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原文传递效应性调节性T细胞的检测方法、效应性调节性T细胞的分析装置、效应性调节性T细胞的分析系统和程序

专利名称：	效应性调节性T细胞的检测方法、效应性调节性T细胞的分析装置、效应性调节性T细胞的分析系统和程序
摘要：	一种使用流式细胞术法的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，对包含CD4阳性T细胞群的对照试样进行测定，取得在基于对照试样的测定结果将CD4阳性T细胞群中所含的FOXP3阳性T细胞群以规定的比分割时成为分割基准的FOXP3量作为生物试样的测定中使用的基准值，对包含CD4阳性T细胞群的生物试样进行测定，基于生物试样的测定结果，从FOXP3量比基准值多的细胞群中检测效应性调节性T细胞。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	日本;JP
申请人：	国立研究开发法人国立癌症研究中心
发明人：	西川博嘉;小林民代
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201880024583.8
公开号：	CN110494750A
代理机构：	中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
代理人：	何杨
分类号：	G01N33/49(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	日本东京
主权项：	1.一种效应性调节性T细胞的检测方法，其为使用流式细胞术法的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，对包含CD4阳性T细胞群的对照试样进行测定，取得在基于所述对照试样的测定结果将所述CD4阳性T细胞群中所含的FOXP3阳性T细胞群以规定的比分割时成为分割基准的FOXP3量作为生物试样的测定中使用的基准值，对包含CD4阳性T细胞群的生物试样进行测定，基于所述生物试样的测定结果，从FOXP3量比所述基准值多的细胞群中检测效应性调节性T细胞。 2.根据权利要求1所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，在一所述生物试样的每一测定中进行所述对照试样的测定而取得所述基准值，将取得的所述基准值用于所述一生物试样的测定中的所述效应性调节性T细胞的检测。 3.根据权利要求1所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，在多个所述生物试样的每一测定中进行所述对照试样的测定而取得所述基准值，将取得的所述基准值用于所述多个生物试样的各测定中的所述效应性调节性T细胞的检测。 4.根据权利要求2或3所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，对基于所述对照试样的所述测定结果得到的FOXP3阳性T细胞群的整体应用所述比，取得所述基准值。 5.根据权利要求4所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，按照以下方式来设定所述比：基于所述对照试样的所述测定结果得到的所述FOXP3阳性T细胞群的总细胞数中，FOXP3的量多者的细胞的数量的比例为57％以上且72％以下。 6.根据权利要求4所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，按照以下方式来设定所述比：基于所述对照试样的所述测定结果得到的所述FOXP3阳性T细胞群中，FOXP3的量多者的细胞的数量相对于FOXP3的量少者的细胞的数量的比率为1.35以上且2.48以下。 7.根据权利要求4至6中任一项所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，在将基于所述对照试样的所述测定结果得到的所述CD4阳性T细胞群展开为以FOXP3的量为轴的柱状图时，将具有所述柱状图中的FOXP3阴性侧的峰波形的结束点的FOXP3量以上的FOXP3量的细胞群确定为所述FOXP3阳性T细胞群。 8.根据权利要求7所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，在对所述柱状图中的所述FOXP3阴性侧的峰波形应用近似曲线时，将所述近似曲线与所述轴在FOXP3量的高值侧交叉的点设为所述结束点。 9.根据权利要求2或3所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，对基于所述对照试样的所述测定结果得到的FOXP3阳性T细胞群中的CD45RA阴性群应用所述比，取得所述基准值。 10.根据权利要求9所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，按照以下方式设定所述比：基于所述对照试样的所述测定结果得到的所述FOXP3阳性T细胞群的总细胞数中，FOXP3的量多者的细胞的数量的比例为62％以上且72％以下。 11.根据权利要求9所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，按照以下方式来设定所述比：基于所述对照试样的所述测定结果得到的所述FOXP3阳性T细胞群中，FOXP3的量多者的细胞的数量相对于FOXP3的量少者的细胞的数量的比率为1.62以上且2.47以下。 12.根据权利要求9至11中任一项所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，在将基于所述对照试样的所述测定结果得到的所述CD45RA阴性细胞群展开为以FOXP3的量为轴的柱状图时，将具有所述柱状图中的FOXP3阴性侧的峰波形的结束点的FOXP3量以上的FOXP3量的细胞群确定为所述FOXP3阳性T细胞群。 13.根据权利要求12所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，在对所述柱状图中的所述FOXP3阴性侧的峰波形应用近似曲线时，将所述近似曲线与所述轴在FOXP3量的高值侧交叉的点设为所述结束点。 14.根据权利要求1至13中任一项所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，基于所述生物试样的所述测定结果，检测CD45RA阴性且FOXP3量比所述基准值多的细胞群作为效应性调节性T细胞。 15.根据权利要求14所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，基于所述生物试样的所述测定结果提取单一的活淋巴细胞群，从已提取的所述淋巴细胞群中提取CD3阳性细胞群，从已提取的所述CD3阳性细胞群中提取CD4阳性细胞群，检测已提取的所述CD4阳性细胞群中的CD45RA阴性且FOXP3量比所述基准值多的细胞群作为效应性调节性T细胞。 16.根据权利要求1至15中任一项所述的效应性调节性T细胞的检测方法，其中，所述对照试样为健康人的外周血或包含由健康人的外周血纯化而得的外周血单核细胞的试样。 17.一种效应性调节性T细胞的分析装置，其为使用流式细胞术法的效应性调节性T细胞的分析装置，具备：测定部，用于测定包含CD4阳性T细胞群的生物试样；和控制部，取得FOXP3量作为生物试样的测定中使用的基准值，基于所述测定部对所述包含CD4阳性T细胞群的生物试样进行测定而得的测定结果从FOXP3量比所述基准值多的细胞群中检测效应性调节性T细胞，其中，所述FOXP3量在基于所述测定部对包含CD4阳性T细胞群的对照试样进行测定而得的测定结果将CD4阳性T细胞群中所含的FOXP3阳性T细胞群以规定的比分割时成为分割基准。 18.根据权利要求17所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述测定部在一所述生物试样的每一测定中进行所述对照试样的测定，所述控制部将所述基准值用于所述一生物试样的分析中的所述效应性调节性T细胞的检测。 19.根据权利要求17所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述测定部在多个所述生物试样的每一测定中进行所述对照试样的测定，所述控制部将所述基准值用于所述多个生物试样的各分析中的所述效应性调节性T细胞的检测。 20.根据权利要求18或19所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述控制部对基于所述对照试样的所述测定结果得到的FOXP3阳性T细胞群的整体应用所述比，取得所述基准值。 21.根据权利要求20所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述控制部在将基于所述对照试样的所述测定结果得到的所述CD4阳性T细胞群展开为以FOXP3的量为轴的柱状图时、将具有所述柱状图中的FOXP3阴性侧的峰波形的结束点的FOXP3量以上的FOXP3量的细胞群确定为所述FOXP3阳性T细胞群。 22.根据权利要求21所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述控制部在对所述柱状图中的所述FOXP3阴性侧的峰波形应用近似曲线时、将所述近似曲线与所述轴在FOXP3量的高值侧交叉的点设为所述结束点。 23.根据权利要求18或19所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述控制部从基于所述对照试样的所述测定结果得到的FOXP3阳性T细胞群中提取CD45RA阴性群、对已提取的所述CD45RA阴性群应用所述比而取得所述基准值。 24.根据权利要求23所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述控制部在将基于所述对照试样的所述测定结果得到的所述CD45RA阴性细胞群展开为以FOXP3的量为轴的柱状图时、将具有所述柱状图中的FOXP3阴性侧的峰波形的结束点的FOXP3量以上的FOXP3量的细胞群确定为所述FOXP3阳性T细胞群。 25.根据权利要求24所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述控制部在对所述柱状图中的所述FOXP3阴性侧的峰波形应用近似曲线时、将所述近似曲线与所述轴在FOXP3量的高值侧交叉的点设为所述结束点。 26.根据权利要求17至25中任一项所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述控制部基于所述生物试样的所述测定结果检测CD45RA阴性且FOXP3量比所述基准值多的细胞群作为效应性调节性T细胞。 27.根据权利要求26所述的效应性调节性T细胞的分析装置，其中，所述控制部基于所述生物试样的所述测定结果提取单一的活淋巴细胞群，从已提取的所述淋巴细胞群中提取CD3阳性细胞群，从已提取的所述CD3阳性细胞群中提取CD4阳性细胞群，检测已提取的所述CD4阳性细胞群中的CD45RA阴性且FOXP3量比所述基准值多的细胞群作为效应性调节性T细胞。 28.一种效应性调节性T细胞的分析系统，其具备：权利要求17至27中任一项所述的分析装置、和对所述对照试样和所述生物试样的被检物质进行荧光标记的标记装置。 29.一种程序，其对分析效应性调节性T细胞的流式细胞仪的计算机赋予以下功能：取得在基于包含CD4阳性T细胞群的对照试样的测定结果将所述CD4阳性T细胞群中所含的FOXP3阳性T细胞群以规定的比分割时成为分割基准的FOXP3量，作为生物试样的测定中使用的基准值；和基于包含CD4阳性T细胞群的生物试样的测定结果，从FOXP3量比所述基准值多的细胞群中检测效应性调节性T细胞。
所属类别：	发明专利