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原文传递一种测定发酵豆粕中乳酸含量的方法以及测定用待测液的提取方法

专利名称：	一种测定发酵豆粕中乳酸含量的方法以及测定用待测液的提取方法
摘要：	本发明提供了一种测定发酵豆粕中乳酸含量的方法以及测定用待测液的提取方法，涉及发酵豆粕中乳酸含量的测定方法领域。该测定方法包括将待测液进行高效液相色谱检测；其中，待测液的提取方法包括：用水提取样品，提取后分离，取第一上清液，向第一上清液中加入无水乙醇以沉淀蛋白，静置后分离，取第二上清液作为待测液。本申请选用先水提后沉淀的方式对样品进行提取和处理，乳酸提取充分，蛋白质经有效沉淀后，能够分离掉其他杂质分子，在利用高效液相色谱对该待测液进行检测时，能够有效去除杂峰干扰，保证了乳酸提取充分的同时确保色谱基线的平稳性，并且分辨率稳定、误差小，测得的数据稳定性好，可靠性高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	亚太星原农牧科技海安有限公司
发明人：	王少青;陈淋敏;张幻;李炯明;仲伟迎;吴有林
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-08T00:00:00+0800
申请号：	CN201910867874.X
公开号：	CN110426481A
代理机构：	北京超成律师事务所
代理人：	董佳
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	226000 江苏省南通市海安县城东镇晓星大道115号
主权项：	1.一种测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，其包括将待测液进行高效液相色谱检测；其中，所述待测液的提取方法包括：用水提取样品，提取后分离，取第一上清液，向所述第一上清液中加入无水乙醇以沉淀蛋白，静置后分离，取第二上清液作为待测液。 2.根据权利要求1所述的测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，采用所述高效液相色谱进行检测时的检测波长为200－220nm；优选地，采用所述高效液相色谱进行检测时的色谱柱为Hi－plex H；优选地，采用所述高效液相色谱进行检测时的流动相为0.1－0.2％三氟乙酸；优选地，采用所述高效液相色谱进行检测时流动相的流速为0.5－0.7mL/min；优选地，采用所述高效液相色谱进行检测时的柱温为42－48℃；优选地，采用所述高效液相色谱进行检测时的进样量为10－20μL。 3.根据权利要求1所述的测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，所述样品与所述水的料液比为1g：18－22ml；优选为1g：19－21ml。 4.根据权利要求1所述的测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，所述第一上清液与所述无水乙醇的体积比为2－9：1－8；优选为5－9：1－5。 5.根据权利要求1所述的测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，在加入所述无水乙醇时，采用边加边摇动的方式加入。 6.根据权利要求1所述的测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，所述提取的温度为50－70℃，优选为60℃；优选地，所述提取在振荡条件下进行；优选地，所述提取在水浴摇床中进行；优选地，所述提取时水浴摇床的转速为100－130r/min。 7.根据权利要求1所述的测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，利用所述水提取所述样品的提取时间为1－1.5h。 8.根据权利要求1所述的测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，提取后分离包括利用滤纸过滤或于8000－12000r/min下离心过滤8－12min。 9.根据权利要求1所述的测定发酵豆粕中乳酸含量的方法，其特征在于，在将所述第二上清液作为待测液之前，还包括将所述第二上清液过0.22μm滤膜。 10.一种测定用待测液的提取方法，其特征在于，其包括：用水提取样品，提取后分离，取第一上清液，向所述第一上清液中加入无水乙醇以沉淀蛋白，静置后分离，取第二上清液作为待测液。
所属类别：	发明专利