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通用型病原微生物快速磁分离方法及试剂盒
| 专利名称： | 通用型病原微生物快速磁分离方法及试剂盒 |
| 摘要： | 本发明公开了一种通用型病原微生物快速磁分离方法：(1)制备通用桥连磁珠：a)制备磁珠‑链霉亲和素交联物；b)制备生物素‑Ab2交联物；c)制成通用桥连磁珠：将磁珠‑链霉亲和素交联物与生物素‑Ab2交联物混合孵育，制得通用桥连磁珠；(2)制备特异捕捉磁珠：将通用桥连磁珠与待测病原微生物的鼠源性Ab1混合，即可获得特异捕捉磁珠；(3)采用特异捕捉磁珠对待检测样品进行病原体捕捉分离纯化、初步鉴别。还公开了一种试剂盒，包括前述方法制备得到的特异捕捉磁珠。本发明实现了免疫磁珠制备的简易化、性能最优化、易实现自动化，通过分离操作即可获得单一目的菌，能够对样本中多种病原同步、自动化检测。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 广东;44 |
| 申请人： | 珠海市德灏生物科技有限公司 |
| 发明人： | 农高惠;何林声 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-06-14T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-10-08T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910514060.8 |
| 公开号： | CN110308277A |
| 代理机构： | 重庆双马智翔专利代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 顾晓玲 |
| 分类号： | G01N33/569(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 519060 广东省珠海市南屏科技工业园屏西二路5号综合楼第4层401-406 |
| 主权项： | 1.一种通用型病原微生物快速磁分离方法，其特征在于：包括如下步骤： (1)制备通用桥连磁珠： a)制备磁珠-链霉亲和素交联物：取粒径为10～50nm的羧基磁珠,活化后与链霉亲和素结合，并封闭残余活性基团； b)制备生物素-Ab2交联物：取生物素进行活化，再与Ab2偶联；或者，用商品化的水溶性生物素N-羟基琥珀酰亚胺酯与Ab2直接偶联； c)制成通用桥连磁珠：将磁珠-链霉亲和素交联物与生物素-Ab2交联物混合孵育，制得通用桥连磁珠，洗涤去除游离的Ab2； (2)制备特异捕捉磁珠：将前面制备得到的通用桥连磁珠与待测病原微生物的鼠源性Ab1混合，即可获得特异捕捉磁珠，洗涤去除游离Ab1； (3)采用特异捕捉磁珠对待检测样品进行病原体捕捉分离纯化、初步鉴别。 2.如权利要求1所述的通用型病原微生物快速磁分离方法，其特征在于： 所述羧基磁珠的活化方法为碳二亚胺法或者改良碳二亚胺法或者混合酸酐法。 3.如权利要求1所述的通用型病原微生物快速磁分离方法，其特征在于：所述生物素为长链生物素，活化方法为碳二亚胺法或者改良碳二亚胺法或者混合酸酐法。 4.如权利要求1所述的通用型病原微生物快速磁分离方法，其特征在于：所述Ab2为兔抗鼠IgG抗体或羊抗鼠IgG抗体。 5.如权利要求1所述的通用型病原微生物快速磁分离方法，其特征在于：所述磁珠的粒径为30nm。 6.一种通用型病原微生物快速磁分离试剂盒，其特征在于：包括采用权利要求1至5任一项所述的方法制备得到的特异捕捉磁珠。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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