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原文传递一种陈皮对照提取物及其制备方法和应用

专利名称：	一种陈皮对照提取物及其制备方法和应用
摘要：	本发明公开了一种陈皮对照提取物及其制备和应用，所述提取物为黄绿色干燥粉末，其是由含重量百分比陈皮提取物65‑84％和助流剂16‑35％组成，所述陈皮提取物中包括黄酮苷和黄酮苷元成分，所述黄酮苷中不含新橙皮苷和柚皮苷。该陈皮对照提取物一致性好、性状稳定、均匀，可用于陈皮药材、陈皮制剂的质量控制，对有效化合物定性定量的分析测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州万正药业有限公司
发明人：	郭隆钢;许舜军;许艺镌;赵岳锐
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-25T00:00:00+0800
申请号：	CN201810330290.4
公开号：	CN110376319A
代理机构：	北京君尚知识产权代理有限公司
代理人：	余长江
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510663 广东省广州市萝岗区科学城芳草甸路2号
主权项：	1.一种陈皮对照提取物，其特征在于，所述提取物为黄绿色干燥粉末，其是由含重量百分比陈皮提取物65-84％和助流剂16-35％组成，所述陈皮提取物中包括黄酮苷和黄酮苷元成分，所述黄酮苷中不含新橙皮苷和柚皮苷。 2.如权利要求1所述的一种陈皮对照提取物，其特征在于，所述黄酮苷元类成是川陈皮素和/或红橘素；所述黄酮苷类成分是橙皮苷。 3.如权利要求1所述的一种陈皮对照提取物，其特征在于，其中橙皮苷含量14％～22％，优选16％～20％。 4.如权利要求1所述的一种陈皮对照提取物，其特征在于，是通过下述方法制备得到的： (1)粗提：取不同来源及批次的陈皮药材粉末用醇超声提取，滤过得滤液1；药渣再用醇超声提取1-3次，收集的1-3次滤液与滤液1混合、蒸干得到粗提物； (2)精制：粗提物溶解于水，抽滤得到滤渣；将滤渣用水冲洗至无色，收集滤液2和沉淀物；滤液2上大孔树脂柱，先用水冲洗大孔树脂，弃去洗脱液1，再用含水醇洗脱大孔树脂，收集洗脱液2，洗脱液2与沉淀物混合，蒸干得到陈皮提取物； (3)混合：在陈皮提取物中添加助流剂，研磨过滤，即得陈皮提取物混合物； (4)调配：将不同来源或批次的陈皮提取物混合物进行调配，得到陈皮对照提取物。 5.如权利要求4所述的一种陈皮对照提取物，其特征在于，步骤(1)中陈皮药材粉末与甲醇的重量体积比为1:8～1:50；所述超声时间为30～60min，功率为100W～3kW；所述蒸干温度为20～50℃；步骤(2)中所述的滤液2是用其重量1～4倍的大孔树脂层析，是先用5～10个柱体积纯净水冲洗大孔树脂，收集洗脱液1弃去；再用3～10个柱体积70％～100％甲醇冲洗大孔树脂，收集洗脱液2；步骤(3)中助流剂与陈皮提取物重量比为(2-5):10；步骤(4)所述的调配具体指：将不同来源或批次的陈皮提取物进行调配，应使最终的陈皮对照提取物中橙皮苷的重量百分比含量在14％～22％。 6.如权利要求5所述的一种陈皮对照提取物，其特征在于，在步骤(1)前增加不同陈皮药材来源的筛选步骤：将不同来源或批次的原料药材以薄层色谱法和/或高效液相色谱法进行检测；然后对不同来源或批次的原料药材的通过薄层色谱法和/或高效液相色谱法得到的色谱图和/或测定的含量进行比较分析，剔除色谱图和/或测定的含量异常的原料药材，保留色谱图和/或测定的含量一致的原料药材进行下一步的粗提。 7.如权利要求6所述的一种陈皮对照提取物，其特征在于，所述的原药材的薄层色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液的制备：取橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、川陈皮素和红橘素对照品精密称定，分别用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液； (2)药材供试品溶液的制备：陈皮药材粉末加甲醇浸泡，超声处理，离心，取上清液即得药材供试品溶液，或不离心直接过滤膜即得药材供试品溶液； (3)薄层色谱检测： a针对黄酮苷类：薄层板：硅胶预制板点样：药材供试品溶液点样量1μl，条带状点样展开剂：氯仿:甲醇:水:冰乙酸＝13:4:1:1.5(10℃以下分层，取下层) 展开：于双槽展开缸，一侧加展开剂10ml，预平衡15分钟，展开上行8.5cm 检视：喷以5％AlCl3乙醇溶液，薄层板置薄层加热板上105℃加热5分钟，置于UV紫外光灯366nm下检视； b针对黄酮苷元类薄层板：硅胶预制板点样：药材供试品溶液点样量1μl，条带状点样展开剂：展开剂1，甲苯：乙酸乙酯：甲酸：水＝20:20:1:1，10℃以下分层，取上层；展开剂2，甲苯：乙酸乙酯：甲酸：水＝20:10:1:1，10℃以下分层，取上层；展开：先用展开剂1展开8.5cm，再用展开剂2展开8.5cm，每次展开前双槽展开缸，应用10ml展开剂预平衡15分钟，薄层板置薄层加热板上50℃加热15分钟；检视：展开后挥干薄层板表面溶剂，于UV紫外光灯366nm下检视，拍照； (4)所述的高效液相色谱法包括如下步骤：化学对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品精密称定，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液；药材供试品溶液的制备：陈皮药材粉末，精密称定，置于锥形瓶中，加入60-80℃石油醚回流提取，过滤，弃滤液，滤渣用60-80℃石油醚5ml冲洗，挥干药渣，加甲醇，回流提取，放冷，过滤，用甲醇冲洗容器，置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度线，定容，摇匀，滤膜即得药材供试品溶液；高效液相色谱法检测条件如下：色谱仪器：高效液相色谱仪；检测器：DAD检测器；检测波长：280nm 色谱柱：C184.6×250mm,5μm；柱温：20℃ 流动相：流动相A为乙腈，流动相B为水；梯度洗脱程序进行：流速：0.8ml/min；进样量：10μl；运行时间：65min 时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％) 0 5 95 30 25 75 55 95 5 65 95 5 检测方法：精密吸取药材供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。 8.如权利要求7所述的一种陈皮对照提取物，其特征在于，所述的原药材的薄层色谱法包括如下步骤：所述陈皮对照提取物采用薄层色谱法检测得到的色谱图中的川陈皮素、红橘素和橙苷位置处的荧光斑点和采用高效液相色谱法检测得到的色谱图在橙皮苷位置处的色谱峰应分别与其对应的化学对照品或其对应的原料药材一致。 9.一种陈皮或含陈皮有效成分的药材或中药制剂的质量控制方法，其特征在于：权利要求1所述陈皮对照提取物、待测样品以薄层色谱法和/或高效液相色谱法进行检测，对比判别。 10.如权利要求9所述的一种陈皮或含陈皮有效成分的药材或中药制剂的质量控制方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)化学对照品溶液的制备：取橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、川陈皮素和红橘素对照品精密称定，分别用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液； (2)陈皮对照提取物溶液的制备：陈皮提取物，精密称定，置2ml量瓶中，加甲醇1.5ml，超声处理15分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过0.22μm滤膜即得陈皮提取物溶液； (3)待测样品供试品溶液制备：陈皮药材粉末或含陈皮制剂加甲醇浸泡，超声处理，离心，取上清液即得供试品溶液，或不离心直接过滤膜即得供试品溶液； (4)薄层色谱检测： a针对黄酮苷类：薄层板：硅胶预制板点样：对照品、供试品溶液点样量1μl，条带状点样展开剂：氯仿:甲醇:水:冰乙酸＝13:4:1:1.5(10℃以下分层，取下层) 展开：于双槽展开缸，一侧加展开剂10ml，预平衡15分钟，展开上行8.5cm 检视：喷以5％AlCl3乙醇溶液，薄层板置薄层加热板上105℃加热5分钟，置于UV紫外光灯366nm下检视； b针对黄酮苷元类薄层板：硅胶预制板点样：对照品，供试品溶液点样量1μl，条带状点样展开剂：展开剂1，甲苯：乙酸乙酯：甲酸：水＝20:20:1:1，10℃以下分层，取上层；展开剂2，甲苯：乙酸乙酯：甲酸：水＝20:10:1:1，10℃以下分层，取上层；展开：先用展开剂1展开8.5cm，再用展开剂2展开8.5cm，每次展开前双槽展开缸，应用10ml展开剂预平衡15分钟，薄层板置薄层加热板上50℃加热15分钟；检视：展开后挥干薄层板表面溶剂，于UV紫外光灯366nm下检视，拍照； (5)所述的高效液相色谱法包括如下步骤：化学对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品精密称定，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液；陈皮对照提取物溶液的制备：陈皮对照提取物，精密称定，于100ml容量瓶中，加入80ml甲醇，超声30分钟，放冷，甲醇定容至刻度，通过0.22μm即得陈皮提取物供试品溶液；待测样品供试品溶液制备：陈皮药材粉末或含陈皮制剂，精密称定，置于锥形瓶中，加入60-80℃石油醚回流提取，过滤，弃滤液，滤渣用60-80℃石油醚5ml冲洗，挥干药渣，加甲醇，回流提取，放冷，过滤，用甲醇冲洗容器，置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度线，定容，摇匀，滤膜即得供试品溶液；高效液相色谱法检测条件如下：色谱仪器：高效液相色谱仪；检测器：DAD检测器；检测波长：280nm 色谱柱：C184.6×250mm，5μm；柱温：20℃ 流动相：流动相A为乙腈，流动相B为水；梯度洗脱程序进行：流速： 0.8ml/min；进样量：10μl；运行时间：65min 时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％) 0 5 95 30 25 75 55 95 5 65 95 5 检测方法：精密吸取化学对照品、陈皮对照提取物，供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
所属类别：	发明专利