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原文传递一种用于眼球组织的固定液以及眼球组织制片的预处理方法

专利名称：	一种用于眼球组织的固定液以及眼球组织制片的预处理方法
摘要：	本发明属于病理试剂技术领域，具体涉及一种用于眼球组织的固定液以及眼球组织制片的预处理方法。所述固定液的各组分按体积百分比计为：房水等渗液20～50％、乙酸1％～10％、甲醛1～15％、无水乙醇30％～50％、纯水10～20％；所述房水等渗液由氯化钠、尿素、氯化钾和纯水组成，氯化钠的浓度为136～154mM，尿素的浓度为10～15mM，氯化钾的浓度为1～3mM。采用本发明所述固定液和预处理方法制片能保证眼球的形态结构的完整性，可防止制片过程中视网膜的碎裂和脱落，对眼球后续形态学，组织学，病理学的研究有积极而深远的意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	武汉赛维尔生物科技有限公司
发明人：	张高英;刘姗姗;洪盼
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-14T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910749874.X
公开号：	CN110361242A
代理机构：	湖北武汉永嘉专利代理有限公司
代理人：	徐晓琴
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	430040 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二路388号武汉光谷国际生物
主权项：	1.一种用于眼球组织的固定液，其特征在于，所述固定液由房水等渗液、乙酸、甲醛、无水乙醇和纯水组成，所述房水等渗液由氯化钠、尿素、氯化钾和纯水组成，所述固定液的各组分按体积百分比计为：房水等渗液20~50%、乙酸1%~10%、甲醛1~15%、无水乙醇30%~50%、纯水10~20%。 2.根据权利要求1所述用于眼球组织的固定液，其特征在于，所述房水等渗液中氯化钠的浓度为136~154 mM，尿素的浓度为10~15 mM，氯化钾的浓度为1~3 mM。 3.根据权利要求1所述用于眼球组织的固定液，其特征在于，所述甲醛溶液的体积浓度为37~40%。 4.利用权利要求1~3任一所述固定液进行眼球组织制片的预处理方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）使用所述固定液固定所述眼球组织，再将固定的眼球组织用冰冻切片包埋剂包埋；（2）将步骤（1）包埋后的眼球组织冷冻，使眼球组织变硬；然后对冷冻的眼球组织进行粗切，去除眼球组织内的房水和玻璃体；（3）将步骤（2）去除了房水和玻璃体的眼球组织重新用所述固定液固定；固定结束后再将眼球组织进行梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡包埋。 5.根据权利要求4所述的预处理方法，其特征在于，步骤（1）所述冰冻切片包埋剂为OCT包埋剂，所述使用固定液固定眼球组织的时间为22~24 h。 6.根据权利要求4所述的预处理方法，其特征在于，步骤（2）所述眼球组织的冷冻和粗切都在冰冻切片机上进行；所述粗切的形式为：沿眼球组织的矢状面方向切去所述眼球组织的1/4至1/3。 7.根据权利要求4所述的预处理方法，其特征在于，步骤（2）所述冷冻眼球组织的温度为-20℃至-25℃；步骤（3）所述眼球组织重新用所述固定液固定的时间为24~48 h。 8.根据权利要求4所述的预处理方法，其特征在于，步骤（3）所述梯度酒精脱水的具体流程为：75%酒精4 h，85%酒精2 h，90%酒精2 h，95%酒精1 h，无水乙醇I 30 min，无水乙醇II 30 min。 9.根据权利要求4所述的预处理方法，其特征在于，所述二甲苯透明的具体流程为：二甲苯I 5~10 min，二甲苯II 5~10 min。 10.根据权利要求4所述的预处理方法，其特征在于，所述石蜡浸蜡包埋的具体流程为：石蜡I 1 h，石蜡II 1 h，石蜡III 1 h。
所属类别：	发明专利