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原文传递一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法

专利名称：	一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法
摘要：	本发明提供一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法，涉及Hg2+检测技术领域。所述Hg2+检测方法主要包括：核酸适配体的设计、标准液的制备、实验组设立、检测、建立标准曲线、根据标准曲线对实验组进行定量分析等步骤。本发明克服了现有技术的不足，采用能形成茎环结构的核酸适配体作为核酸探针，加强对纳米金的保护能力，且本方法的检测线性范围宽、抗干扰能力强、精密度高，检测Hg2+离子浓度跨度达到3个数量级，适宜推广使用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东石油化工学院
发明人：	王丽;刘传;迟恩忠;张强;曾浩楠;姚娜;胡楚玲
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910523669.1
公开号：	CN110412024A
代理机构：	合肥汇融专利代理有限公司
代理人：	邝溯琼
分类号：	G01N21/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	525000 广东省茂名市官渡二路139号大院
主权项：	1.一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法，其特征在于，所述Hg2+检测方法包括以下步骤： (1)核酸适配体的设计：设计由28个碱基组成的单链DNA为核酸适配体，其中单链DNA含5′末端和3′末端相靠近的茎环发夹结构； (2)标准液的制备：将纳米金溶液和10μmol/L的核酸适配体混匀，于室温下进行孵育，得标准液备用； (3)实验组设立：向上述标准液中加入待检测含Hg2+样本溶液，混匀后加入1mol/L的氯化钠溶液，再补充缓冲液至核酸适配体浓度为0.32μmol/L，混匀后形成实验组备用； (4)检测：将上述实验组在室温条件下孵育一段时间，并观察体系的颜色变化，进行定性检测，测定520nm、620nm处的吸光度； (5)建立标准曲线，确定最低检出限和线性范围； (6)根据标准曲线对实验组进行定量分析。 2.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中单链DNA从5′端至3′的序列为GAACACCCCTTCTTCTTCCTTGTTGTTC。 3.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法，其特征在于：所述纳米金选用的粒径为15nm，纳米金溶液浓度为0.1％。 4.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中纳米金溶液与核酸适配体混合的体积比为25∶2，且室温孵育的时间为5min。 5.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法，其特征在于：所述步骤(3)中氯化钠的加入量为纳米金溶液加入量的3/10，待检测含Hg2+样本溶液的加入量为纳米金溶液体积的1/6，添加缓冲液后氯化钠浓度为0.12mol/L，且所选用缓冲体系为pH7.4的磷酸缓冲体系。 6.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法，其特征在于：所述步骤(4)中室温孵育的时间为15min，且体系颜色变化范围为从红色至蓝色的变化，定性检测的方式为将孵育后溶液于1cm比色皿中常温检测。 7.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体和纳米金的Hg2+检测方法，其特征在于：所述步骤(5)中标准曲线中横坐标为Hg2+离子浓度，纵坐标为A620与A520的比值。
所属类别：	发明专利