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原文传递一种组胺电致化学发光法检测鱼新鲜度的方法

专利名称：	一种组胺电致化学发光法检测鱼新鲜度的方法
摘要：	本发明涉及一种组胺电致化学发光法检测鱼新鲜度的方法。步骤包括：将Ru(bpy)32+@Tb‑GMP ICPn纳米复合材料修饰的电极作为工作电极，Ag/AgCl电极作为参比电极，铂丝电极作为辅助电极，构成三电极体系，确定HA的浓度范围，浓度越高，鱼产品越不新鲜。本发明合成的纳米复合材料低毒无污染、成本低、简单易得，用于检测HA，具有灵敏度高，抗干扰能力强，方法简便易操作以及可实现快速检测等优点，可以准确快速的实现鱼肉中组胺量的检测，并以此作为鱼鲜度的评价指标。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	烟台大学
发明人：	田春媛;庄旭明;栾锋;马兴;高雪晴
专利状态：	有效
申请日期：	2019-10-21T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910997821.X
公开号：	CN110487780A
代理机构：	北京中济纬天专利代理有限公司
代理人：	马国冉
分类号：	G01N21/76(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	264005 山东省烟台市莱山区清泉路30号
主权项：	1.一种组胺电致化学发光法检测鱼新鲜度的方法，其特征在于，步骤包括：（1）无定型聚合纳米材料包裹的吡啶钌纳米复合材料Ru(bpy)32+@Tb-GMP ICPn的制备：移液枪移取0.5mL-1ml的10mM Tb3+溶液于离心管中，依次加入0.5 mL-1ml 的0.1 MTris-HCl（pH 7.40）溶液、10mM-20mM的鸟苷单磷酸二钠盐GMP、吡啶钌粉末，然后水洗离心2-5次，得到所述Ru(bpy)32+@Tb-GMP ICPn纳米复合材料；（2）将步骤（1）得到的所述Ru(bpy)32+@Tb-GMP ICPn纳米复合材料，滴涂到打磨好的玻碳电极GCE上，在空气中自然晾干，得到纳米复合材料修饰的电极；（3）将鱼肉经破碎、调pH至7.4，Tris-HCl缓冲液定容后，以8000转/min离心5 min，滤膜过滤后获得上清液；（4）将步骤（2）得到的所述纳米复合材料修饰的电极作为工作电极，Ag/AgCl电极作为参比电极，铂丝电极作为辅助电极，构成三电极体系，将所述三电极体系与电致化学发光工作站相连，以含有不同浓度的组胺HA溶液为共反应剂，构成用于组胺检测的电致化学发光传感器；在光电倍增管PMT设置为600的时候测定其电致化学发光强度，并将发光强度值代入线性关系式，确定HA的浓度范围；（5）根据HA的浓度大小判断鱼的新鲜度：浓度越高，水产品越不新鲜。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述Tb3+和 GMP 的摩尔质量比为（1-2）：1000。 3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述加入吡啶钌的物质的量浓度为0.0286μM-0.286mM。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的鱼为海水鱼或淡水鱼。 5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的线性关系式的获得为：分别取8 mL的0-200μM不同浓度的组胺Tris -HCl缓冲溶液分别加入到发光池中，设置光电倍增管为600，扫速为0.1V/s，电位范围为0-+1.15V，测得电致化学发光强度，并将得到的实验数据整理作图获得线性方程，线性关系为 I = 1067.6 lgc + 7478.4；I为的电致化学发光强度；线性相关系数R2=0.9804。 6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述0-200μM不同浓度HA水溶液浓度分别为0, 0.1, 0.5, 1, 5, 10, 50, 100, 150, 200 μM。 7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Tris-HCl缓冲液浓度为0.1M，pH=7.4。
所属类别：	发明专利