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原文传递一种铁皮石斛药材的质量检测方法

专利名称：	一种铁皮石斛药材的质量检测方法
摘要：	本发明公开了一种铁皮石斛药材的质量检测方法，以紫外分光光度法测定药材中黄酮碳苷的含量，以黄酮碳苷类化合物为对照品，超声提取，多次用中极性有机溶剂和水饱和正丁醇萃取，得到总黄酮碳苷，然后用显色法含量测定。本发明方法简便、易行、重复性好，能够确切反映铁皮石斛药材中总黄酮碳苷的含量，进一步完善了铁皮石斛药材的质量标准，弥补了铁皮石斛质量评价中缺乏对以碳苷黄酮为代表的黄酮类特征成分的检测方法的不足，使铁皮石斛药材的质量检测技术更科学、合理。采用本发明所述检测方法可有效控制铁皮石斛药材的质量，从而确保其临床应用的安全性、稳定性和有效性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江大学
发明人：	甘礼社;方昊天;莫建霞;诸凯凯;毛碧增
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910655781.0
公开号：	CN110361346A
代理机构：	杭州求是专利事务所有限公司
代理人：	赵杭丽
分类号：	G01N21/33(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
主权项：	1.一种铁皮石斛药材的质量检测方法，其特征在于，采用紫外分光光度法,以铁皮石斛中含有的黄酮碳苷类化合物为对照品，采用高浓度醇水系统超声提取，依次用中极性有机溶剂和水饱和正丁醇萃取，取正丁醇萃取物再用1M盐酸甲醇溶液水解，再依次用中极性有机溶剂和水饱和正丁醇萃取以得到总黄酮碳苷，最后以外标法对铁皮石斛中的总黄酮碳苷进行含量测定。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，具体检测步骤如下： 1)将铁皮石斛粉碎，过80目筛，精密量取1g铁皮石斛粉末，以重量/体积比为13-100倍量的高浓度醇水系统超声提取10-60min，滤过，残渣再用溶剂洗涤，合并滤液和洗液，置于100mL容量瓶，定容，摇匀，作为提取液；取20mL提取液，蒸干，用10mL水复溶，超声溶解，转移，再用5mL水润洗，一并转移，用15mL中极性有机溶剂萃取3次，弃有机相，再用15mL水饱和正丁醇萃取3次，弃水相，蒸干正丁醇相后，加入20mL1M盐酸甲醇溶液，在95℃下酸解80min，蒸干酸液，用10mL水复溶，超声溶解，转移，再用5mL水润洗，一并转移，使用15mL中极性有机溶剂萃取3次，弃有机相，再用15mL水饱和正丁醇萃取3次，弃水相；蒸干正丁醇相后，先加入10mL60％乙醇超声溶解，再加入10mL1％三乙胺溶液，配成供试液； 2)对照品溶液的制备：取黄酮碳苷类化合物对照品，加60％乙醇溶解制成溶液； 3)测定法：以60％乙醇：1％三乙胺＝1:1的溶液为空白参比溶剂；采用紫外分光光度法，测试在400nm波长处的吸光度，空白溶液无干扰；用标准曲线法计算含量。 3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，更为具体检测步骤如下： 1)将铁皮石斛粉碎，过80目筛，取1g铁皮石斛粉末，置于锥形瓶中，加入50mL90％甲醇溶液，超声提取40min，滤过，残渣也用90％甲醇溶液洗涤，合并滤液和洗液，置于100mL容量瓶，定容，摇匀，作为提取液；精密量取20mL提取液，蒸干，用10mL水复溶，超声溶解，转移，再用5mL水润洗，一并转移，用15mL氯仿萃取3次，弃有机相，再用15mL水饱和正丁醇萃取3次，弃水相，蒸干正丁醇相后，加入20mL1M盐酸甲醇溶液，在95℃下酸解80min，蒸干酸液，用10mL水复溶，超声溶解，转移，再用5mL水润洗烧瓶，一并转移，使用15mL氯仿萃取3次，弃有机相，再用15mL水饱和正丁醇萃取3次，弃水相，蒸干正丁醇相后，先加入10mL60％乙醇超声溶解，再加入10mL1％三乙胺溶液，配成供试液； 2)对照品溶液的制备：精密称取异夏佛塔苷对照品4.7mg，置于50mL容量瓶中，加60％乙醇溶解，定容，精密量取标准溶液0.5、1.0、1.5、2、3、4mL，分别置于10mL容量瓶中定容，即得对照品溶液； 3)测定法：以60％乙醇：1％三乙胺＝1:1的溶液为空白参比溶剂；按照紫外分光光度法在400nm波长处测吸光度，空白溶液无干扰；用标准曲线法计算含量，以吸光度为纵坐标Y，异夏佛塔苷浓度为横坐标X进行线性回归，求得回归方程式为y＝43.492x+0.0268，线性范围为0.00235mg/mL-0.0188mg/mL，相关系数R2＝0.996，线性关系良好。 4.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述铁皮石斛中含有的黄酮碳苷类化合物对照品包括但不限于异夏佛塔苷、夏佛塔苷铁皮石斛中含有的以芹菜素为苷元的黄酮碳苷。 5.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述提取用高浓度醇水系统包括但不限于浓度为60％-95％的甲醇水溶液体系和乙醇水溶液体系体系；所述中极性有机溶剂包括但不限于三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸乙酯。
所属类别：	发明专利