并静养5h以上，称取获得新鲜个体，按照料液比1:1-3kg/L加入蒸馏水并煮沸0.5-2h，然后冷却至常温，最后用纱布过滤，即得到河蚬汤。 3.根据权利要求1所述的一种食源性纳米颗粒定量分析的方法，其特征在于，所述离心速度为5000-10000r·min-1，离心时间为10-20min。 4.根据权利要求1所述的一种食源性纳米颗粒定量分析的方法，其特征在于，所述冷冻干燥步骤为：将上清液于-80℃预先冷冻后0.5-3h，转移至真空冷冻干燥机中2-3d，真空冷冻干燥机内置条件为-55～-60℃，0.5～0.6mbar。 5.根据权利要求1所述的一种食源性纳米颗粒定量分析的方法，其特征在于，所述步骤(2)的具体为：将所述冻干粉溶于缓冲液得到冻干粉溶液，然后加入毛细管电泳样品池中，在电场作用下样品在毛细管中进行定向移动，以214nm紫外波段对其进行检测，收集紫外吸收出峰位置的溶液即获得河蚬汤中功能性纳米颗粒。 6.根据权利要求5所述的一种食源性纳米颗粒分离定量分析的方法，其特征在于，所述毛细管电泳的电压为15-25kV。 7.根据权利要求5所述的一种食源性纳米颗粒定量分析的方法，其特征在于，所述缓冲液为硼酸-硼砂缓冲液，所述硼酸-硼砂缓冲液的pH值为8.0-9.0，浓度为50mmol/L；优选的，所述pH值为8.0-8.7；更优选的，所述pH值为8.7。 8.根据权利要求5所述的一种食源性纳米颗粒定量分析的方法，其特征在于，所述冻干粉溶液的浓度为1mg/ml。 9.根据权利要求5所述的一种食源性纳米颗粒定量分析的方法，其特征在于，所述步骤(2)进样时间为3-20秒，优选为5-15秒，最优选为10秒。
所属类别：	发明专利