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原文传递一种肝癌早期诊断试剂盒

专利名称：	一种肝癌早期诊断试剂盒
摘要：	本发明属于生物医药领域，具体涉及一种肝癌早期诊断试剂盒，包括有包括有上盒体结构、下盒体结构及工作模块；上盒体结构包括有上盒体、若干试剂管孔、若干孔板、伸缩柱、盖板、若干管体、洗涤液管；若干管体活动收容于若干试剂管孔内；其中为小牛血清白蛋白管；其中为固定液管；其中一管体渗透液管；其中一管体为封闭液管；其中一管体为生物素标记山羊抗兔IgG复合物管，其中一管体装为FA‑QDs复合物管；其中一管为Hank's液管。本肝癌早期诊断试剂盒能够作为一种多模式的靶向荧光探针应用到肝癌细胞的标记、成像，通过对肝癌细胞的标记、示踪，有望实现对肝癌发生、发展的准确诊断。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	邓鑫
发明人：	邓鑫;赵晓芳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910687685.4
公开号：	CN110286110A
代理机构：	北京天盾知识产权代理有限公司
代理人：	贺丽娟
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	530000 广西壮族自治区南宁市兴宁区中华路73号
主权项：	1.一种肝癌早期诊断试剂盒，其特征在于，包括有上盒体结构、下盒体结构及工作模块；上盒体结构包括有上盒体、若干试剂管孔、若干孔板、伸缩柱、盖板、若干管体、洗涤液管；若干管体及洗涤液管均为伸缩管；若干管体活动收容于若干试剂管孔内；若干管体为两端密封的结构，两端均为铝箔进行密封；其中一管体装有小牛血清白蛋白为小牛血清白蛋白管；其中一管体装有固定液为固定液管；其中一管体装有渗透液为渗透液管；其中一管体装有封闭液为封闭液管；其中一管体装有生物素标记山羊抗兔IgG复合物为生物素标记山羊抗兔IgG复合物管；其中一管体装有FA-QDs复合物为FA-QDs复合物管；其中一管体装有Hank's液为Hank's液管；洗涤液管包括有第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体，第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体内部均装有洗涤液，并且两端均通过铝箔进行密封；通过铝箔将第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体依次连接在一起；若干试剂管孔设置在上盒体上；小牛血清白蛋白管、洗涤液管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管分别活动收容于试剂管孔内；每一若干试剂管孔对应设置有一孔板，若干孔板旋转设置在上盒体上；伸缩柱一端与上盒体固定连接，另一端与盖板固定连接；盖板上设置有与若干试剂管孔对应的若干凸起部；凸起部上设置有贯穿凸起部及盖板的下料孔；下盒体结构可拆卸的固定在上盒体结构上；下盒体结构包括有下盒体、过滤膜、排水槽、排水板、振动器；下盒体设置有容纳空间，过滤膜设置在容纳空间内，并将容纳空间分隔成两部分；排水槽设置在下盒体底部，用于将容纳空间中的液体排出；排水板活动收容在排水槽，用于控制排水槽的排水；下盒体上设置有插片，盖板上设置有与插片对应的插槽，下盒体通过插片插入插槽内与上盒体可拆卸的固定；工作模块安装于上盒体上，工作模块包括有显示屏、计时器、蜂鸣器、电源；电源均与显示屏、计时器、蜂鸣器、及振动器连接；计时器分别与蜂鸣器及显示屏连接；计时器分别通过电线与若干管体及洗涤液管上的铝箔连接并形成通路。 2.根据权利要求1所述的一种肝癌早期诊断试剂盒，其特征在于，凸起部呈空心锥形结构。 3.根据权利要求2所述的一种肝癌早期诊断试剂盒，其特征在于，上盒体结构及下盒体结构之间设置有易撕铝膜，易撕铝膜通过与上盒体结构及下盒体结构连接。 4.一种如权利要求3所述肝癌早期诊断试剂盒用于检测肝癌细胞的方法，其特征在于：具体步骤如下： 1)先将小牛血清白蛋白管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管及洗涤液管分别装入试剂管孔，再旋转对应的孔板，将试剂管孔盖住，小牛血清白蛋白管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管及洗涤液管相对凸起部的一端露出上盒体外； 2)将生物样本放入下盒体中的过滤膜上，将排水板对排水槽进行密封；然后将下盒体的插片插入插槽内，将上盒体与下盒体进行固定； 3)将上盒体朝盖板的方向下压；上盒体沿着伸缩柱向盖板的方向移动；小牛血清白蛋白管的铝箔最先被凸起部戳破；小牛血清白蛋白从凸起部的下料孔进入容纳空间内对生物样本细胞进行培养，同时由于小牛血清白蛋白管的铝箔被戳破，计时器与小牛血清白蛋白管的铝箔形成的通路变为断路，计时器开始计时并且在显示屏上显示时间；经过24小时的培养后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；将排水板抽出，将容纳空间中的液体从排水槽排出，得到生物样本细胞； 4)将容纳空间中的液体从排水槽排干净后，将排水槽进行密封，继续将上盒体朝盖板的方向下压；使洗涤液管的第一腔体的铝箔被凸起部戳破；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，同时计时器与第一腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时，并且启动振动器进行振动下盒体；洗涤5分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出； 5)将容纳空间中的洗涤液从排水槽排干净后，将排水槽进行密封，继续将上盒体朝盖板的方向下压；固定液管的铝箔被凸起部戳破；固定液进入容纳空间内对生物样本细胞进行固定，同时计时器与固定液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时，固定15分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；需要将排水板抽出，将容纳空间中的固定液从排水槽排出； 6)继续将上盒体朝盖板的方向下压；使洗涤液管的第二腔体的铝箔被凸起部戳破；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，同时计时器与第二腔体的铝箔形成的通路断开，计时器开始计时，并且启动振动器进行振动下盒体，增强洗涤效果；洗涤5分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出； 7)继续将上盒体朝盖板的方向下压，渗透液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与渗透液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行渗透，渗透5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的渗透液从排水槽排出； 8)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第三腔体的铝箔被凸起部戳破，同时计时器与的第三腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出； 9)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使封闭液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器32与封闭液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；封闭液进入容纳空间内对生物样本细胞进行封闭，5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的封闭液从排水槽排出；再将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第四腔体的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与第四腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出； 10)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使生物素标记山羊抗兔IgG复合物管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与生物素标记山羊抗兔IgG复合物管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；生物素标记山羊抗兔IgG复合物进入容纳空间与生物样本细胞在常温下共孵育1小时后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第五腔体的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与第五腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出； 11)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使FA-QDs复合物管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与FA-QDs复合物管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；FA-QDs复合物进入容纳空间与生物样本细胞在常温下共孵育0.5小时后，蜂鸣器进行蜂鸣；继续将上盒体朝盖板的方向下压，使Hank's液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器32与Hank's液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；Hank's液进入容纳空间内对生物样本细胞进行冲洗脱去背景色10分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；立即将附在过滤膜上的生物样本细胞在倒置荧光显微镜下观察荧光信号并通过荧光信号采集系统进行定量分析。 5.一种如权利要求1中所述的肝癌早期诊断试剂盒中的FA-QDs复合物的制备方法的方法，其特征在于：具体步骤如下： 1)用分析天平精密称取0.001gFA溶于10ml的PBS中，用超声仪FA充分溶解，制成FA溶液；用分析天平精密称取0.001gEDC和0.0005GNHS，将EDC和NHS分别溶于10mL甲醇溶液中，然后取上述FA溶液25μl放于20ml烧杯内，加入EDC、NHS甲醇溶液，将烧杯放置于35℃水浴中搅拌15分钟，得到叶酸活化酯； 2)取PEG-QDs溶液放入烧杯中，将叶酸活化酯缓慢滴入PEG-QDs溶液中，于25℃水浴搅拌2小时，进行酰胺缩合反应，得到FA-QDs溶液；将反应后的溶液装入分子截留量为8000-14000的超滤器中进行透析，放于双蒸水中动态透析24小时，每半小时换一次水；透析后得到纯化的FA-QDs溶液； 3)将纯化的FA-QDs溶液进行冷冻干燥，得到淡红色的FA-QDs复合物。
所属类别：	发明专利