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原文传递一种用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法

专利名称：	一种用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法
摘要：	本发明公开了一种用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法，属于中药组合物质量检测技术领域，包括对中药组合物中马钱苷和丹皮酚的含量测定，包括采用高效液相色谱法检测马钱苷的含量和采用薄层色谱鉴别对中药组合物中栀子的定性鉴别。本发明含量测定对色谱条件及供试品的制备方法方面都进行创新和优化，采用新设计的乙腈‑0.3%磷酸水溶液进行梯度洗脱，在同一个色谱体系下，使用双波长，同时检测多种成分含量，简便、快速、易操作、重复性好。栀子定性鉴别采用新设计的提取方法和薄层色谱条件，较现有方法简便、快速、易操作、重复性好，且荧光斑点显色后非常清晰，阴性无干扰。本发明的评价指标能够对制剂中间品和成品进行有效的质量控制。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	甘肃;62
申请人：	兰州佛慈制药股份有限公司
发明人：	孙科;郝泉;柴国林;于颖
专利状态：	有效
申请日期：	2021-11-26T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-11T00:00:00+0800
申请号：	CN202111416185.0
公开号：	CN114166965A
代理机构：	兰州嘉诺知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	吴迪
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/74;G01N30/90;G01N30/94;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/74;G01N30/90;G01N30/94
申请人地址：	730000 甘肃省兰州市永登县兰州新区华山路2289号
主权项：	1.一种用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法，中药组合物包括生地黄、牡丹皮、钩藤、茯苓、山药、山茱萸、当归、珍珠母、菊花、川芎、苦杏仁、酸枣仁、地龙、半夏、栀子、甘草、僵蚕和胆南星，其特征在于包括对中药组合物中马钱苷和丹皮酚的含量测定，包括如下步骤：（1）采用高效液相色谱法检测马钱苷的含量，色谱条件为：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：乙腈-0.3%磷酸水溶液；洗脱方式：梯度洗脱，梯度洗脱时流动相中乙腈的体积比随时间变化为：0.01-15min，8%-12%；15-20min，8%-12%→6%-10%；20-25min，6%-10%→16%-20%；25-27min，16%-20%→35%-39%；27-38min，35%-39%；38-43min，35%-39%→8%-12%；43-48min，8%-12%；柱温：36-44℃；流速：1.0ml/min；检测波长：马钱苷为240nm，丹皮酚为274nm；理论塔板数：按马钱苷和丹皮酚峰计算不低于3000；（2）用于治疗眩晕的中药组合物供试品制备：取中药组合物3重量份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50体积份，密塞，称量，超声处理60min，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液作为用于治疗眩晕的中药组合物供试品溶液；（3）对照品制备：取马钱苷和丹皮酚对照品，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇制成每1ml含马钱苷1.5354-30.7088μg和丹皮酚2.5010-50.0093μg的混合溶液，即制成马钱苷和丹皮酚混合对照品溶液；同时制备不含山茱萸和牡丹皮的阴性对照品溶液；（4）分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液和不含山茱萸和牡丹皮的阴性对照品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得；每9g用于治疗眩晕的中药组合物含山茱萸以马钱苷计，不得少于0.62mg；含牡丹皮以丹皮酚计，不得少于0.99mg。 2.如权利要求1中所述用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法，其特征在于：步骤（3）中所述梯度洗脱时流动相中乙腈的体积比随时间变化为：0.01-15min，10%；15-20min，10%→8%；20-25min，8%→18%；25-27min，18%→37%；27-38min，37%；38-43min，37%→10%；43-48min，10%。 3.如权利要求1或2中所述用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法，其特征在于：步骤（3）中所述柱温为40℃。 4.如权利要求3中所述用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法，其特征在于：步骤（1）中超声处理的功率为600W，频率为40kHz。 5.如权利要求1-4中任一所述用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法，其特征在于：所述检测方法还包括采用薄层色谱鉴别对中药组合物中栀子的定性鉴别，包括如下步骤：（1）取用于治疗眩晕的中药组合物制备成供试品溶液，同时制备栀子苷对照品溶液和不含栀子的阴性对照品溶液；（2）分别取步骤（1）的到的三种溶液点于同一硅胶G薄层板上；（3）以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水的溶液为展开剂，将薄层板放置在展开箱中展开，取出后晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品相应色谱位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。 6.如权利要求5所述用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法，其特征在于：所述采用薄层色谱鉴别对中药组合物中栀子的定性鉴别，包括如下步骤：（1）取用于治疗眩晕的中药组合物10-36重量份，粉碎后置于容器中，加乙醚35-40体积份，振摇10-20min，弃去乙醚，残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯35体积份，置水浴上加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，制成栀子苷对照品溶液；按照用于治疗眩晕的中药组合物中各药材比例及制备工艺配制不含栀子的阴性样品，同法制成不含栀子的阴性对照品溶液；（2）分别取步骤（1）得到的三种溶液各5体积份，点于同一硅胶G薄层板上；（3）以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水的体积比为8-12:5.5-8.5:1-3:0.2-0.7的溶液为展开剂，将薄层板放置在展开箱中展开，展距9-11cm，取出后晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，于90-105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品相应色谱位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。 7.如权利要求6所述用于治疗眩晕的中药组合物的检测方法，其特征在于：所述采用薄层色谱鉴别对中药组合物中栀子的定性鉴别，包括如下步骤：（1）取用于治疗眩晕的中药组合物18重量份，粉碎后置于容器中，加乙醚35体积份，振摇10min，弃去乙醚，残渣挥去乙醚，加乙酸乙酯35体积份，置水浴上加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1体积份使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，制成栀子苷对照品溶液；按照用于治疗眩晕的中药组合物中各药材比例及制备工艺配制不含栀子的阴性样品，同法制成不含栀子的阴性对照品溶液；（2）分别取步骤（1）得到的三种溶液各5体积份，点于同一硅胶G薄层板上；（3）以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水的体积比为10：7：2：0.5的溶液为展开剂，将薄层板放置在展开箱中展开，展距10cm，取出后晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品相应色谱位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。
所属类别：	发明专利