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原文传递一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法

专利名称：	一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法
摘要：	本发明公开了一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，包括“黄芩加味消毒饮”提取物中野菊花的薄层色谱鉴别方法，野菊花的薄层色谱鉴别方法步骤包括：蒙花苷对照品溶液的配制；野菊花对照药材溶液和供试药材溶液制备；黄芩加味消毒饮供试样液的配制：取本品，加甲醇超声处理，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加甲醇使溶解；野菊花阴性对照溶液的制备；薄层层析检查。“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法还包括黄芩和山银花的薄层色谱鉴别方法。本发明中的检测方法为产品提供可靠、准确且操作简单的质量控制方法，确保产品的质量和疗效，保证患者用药安全。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	广西壮族自治区药用植物园
发明人：	蓝鸣生;陈路;吴无畏;刘钰;蒙桂宾;潘宇;吴芳芳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910816419.7
公开号：	CN110455976A
代理机构：	南宁东之智专利代理有限公司
代理人：	戴燕桃;汪治兴
分类号：	G01N30/90(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	530023广西壮族自治区南宁市兴宁区长堽路189号
主权项：	1.一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，包括“黄芩加味消毒饮”提取物中野菊花的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，所述野菊花的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤： A1.蒙花苷对照品溶液的配制：精密称取蒙花苷对照品，加甲醇制成浓度为0.5~1mg/ml的蒙花苷对照品溶液； A2.野菊花对照药材溶液的制备：取野菊花对照药材0.2~0.4g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加3~6.5ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液； A3.野菊花供试药材溶液的制备：取野菊花供试药材0.5~0.7g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4~6ml甲醇使溶解，作为供试药材溶液； A4.黄芩加味消毒饮供试样液的配制：取本品1~3g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5~15ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加1~3ml甲醇使溶解，作为黄芩加味消毒饮供试样液； A5.野菊花阴性对照溶液的制备：取野菊花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物1~3g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5~15ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加1~3ml甲醇使溶解，作为阴性对照溶液； A6.薄层层析检查：照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比15:15:6:4:1的乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，热风吹干，置365nm波长的紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 2.根据权利要求1所述的“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，其特征在于，步骤A1中所述蒙花苷对照品溶液浓度为0.5mg/ml；步骤A2中取野菊花对照药材0.3g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇使溶解；步骤A3中取野菊花供试药材0.6g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇使溶解；步骤A4中取本品2g，加15ml甲醇，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加10ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解；步骤A5中取野菊花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物2g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加10ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解。 3.根据权利要求1所述的“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，其特征在于，还包括黄芩的薄层色谱鉴别方法，所述黄芩的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤： B1.黄芩素、汉黄芩素混合对照品溶液的配制：分别精密称取黄芩素对照品和汉黄芩素对照品，加甲醇制成浓度为0.5~1mg/ml的黄芩素对照品和0.5~1mg/ml的汉黄芩素对照品混合溶液； B2.黄芩对照药材溶液的制备：取黄芩对照药材0.8~1.2g，加体积比为0.8~3.0:0.5~2.0的乙酸乙酯-甲醇混合溶液25~35ml，加热回流30~60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4~6ml甲醇使溶解作为对照药材溶液； B3.黄芩供试药材溶液的制备：取黄芩供试药材0.8~1.2g，加体积比为0.8~3.0:0.5~2.0的乙酸乙酯-甲醇的混合溶液25~35ml，加热回流30~60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4~6ml甲醇使溶解作为供试药材溶液； B4.黄芩加味消毒饮供试样液的配制：取本品2~4g，加水10~20ml溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2~5ml甲醇使溶解，作为供试样液； B5.黄芩阴性对照溶液的制备：取黄芩阴性“黄芩加味消毒饮”提取物2~4g，加10~20ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2~5ml甲醇使溶解，作为阴性对照溶液； B6.薄层层析检查：照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述混合对照品溶液、供试样液、阴性对照溶液各5μL，对照药材溶液、供试药材溶液各3μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比为10:3:1:2的甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，预饱和30~40min后展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的暗色斑点。 4.根据权利要求3所述的“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，其特征在于，所述步骤B1中对照品混合溶液为1mg/ml的黄芩素对照品和1mg/ml的汉黄芩素对照品混合溶液；步骤B2中取黄芩对照药材1g，加体积比为3:1的乙酸乙酯-甲醇的混合溶液30ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇使溶解；步骤B3中取黄芩供试药材1g，加体积比为3:1的乙酸乙酯-甲醇的混合溶液30ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇使溶解；步骤B4中取本品3g，加水15ml溶解，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，所述甲醇为4ml；步骤B5中取黄芩阴性“黄芩加味消毒饮”提取物3g，加水15ml溶解，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，所述甲醇为4ml。 5.根据权利要求1所述的“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，其特征在于，还包括山银花的薄层色谱鉴别方法，所述山银花的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤： C1.绿原酸对照品溶液的配制：精密称取绿原酸对照品，加甲醇制成浓度为0.5~1mg/ml的绿原酸对照品溶液； C2.山银花对照药材溶液的制备：取山银花对照药材0.1~0.3g，加甲醇2.5~7.5ml放置12~24h，滤过，取滤液作为对照药材溶液； C3.山银花供试药材溶液的制备：取山银花供试药材0.1~0.3g，加甲醇2.5~7.5ml放置12~24h，滤过，取滤液作为供试药材溶液； C4.黄芩加味消毒饮供试品样液的配制：取本品0.2~0.4g，加甲醇3~7ml放置12~24h，滤过，取滤液作为供试样液； C5.山银花阴性对照溶液的制备：取山银花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物0.2~0.4g，加甲醇3~7ml放置12~24h，滤过，取滤液作为阴性对照溶液； C6.薄层层析检查：照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10ul，分别点于同一硅胶H板上，以体积比为7:3:2.5的乙酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 6.根据权利要求5所述的“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，其特征在于，所述步骤C1中绿原酸对照品溶液浓度为1mg/ml；步骤C2中取山银花对照药材0.2g，加5ml甲醇放置12h；步骤C3中取山银花供试药材0.2g，加5ml甲醇放置12h；步骤C4中取本品0.3g，加5ml甲醇放置12h；步骤C5中取山银花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物0.3g，加5ml甲醇放置12h。 7.权利要求1~6任一项所述的“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法在检测由“黄芩加味消毒饮”提取物制成的颗粒剂、片剂、胶囊剂或液体制剂方面的应用。
所属类别：	发明专利