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原文传递一种非疾病诊断目的的人体免疫功能的检测方法及应用

专利名称：	一种非疾病诊断目的的人体免疫功能的检测方法及应用
摘要：	本发明提供了一种非疾病诊断目的的人体免疫功能的检测方法及应用，属于免疫功能检测技术领域，所述方法基于淋巴细胞亚群分析，进行免疫功能检测和评价，通过检测淋巴细胞亚群分布变化精确评估人体免疫功能的变化；另外，本发明中待检测样本用量少，单个样品检测时间短。本发明还提供了上述方案所述检测方法得到的检测结果在提供免疫功能信息中的应用，该方案能够针对各项细胞亚群进行评价或组合评价，并根据检测结果清楚判断机体状态，预测影响因素，进而获得免疫功能信息。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京市理化分析测试中心
发明人：	刘晶;武会娟;张志毅;李俊博;李欢欢;洪甜;涂晨晓;宋扬
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910292727.4
公开号：	CN110488009A
分类号：	G01N33/564(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100089 北京市海淀区丰贤中路7号孵化楼B栋4层
主权项：	1.一种非疾病诊断目的的人体免疫功能的检测方法，包括以下步骤： 1)将人外周血与不同抗体组分别混合，进行孵育；所述抗体组包括第一抗体组、第二抗体组、第三抗体组、CD3-FITC、CD28-PE、CD8a-PE-cy7和CD20-APC；所述第一抗体组包括CD3-FITC、FOXP3-PE和CD4-PE-cy7；所述第二抗体组包括CD3-FITC、CD28-PE、CD8a-PE-cy7和CD20-APC；所述第三抗体组包括CD3-FITC、CD16-PE和CD56-APC； 2)加入红细胞裂解液，进行孵育，离心，弃上清； 3)采用细胞染色缓冲液对沉淀进行第一重悬，离心，弃上清，采用细胞染色缓冲液对沉淀进行第二重悬，得到待检样品； 4)采用流式细胞仪检测步骤3)所述待检样品中FSC/SSC、CD3+、CD3-CD20+、CD3-CD16+CD56+、CD3+CD4+CD3+CD8+、CD3+CD8+CD28+、CD3+CD8+CD28-和CD3+CD4+FOXP3+的数量百分比，并计算CD3+CD4+/CD3+CD8+的数值，得到分析数据；所述流式细胞仪的检测参数参见下表： 5)参照评估标准比对分析数据，得出人体免疫功能的检测结果；步骤5)中所述评估标准参照下表： 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤1)中所述混合的容器为EDTA抗凝管。 3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，步骤1)中所述CD20-APC替换为CD19-APC。 4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述孵育的过程避光进行；所述孵育的温度为16～26℃；所述孵育的时间为10～20min。 5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述离心的离心力为300～400g；所述离心的时间为3～8min。 6.权利要求1～5任意一项所述检测方法得到的检测结果在提供免疫功能信息中的应用；所述应用的步骤为：参照提示标准比对检测结果，得出机体状态分析结果；所述提示标准与机体免疫状态对照表如下：提示机体处于免疫抑制状态的数量≥2时，判断机体处于免疫抑制状态；提示机体处于免疫过度活跃状态的数量≥2时，判断机体处于免疫过度活跃状态；提示机体处于免疫激活状态的数量≥2或者提示机体处于免疫激活状态状态的检测指标高于参考值高线或低于参考值低线，且超过参考值范围≥10％时，判断机体处于免疫激活状态。 7.一种利用权利要求6所述机体状态分析结果制定的饮食组方，其特征在于：当判断机体处于免疫抑制状态时，以每日摄入量计，所述饮食组方包括以下成分：糖类18～50岁女性：247.5～390g；18～50岁男性：309～487.5g；51～65岁女性：240～382g；50～65岁男性：289～455g；大于65岁的女性：234～317g；大于65岁的男性：282～382g、氨基酸18～50岁女性：45～210g；18～50岁男性：56～262.5g；51～65岁女性：44～206g；50～65岁男性：52.5～245g；大于65岁的女性：42.5～171g；大于65岁的男性：51～206g、维生素D 10～50μg、维生素C 100～2000mg、维生素E 14～800mg和硒50～400μg；所述饮食组方还包括维生素A，以黄醇当量计，女性：每日摄入量为700～3000μg RAE，男性：每日摄入量为800～3000μg RAE；所述饮食组方还包括维生素B6，18～50岁：每日摄入量为1.0～1.4mg，大于50岁：每日摄入量为1.3～1.7mg；所述饮食组方还包括叶酸，以叶酸当量计，400～1000μg DFE；所述饮食组方还包括铁，18～50岁女性：每日摄入量为20～50mg，男性及大于50岁的女性：每日摄入量为15～50mg；所述饮食组方还包括锌，女性：每日摄入量为11.5～37mg，男性：每日摄入量为15.5～45mg；当判断机体处于免疫过度活跃状态时，以每日摄入量计，所述饮食组方包括以下成分：饱和脂肪酸18～50岁女性：＜20g；18～50岁男性：＜25g；51～65岁女性：＜19g；50～65岁男性：＜23g：大于65岁的女性：＜19g；大于65岁的男性：＜23g、长链多不饱和脂肪酸8～50岁女性：6～29g；18～50岁男性：7.5～37g；51～65岁女性：6～29g；50～65岁男性：7～34g；大于65岁的女性：6～24g；大于65岁的男性：7～29g、氨基酸18～50岁女性：45～210g；18～50岁男性：56～262.5g；51～65岁女性：44～206g；50～65岁男性：52.5～245g；大于65岁的女性：42.5～171g；大于65岁的男性：51～206g和纤维素25～35g；所述饮食组方还包括维生素A，以黄醇当量计，女性：每日摄入量为700～3000μg RAE，男性：每日摄入量为800～3000μg RAE。 8.根据权利要求7所述的饮食组方，其特征在于，按照性别和年龄分类，所述饮食组方中每日所需能量为：18～50岁女性：1800～2400kcal；18～50岁男性：2250～3000kcal；51～65岁女性：1750～2350kcal；50～65岁男性：2100～2800kcal；大于65岁的女性：1700～1950kcal；大于65岁的男性：2050～2350kcal。 9.权利要求1～5任意一项所述检测方法得到的检测结果在早期临床干预中的应用，其特征在于，参照提示标准比对检测结果，得出影响因素分析结果，为早期临床干预提供依据；所述提示标准与影响因素对照表如下：
所属类别：	发明专利