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原文传递基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器及其制作方法

专利名称：	基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器及其制作方法
摘要：	本发明公开了一种基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器及其制作方法，该电化学生物传感器用于癌症诊断，包括有玻碳电极，所述玻碳电极表面有一层g‑CNQDs薄膜，g‑CNQDs薄膜上设有金纳米颗粒‑肺癌病变的发卡DNA，发卡DNA末端连接在金纳米颗粒上，在检测过程中发卡DNA与肺癌ct DNA互补配对。本发明与现有的技术相比具有以下优点：(1)本发明是针对癌症无创病理诊断的途径和技术，与穿刺活检相比，该传感器不会对病人产生次生危害；(2)本传感器构成简单，与目前的主流检测方法相比，具有检测方便、快速和成本低等优势；(3)由于可自行设计DNA探针，因此可以同时检测多种癌症，具有很大的临床应用前景。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	武汉理工大学
发明人：	张甜;杨锡东;皮埃尔
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910740926.7
公开号：	CN110487869A
代理机构：	湖北武汉永嘉专利代理有限公司
代理人：	崔友明
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	430070 湖北省武汉市洪山区珞狮路122号
主权项：	1.基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器，包括有玻碳电极，所述玻碳电极表面有一层g-CNQDs(氮化碳量子点)薄膜，g-CNQDs薄膜上设有金纳米颗粒-肺癌病变的发卡DNA，发卡DNA末端连接在金纳米颗粒上，在检测过程中发卡DNA与肺癌ct DNA互补配对。 2.根据权利要求1所述的基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器，其特征在于所述的发卡DNA是根据肺癌细胞突变的DNA序列所设计。 3.根据权利要求1所述的基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器，其特征在于所述氮化碳量子点的平均粒径为5nm。 4.权利要求1所述的基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器的制作方法，包括有以下步骤： (1)将玻碳电极用抛光粉抛光处理，然后清洗； (2)分别将g-CNQDs、金纳米颗粒-肺癌病变的发卡DNA溶液修饰至玻碳电极表面，分别在室温和37℃下晾干； (3)上述电极经PBS溶液冲洗，即得用于检测肺癌ct DNA的基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器。 5.根据权利要求4所述的基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器的制作方法，其特征在于所述的g-CNQDs的制备方法是：称取摩尔比为6：1的尿素和柠檬酸三钠，研磨成粉，于160～190℃反应1h，冷却后，将产物洗涤，然后透析，即得g-CNQDs。 6.根据权利要求4所述的基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器的制作方法，其特征在于所述的金纳米颗粒-肺癌病变的发卡DNA溶液的制备方法包括有以下步骤： 1)将100mL浓度为1mmol/L的HAuCl4·4H2O水溶液加热至沸腾状态，在搅拌的作用下加入20mL柠檬酸三钠继续煮沸混合物，混合物颜色由无色变成酒红色，停止加热，冷藏备用； 2)取10μL 0.1mmol/L肺癌病变的发卡DNA，再加入0.15μL 10mmol/L三(2-羧乙基)膦溶液，其溶剂为0.01mol/L含0.1mol/L NaCl的PBS溶液，反应1h，然后，加入100μL步骤1)所得AuNPs溶液于上述混合物中，反应0.5h。 7.权利要求1所述的基于氮化碳量子点的电化学发光生物传感器的检测方法，包括有以下步骤： 1)在玻碳电极上分别滴加1×10-12～1×10-15mol/L的肺癌病变ct DNA，在37℃培育2h； 2)使用电化学工作站的三电极体系进行测试，使用传统的三电极体系，以Ag/AgCl为参比电极，以铂片电极为对电极，以上述步骤1)处理后的玻碳电极为工作电极，将电化学工作站和超微弱发光探测仪连接在一起，使用循环伏安法，扫描范围为-2.0～0V，扫描速率为0.1V/S； 3)在10mL、pH 7.4的含浓度为0.1mol/L K2S2O8的磷酸盐缓冲溶液中，通过电化学发光系统，检测对不同浓度的肺癌目标DNA产生的电化学发光信号强度，绘制工作曲线。
所属类别：	发明专利