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原文传递一种治疗气虚血瘀证的中药组合物的检测方法

专利名称：	一种治疗气虚血瘀证的中药组合物的检测方法
摘要：	本发明涉及一种治疗气虚血瘀证的中药组合物的检测方法，所述中药组合物是由下述红芪500g、三七100g、泽泻333g、当归333g、川芎200g、蝉蜕100g、郁金200g桂枝100g原料药材制备而制成；所述中药组合物的检测方法包括以下红芪、桂枝、川芎、当归、三七、泽泻药材的薄层鉴别方法，以及三七皂苷R1和芒柄花素含量测定方法。该检测方法具有操作更为简便，方法可靠，重现性好的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	陕西步长制药有限公司
发明人：	王永炎;卢新义;赵涛;王忠;朱晓新;李慧;高颖;苏英英;马久太;李炜
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201810328487.4
公开号：	CN110412198A
分类号：	G01N30/90(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	712000 陕西省咸阳市渭阳西路西延段123号信箱
主权项：	1.一种治疗气虚血瘀证的中药组合物的检测方法，所述中药组合物是由下述红芪500g、三七100g、泽泻333g、当归333g、川芎200g、蝉蜕100g、郁金200g桂枝100g原料药材制备而制成；其特征在于，所述中药组合物的检测方法包括以下薄层鉴别方法，三七皂苷R1和芒柄花素含量测定方法。 2.如权利要求1所述中药组合物的检测方法，其特征在于，所述检测方法的薄层鉴别方法为如下项目(1)～(6)中任意一种或多种的组合： (1)、红芪的鉴别方法：取所述中药组合物，研细，加甲醇，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加乙醚萃取，蒸干，残渣加使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯比例0.5～2：0.5～2为展开剂，用展开剂预饱和，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点； (2)、桂枝的鉴别方法：取桂枝对照药材，照鉴别(1)项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液，另取肉桂酸对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取鉴别(1)项下供试品溶液和上述两种溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以石油醚-正己烷-甲酸乙酯-甲酸1.5～2.5：5～7：2～4：0.1～0.3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (3)、川芎的鉴别方法：取川芎对照药材，照鉴别(1)项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(1)项下供试品溶液和上述对照药材溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯0.8～1.2：0.8～1.2为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (4)、当归的鉴别方法：取阿魏酸对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(1)项下供试品溶液和上述对照品溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸3.5～4.5：0.8～1.2：3.5～4.5：0.05～0.15为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (5)、三七的鉴别方法：取中药组合物，研细，加甲醇，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加水饱和正丁醇萃取，用氨试液洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液，另取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、三七皂苷R1对照品及人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水60～70：32～37：8～12为展开剂，展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (6)、泽泻的鉴别方法：取中药组合物，研细，加甲醇超声，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加乙酸乙酯萃取，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材，加乙酸乙酯，超声，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯0.8～1.2：0.8～1.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硅钨酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 3.如权利要求2所述中药组合物的检测方法，其特征在于，所述检测方法的薄层鉴别方法为如下项目(1)～(6)中任意一种或多种的组合： (1)、红芪的鉴别方法：取所述中药组合物，研细，加甲醇，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加乙醚萃取，蒸干，残渣加使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯比例0.5～2：0.5～2为展开剂，用展开剂预饱和，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点； (2)、桂枝的鉴别方法：取桂枝对照药材，照鉴别(1)项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液，另取肉桂酸对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取鉴别(1)项下供试品溶液和上述两种溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以石油醚-正己烷-甲酸乙酯-甲酸1.5～2.5：5～7：2～4：0.1～0.3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (3)、川芎的鉴别方法：取川芎对照药材，照鉴别(1)项下供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(1)项下供试品溶液和上述对照药材溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯0.8～1.2：0.8～1.2为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (4)、当归的鉴别方法：取阿魏酸对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(1)项下供试品溶液和上述对照品溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸3.5～4.5：0.8～1.2：3.5～4.5：0.05～0.15为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (5)、三七的鉴别方法：取中药组合物，研细，加甲醇，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加水饱和正丁醇萃取，用氨试液洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液，另取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、三七皂苷R1对照品及人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水60～70：32～37：8～12为展开剂，展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (6)、泽泻的鉴别方法：取中药组合物，研细，加甲醇超声，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，加乙酸乙酯萃取，蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材，加乙酸乙酯，超声，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯0.8～1.2：0.8～1.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硅钨酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 4.如权利要求1所述中药组合物的检测方法，其特征在于，所述三七皂苷R1的含量测定方法包括如下步骤： ⑴、色谱条件：以乙腈为流动相A，水为流动相B，按下述洗脱比例，进行梯度洗脱：时间，0～20分钟，流动相A(％)：21→50，流动相B(％)79→50； ⑵、对照品溶液的制备：精密称取三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rg1对照品及人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇制成每1ml含三七皂苷R10.1～0.3mg、人参皂苷Rg10.4～0.6mg、人参皂苷Rb10.3～0.5mg的混合溶液，即得， ⑶、供试品溶液的制备：取中药组合物，混匀，取适量，研细，精密称定，精密加甲醇，称定重量，置水浴上回流1～3小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得， ⑷、测定法：分别精密吸取对照品溶液，供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。 5.如权利要求1所述的中药组合物的检测方法，其特征在于，所述中药组合物中的芒柄花素含量测定方法包括如下步骤： ⑴、色谱条件：以甲醇-水55～60：40～45为流动相；检测波长为250nm，柱温25～35℃； ⑵、对照品溶液的制备：取芒柄花素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含6～10μg的溶液，即得； ⑶、供试品溶液的制备：取中药组合物，混匀，研细，精密称定，置于锥形瓶内，加甲醇，水浴回流，滤过，将滤渣连同滤纸装于锥形瓶中，再加入甲醇，回流，合并两次滤液，用甲醇清洗滤纸，减压浓缩，并将浓缩液定容至量瓶，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 6.如权利要求4所述的中药组合物的检测方法，其特征在于，所述步骤⑴中的色谱条件为：以甲醇-水58：42为流动相；检测波长为250nm，柱温30℃。
所属类别：	发明专利