专利名称: |
一种碲化镉量子点在免疫试纸条上对志贺毒素检测中的应用 |
摘要: |
本发明公开了CdTe‑STX第二抗体复合物及其制备方法和应用,所述CdTe‑STX第二抗体复合物以CdTe量子点接连STX第二抗体获得。本发明还公开了CdTe‑STX第二抗体复合物在制备检测志贺毒素的试剂、试纸条或试剂盒中的应用。本发明还公开了基于碲化镉量子点的免疫荧光试纸条及其制备方法,本发明基于碲化镉量子点的免疫荧光试纸条的灵敏度高,检测极限低至5ng/ml,具有优异的稳定性,重现性和特异性。此外,成本低,操作简单,特异性强,灵敏度高,准确度高且操作非常简便,仅需借助紫外灯就可以读取结果。其对病毒和疾病现场的即时检测(point‑of‑care testing,POCT)具有重大意义。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
江苏;32 |
申请人: |
东南大学 |
发明人: |
丁收年;陆天;朱凯迪;赵春芹;徐来弟;王晓艳;杜凤峦;张慧君;李真真 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2019-07-25T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-10-25T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201910680816.6 |
公开号: |
CN110376381A |
代理机构: |
南京苏高专利商标事务所(普通合伙) |
代理人: |
王艳 |
分类号: |
G01N33/58(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
申请人地址: |
211102 江苏省南京市江宁区东南大学路2号 |
主权项: |
1.CdTe-STX第二抗体复合物,其特征在于,所述CdTe-STX第二抗体复合物以CdTe量子点接连STX第二抗体获得。 2.权利要求1所述的CdTe-STX第二抗体复合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 1)CdTe量子点的制备及纯化; 2)CdTe-STX第二抗体复合物的制备:将步骤1)得到的CdTe量子点与新鲜配置的EDC溶液混合,然后加入STX第二抗体,混合均匀后在振荡器上避光反应,得到CdTe-STX第二抗体复合物。 3.根据权利要求2所述的CdTe-STX第二抗体复合物的制备方法,其特征在于,所述步骤1)CdTe量子点的制备包括:将三巯基丙酸和氯化镉溶解于水中,再用氢氧化钠溶液将pH调至10.5-11.5,得到镉源溶液,同时在氮气氛围保护下,通过碲粉和硼氢化钠发生的还原反应得到碲氢化钠溶液,用注射器移取碲氢化钠溶液溶液注射到上述镉源溶液,反应剧烈搅拌并回流反应即得。 4.根据权利要求2所述的CdTe-STX第二抗体复合物的制备方法,其特征在于,所述步骤1)的纯化包括以下步骤:将制备得到的CdTe量子点加热,时间10-12小时,得到CdTe核,通过不断移去50μL反应液置于紫外灯下观察,得到CdTe核的红色荧光发射后,停止反应,将反应液用乙醇分离,离心,自然环境下干燥,4℃暗处保存。 5.根据权利要求2所述的CdTe-STX第二抗体复合物的制备方法,其特征在于,所述步骤2)的CdTe量子点终浓度为3mg/ml,EDC溶液浓度为10mg/ml。 6.权利要求1所述的CdTe-STX第二抗体复合物在制备检测志贺毒素的试剂、试纸条或试剂盒中的应用。 7.基于碲化镉量子点的免疫荧光试纸条,其特征在于,所述免疫荧光试纸条将权利要求1所述的CdTe-STX第二抗体复合物以STX为抗原,通过抗原-抗体之间的相互作用制备以CdTe量子点为荧光信号标记物的荧光免疫层析试纸条。 8.根据权利要求6所述基于碲化镉量子点的免疫荧光试纸条,其特征在于,所述免疫试纸条还包括依次粘连在黑色底板上的样品垫、包被有检测T线和对照C线的硝基纤维素膜和吸水垫;所述的硝基纤维素膜T线上包被有STX第一抗体;所述的硝基纤维素膜C线上包被有羊抗鼠多克隆抗体。 9.根据权利要求8所述的基于碲化镉量子点的免疫荧光试纸条,其特征在于,所述T线的STX第一抗体的浓度为0.04~0.07 mg/cm2,所述C线的羊抗鼠多克隆抗体的浓度为0.04~0.07 mg/cm2。 10.基于碲化镉量子点的免疫荧光试纸条的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤: 1)CdTe量子点的制备及纯化; 2)CdTe-STX第二抗体复合物的制备及纯化; 3)T线上包被有STX第一抗体、C线上包被有羊抗鼠多克隆抗体的硝基纤维素膜的制备; 4)将黑色底板、样品垫、包被有检测T线和对照C线的硝基纤维素膜、吸水垫组合,底板上的硝基纤维素膜的一端粘贴吸水垫,硝基纤维素膜与吸水垫之间相互重叠1~2 mm,在硝基纤维素膜的另一端粘贴样品垫,即得基于碲化镉量子点的免疫荧光试纸条。 |
所属类别: |
发明专利 |