详情

原文传递一种基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法及应用

专利名称：	一种基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法及应用
摘要：	本发明提供一种基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法及应用。本发明以液相色谱‑串联质谱检测婴幼儿乳粉中胆碱和左旋肉碱时，采用目标分析物所对应的同位素内标胆碱‑d4和左旋肉碱‑d3为研究对象进行基质效应评价(MEIS)。本发明针对内源性物质无空白样品的问题，通过采用同位素内标进行基质效应评价，不仅摒弃了传统提取后添加法需扣除基质本身信号值的分析步骤，弥补了因无空白基质无法采用柱后输入法进行基质效应评价的缺点，更重要的是可以对所分析的所有样本进行基质效应评价，具有良好的实际应用之价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东省食品药品检验研究院
发明人：	郑红;刘艳明;于文江;尹丽丽;程志;周传静;李珊;薛霞
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201910702551.5
公开号：	CN110398554A
代理机构：	济南圣达知识产权代理有限公司
代理人：	郑平
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	250101 山东省济南市高新区新泺大街2749号
主权项：	1.一种基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，所述方法包括使用液相色谱串联质谱检测内源性化合物时，使用目标分析物所对应的同位素内标进行基质效应评价。 2.如权利要求1所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，方法具体包括：纯溶剂同位素内标溶液的配制：将同位素内标添加到纯溶剂中；基质匹配同位素内标溶液的配制：将同位素内标添加到经前处理后的样品基质中；测定：将上述两种溶液注入液相色谱串联质谱系统进行分析，得到两种溶液的峰面积；采用计算公式MEIS＝(A-B)/A×100进行计算，其中MEIS为同位素内标基质效应，A为纯溶剂中同位素内标的响应峰面积，B为基质匹配同位素内标溶液的响应峰面积。 3.如权利要求2所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，所述方法还包括，MEIS的判定：具体的，-20％≤MEIS≤20％，基质效应可忽略；MEIS＞20％，基质效应抑制严重；MEIS＜-20％，基质效应增强严重。 4.一种基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，所述方法包括使用液相色谱串联质谱检测乳粉内源性化合物胆碱和左旋肉碱时，使用同位素内标胆碱-d4和左旋肉碱-d3进行基质效应评价，具体的，方法包括：纯溶剂同位素内标溶液的配制：将同位素内标添加到纯溶剂中；基质匹配同位素内标溶液的配制：将同位素内标添加到经前处理后的样品基质中；测定：将上述两种溶液注入液相色谱串联质谱系统进行分析，得到两种溶液的峰面积；计算公式：MEIS＝(A-B)/A×100，其中MEIS为同位素内标基质效应，A为纯溶剂中同位素内标的响应峰面积，B为基质匹配同位素内标溶液的响应峰面积； MEIS判定：-20％≤MEIS≤20％，基质效应可忽略；MEIS＞20％，基质效应抑制严重；MEIS＜-20％，基质效应增强严重。 5.如权利要求4所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，所述乳粉包括但不限于牛奶粉、全脂奶粉、脱脂奶粉和和羊奶粉。 6.如权利要求4所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，质谱参数条件：正离子电喷雾模式下的SRM模式，离子传输管温度：350℃，鞘气：45arb，辅助气：10arb，毛细管电压5500℃，CID气体：1.5mtorr。 7.如权利要求4所述的基于同位素内标评价内源性化合物基质效应的方法，其特征在于，色谱参数：色谱柱为Click XIon或HILIC色谱柱(优选为Click XIon色谱柱)；柱温35℃；进样体积：0.35μL；流速0.35mL/min；洗脱方式：梯度洗脱；所述梯度洗脱程序如下： 0～1.0min，流动相A95％→95％，流动相B5％→5％； 1.0～2.0min，流动相A95％→85％，流动相B5％→15％； 2.0～6.0min，流动相A85％→40％，流动相B15％→60％； 6.0～8.0min，流动相A40％→40％，流动相B60％→60％； 8.0～9.5min，流动相A40％→95％，流动相B60％→5％； 9.5～12min，流动相A95％→95％，流动相B5％→5％；其中，以乙腈作为流动相A，以0.1％甲酸水溶液(含10mM醋酸铵)作为流动相B。 8.权利要求1-7任一项所述方法在评价内源性化合物基质效应中的应用；优选的，所述应用包括但不限于评价样品前处理方式或色谱柱对内源性化合物基质效应影响。 9.如权利要求8所述应用，其特征在于，所述样品为乳粉，所述乳粉优选包括但不限于牛奶粉、全脂奶粉、脱脂奶粉和羊奶粉；优选的，所述样品前处理方式包括但不限于对样品进行水浴水解或微波辅助水解。 10.如权利要求8所述应用，其特征在于，所述色谱柱包括但不限于Click XIon柱，T3柱和Hilic柱；优选为Click XIon柱。
所属类别：	发明专利