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原文传递基于代谢标记物检测食品中金黄色葡萄球菌活菌的方法

专利名称：	基于代谢标记物检测食品中金黄色葡萄球菌活菌的方法
摘要：	本发明提供了基于代谢标记物检测食品中金黄色葡萄球菌活菌的方法，属于食品检测技术领域。基于代谢标记物检测食品中金黄色葡萄球菌活菌的方法，包括以下步骤：将待测食品样本转移至质量浓度7.5％氯化钠肉汤中，增菌培养；从得到的培养液中萃取挥发性代谢产物，将得到的挥发性代谢产物经气相色谱质谱联用仪分析，得到离子流色谱图；当离子流色谱图中存在3‑甲基丁酸的特征峰，判断待测食品样本污染了金黄色葡萄球菌。本发明提供的方法以3‑甲基丁酸作为代谢标志物来检测食品中金黄色葡萄球菌具有检测准确性高、重复性好，适用范围广的特点，大大简化了以往常规技术中检测金黄色葡萄球菌的繁琐操作。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	四川;51
申请人：	西南民族大学
发明人：	陈娟;胡凯丽;唐俊妮;代义闯;李延梅
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910739276.4
公开号：	CN110412168A
代理机构：	北京高沃律师事务所
代理人：	马云华
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	610000 四川省成都市武侯区一环路南四段16号
主权项：	1.基于代谢标记物检测食品中金黄色葡萄球菌活菌的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)将待测食品样本转移至质量浓度7.5％氯化钠肉汤中，经增菌培养，得到培养液； 2)从步骤1)中所述培养液中萃取挥发性代谢产物，将得到的挥发性代谢产物用气相色谱质谱联用仪分析，得到离子流色谱图； 3)当步骤2)中所述离子流色谱图中存在3-甲基丁酸的特征峰，判断待测食品样本污染了金黄色葡萄球菌；当离子流色谱图中不存在3-甲基丁酸的特征峰，判断待测食品样本中没有污染金黄色葡萄球菌。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述萃取是采用50/30μm二乙基苯/碳分子筛/聚二甲基硅氧烷萃取头进行萃取。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述萃取的过程依次包括预孵化和萃取；所述预孵化的温度为80℃；所述预孵化的时间为10min；所述萃取的时间为30min；萃取期间伴随80℃加热。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述气相色谱质谱联用仪进行气相色谱分析时，所述气相色谱分析的条件如下：长×宽×粒径分别为30m×0.25mm×0.25μm的TR-FFAP色谱柱；不分流模式，不分流1min之后分流比为50:1；流速1mL/min；升温程序：40℃保持3min，7℃/min升温至220℃并保持2min；载气为99.999％氦气；进样口温度230℃；解吸时间2min。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述气相色谱质谱联用仪进行质谱分析时，所述质谱分析的条件如下：电子电离源，电子能量70eV；离子源温度250℃；传输线温度220℃；选择离子流扫描模式；所述选择离子流扫描参数：扫描时间为0～14.99min，扫描质量碎片为86amu，71amu，41amu和43amu；扫描时间为15.00～30.71min，扫描质量碎片为60amu、87amu、45amu和43amu。 6.根据权利要求1～5任意一项所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述增菌培养的温度为35～37℃；所述增菌培养过程伴随振荡培养；所述振荡培养的转速为200～250r/min。 7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述增菌培养的时间为20～22h。 8.根据权利要求1～5任意一项所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述待测食品样本包括肉类、蛋奶类、谷稻类或蔬菜类。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述待测食品样本包括由金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肠炎沙门氏菌中一种或多种微生物污染的食品。 10.根据权利要求1～5任意一项所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述接种时接种量为5％～10％。
所属类别：	发明专利