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原文传递一种原位定量检测细菌信号分子的增强拉曼光谱方法

专利名称：	一种原位定量检测细菌信号分子的增强拉曼光谱方法
摘要：	一种原位定量检测细菌信号分子的增强拉曼光谱方法。其采用壳隔离介电超表面材料作为增强剂，结合拉曼散射，通过细菌信号分子的特定拉曼散射峰的强度，对细菌生物膜形成过程中的信号分子进行原位定量检测检测，所述壳隔离介电超表面材料的壳结构为多孔薄膜，所述介电超表面为半导体亚纳米结构阵列。所述方法可实现细菌生物膜中信号分子的高准确、高灵敏和高重现原位定量检测，真实反映生物膜中细菌的群体感应特征。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	重庆;50
申请人：	重庆工商大学
发明人：	韦晓兰;杜芸倩;翁怡薇;王于月
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910859994.5
公开号：	CN110441287A
代理机构：	重庆华科专利事务所
代理人：	康海燕
分类号：	G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	400067重庆市南岸区学府大道19号
主权项：	1.一种原位定量检测细菌信号分子的增强拉曼光谱方法，其特征在于，采用壳隔离介电超表面材料作为增强剂，结合拉曼散射，通过细菌信号分子的特定拉曼散射峰的强度，对细菌生物膜形成过程中的信号分子进行原位定量检测检测，所述壳隔离介电超表面材料的壳结构为多孔薄膜，所述介电超表面为半导体亚纳米结构阵列。 2.根据权利要求1所述增强拉曼光谱方法，其特征在于，所述壳隔离介电超表面材料是以纳米尺寸的卤化钙钛矿晶体ABX3为核、以无机凝胶为壳的核壳钙钛矿ABX3@MmOn，所述卤化钙钛矿晶体ABX3中，亚纳米尺寸的半导体单元重复排列形成亚纳米半导体阵列。 3.根据权利要求2所述增强拉曼光谱方法，其特征在于，所述多孔薄膜是厚度为1～100nm的二氧化硅凝胶、二氧化钛凝胶或三氧化二铝凝胶。 4.根据权利要求2所述增强拉曼光谱方法，其特征在于，所述卤化钙钛矿ABX3晶体由AX和BX2分子自组装自发形成，其中，A为Rb+、Cs+或有机铵离子，B为Ge2+、Sn2+或Pb2+，X为Cl－、Br－或I－。 5.根据权利要求2所述增强拉曼光谱方法，其特征在于，所述卤化钙钛矿ABX3晶体为纳米粒子、纳米片或纳米条。 6.根据权利要求1-5任一项所述增强拉曼光谱方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)信号分子/细菌-增强剂混合液的制备：将增强剂与目标待测液按1:100～1000的比例混合得到目标待测液-增强剂混合液，然后配制相同背景和相同增强剂浓度的细菌信号分子-增强剂混合液； (2)原位拉曼光谱检测：分别采用拉曼光谱仪测定目标待测液-增强剂混合液和细菌信号分子-增强剂混合液的拉曼光谱，获取细菌信号分子的特定拉曼峰的强度，然后根据拉曼峰强度与分子浓度正比的特性，计算目标待测液中细菌信号分子的浓度。 7.根据权利要求1-5任一项所述增强拉曼光谱方法，其特征在于，具体包括以下步骤： (1)信号分子/细菌-增强剂混合液的制备：分别配制具有相同浓度增强剂、相同背景的信号分子-增强剂溶液SA和细菌-增强剂悬浮液SB； (2)细菌生物膜的培养：分别将相同体积的SA和SB滴加在同一培养基平板表面的两个区域，在相同条件下进行培养； (3)原位拉曼光谱检测：在步骤(2)的培养过程中，选取多个时间点，采用拉曼光谱仪分别测定培养基平板表面SA和SB区域的拉曼光谱。 (4)细菌信号分子的定量分析：根据同一时间点所测的SA和SB拉曼光谱，获取细菌信号分子的特定拉曼峰的强度IA和IB，根据拉曼峰强度与分子浓度成正比，按CAIB/IA(CA为已知的SA中信号分子浓度)测算出SB区域中信号分子的浓度CB；然后根据各时间点的CB，绘制细菌生物膜形成过程中信号分子浓度随时间的变化曲线。
所属类别：	发明专利