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原文传递一种肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法及肿瘤细胞系免疫组化对照品

专利名称：	一种肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法及肿瘤细胞系免疫组化对照品
摘要：	本发明涉及一种肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法及肿瘤细胞系免疫组化对照品，属于肿瘤阳性参照物技术领域。本发明的对照品的制备方法，是以肿瘤细胞系为对象，制备成细胞系蜡块，为免疫组化实验提供形态相对一致的对照品，保证实验结果的可靠性及可重复性；可以很好的保证细胞形态的一致性，同时能够长久的保存对照品，减少了因为对照样本的问题造成实验结果的不确定性的发生几率。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河南;41
申请人：	河南赛诺特生物技术有限公司
发明人：	米贯勋;牛银银;杨潇燕;刘玲玲;魏东娜;齐华
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-25T00:00:00+0800
申请号：	CN201910695507.6
公开号：	CN110376036A
代理机构：	郑州睿信知识产权代理有限公司
代理人：	牛爱周;吴晓亭
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	450001 河南省郑州市高新技术产业开发区翠竹街1号109号
主权项：	1.一种肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：包括如下步骤： 1）培养肿瘤细胞，离心后弃上清得到细胞团，使用固定剂固定细胞团； 2）离心后弃上清，得到细胞沉淀物并加入低熔点琼脂糖快速混匀，待凝固后加入固定剂二次固定，得到细胞块； 3）将细胞块置于包埋框中进行梯度乙醇脱水，在首次乙醇脱水时，使用含有细胞染色剂的乙醇水溶液进行脱水；脱水后进行透明、浸蜡、包埋处理，得到细胞系蜡块。 2.根据权利要求1所述的肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：步骤1）中所述细胞团中细胞的总数为3107-5107。 3.根据权利要求2所述的肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：步骤1）中所述固定剂为3-5%的中性福尔马林溶液，其加入量为细胞团体积的8-12倍，固定时间为20-40min。 4.根据权利要求1所述的肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：步骤2）中低熔点琼脂糖的浓度为1.5-2.5%，其加入量为细胞沉淀物体积的50%。 5.根据权利要求1所述的肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：步骤2）中所述固定剂为3-5%的中性福尔马林溶液，其加入量为细胞团体积的8-12倍，固定时间为50-70min。 6.根据权利要求1所述的肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：步骤3）中所述细胞染色剂为伊红，伊红的用量为1-2‰。 7.根据权利要求6所述的肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：步骤3）中梯度乙醇脱水具体为依次通过：含有1-2‰伊红的75%乙醇水溶液、85%乙醇水溶液、95%乙醇水溶液、无水乙醇进行脱水。 8.根据权利要求7所述的肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：75%乙醇水溶液脱水时间为25-35min；85%乙醇水溶液脱水时间为55-65min；95%乙醇水溶液和无水乙醇各脱水两次。 9.根据权利要求1所述的肿瘤细胞系免疫组化对照品的制备方法，其特征在于：所述肿瘤细胞分别为HER2检测结果为3+、2+和1+以及阴性的细胞株，在步骤3）中将4个细胞块按次序包埋至同一细胞系蜡块中。 10.一种肿瘤细胞系免疫组化对照品，其特征在于：由包括如下步骤的方法制得： 1）培养肿瘤细胞，离心后弃上清得到细胞团，使用固定剂固定细胞团； 2）离心后弃上清，得到细胞沉淀物并加入低熔点琼脂糖快速混匀，待凝固后加入固定剂二次固定，得到细胞块； 3）将细胞块置于包埋框中进行梯度乙醇脱水，在首次乙醇脱水时，使用含有细胞染色剂的乙醇水溶液进行脱水；脱水后进行透明、浸蜡、包埋处理，得到细胞系蜡块。
所属类别：	发明专利