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原文传递一种金樱根指纹图谱的建立方法及金樱根的质量检测方法

专利名称：	一种金樱根指纹图谱的建立方法及金樱根的质量检测方法
摘要：	本发明公开了一种金樱根指纹图谱的建立方法及金樱根的质量检测方法。所述构建方法包括供试品溶液制备和经HPLC分析检测过程，即可得到所述金樱根指纹图谱。本发明通过大量实验摸索得到的构建方法，操作简单、供试品溶液制备耗时短、精密度好、重复性好、稳定性好、特征峰多、检测准确可靠，可用于金樱根药材的质量检测，为药品生产及检测提供了质量控制的高标准，以确保产品质量的稳定性，保证药品使用的安全有效。同时，刺梨苷、野蔷薇苷、千花木酸、蔷薇酸和委陵菜酸均为金樱根中的重要三萜类活性成分，对于金樱根的药效影响较大，可通过检测金樱根中这5种重要三萜类活性成分含量，控制其含量，从而达到控制金樱根药材的质量和药效。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖南;43
申请人：	株洲千金药业股份有限公司
发明人：	张鹏;李伏君;张英帅;白璐;伍实花;廖端芳;李春
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910394853.0
公开号：	CN110455934A
代理机构：	广州粤高专利商标代理有限公司
代理人：	冯振宁
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	412000湖南省株洲市天元区株洲大道801号
主权项：	1.一种金樱根指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤： S1.供试品溶液制备：取金樱根药粉，用体积分数为80～100％的甲醇浸泡并加热回流提取，过滤后即得供试品溶液； S2.HPLC分析的色谱条件：将S1所得供试品溶液经HPLC技术进行检测，检测过程中：色谱柱为ACE Excel 3 C18-PFP；柱温25～35℃；流速为1.0mL/min；检测波长为210nm；流动相A为甲醇，流动相B为乙腈，流动相C为0.1％磷酸水溶液，以流动相A-B-C进行梯度洗脱；在梯度洗脱过程中，流动相的比例持续性的变化，具体变化节点为：开始洗脱时，流动相的体积比为A:B:C＝5:15:80；第10min时，流动相体积比变为A:B:C＝5:23:72；在第55min时，流动相体积比为A:B:C＝5:35:60；在第62min时，流动相的体积比为A:B:C＝5:39:56；在第65min时，流动相体积比为A:B:C＝5:43:52；在第80min时，流动相体积比为A:B:C＝5:55:40；在第90min时，流动相体积比为A:B:C＝5:70:25，持续洗脱至结束；即可得到金樱根指纹图谱。 2.根据权利要求1所述金樱根指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤S1中所述金樱根药粉与80～100％的甲醇的质量体积比为1:40～60；步骤S1中所述加热回流的时间为0.5～1.5h。 3.根据权利要求1所述金樱根指纹图谱的建立方法，其特征在于，在步骤S2检测过程中，可以刺梨苷、野蔷薇苷、千花木酸、蔷薇酸、委陵菜酸、冬青苷B、24-deoxy-sericoside、2-氧代-坡模醇酸、坡模醇酸或熊果酸中的一种或多种的甲醇溶液为对照样品进行检测。 4.根据权利要求1所述金樱根指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤S2中所述柱温为30℃。 5.一种权利要求1至4任一所述建立方法所建立的金樱根指纹图谱，其特征在于，所述指纹图谱由10共有峰构成，所述10共有峰的相对保留时间范围及相对标准偏差如下： 1号峰：0.372～0.374，RSD为0.28％； 2号峰：0.387～0.390，RSD为0.27％； 3号峰：0.4330～0.4333，RSD为0.29％； 4号峰：0.669～0.671，RSD为0.02％； 5号峰：1.0，RSD为0； 6号峰：1.023～1.024，RSD为0.02％； 7号峰：1.062～1.063，RSD为0.02％； 8号峰：1.205～1.206，RSD为0.04％； 9号峰：1.281～1.282，RSD为0.05％； 10号峰：1.526～1.528，RSD为0.06％。 6.权利要求5所述金樱根指纹图谱在金樱根质量检测方面的应用。 7.一种金樱根的质量控制方法，其特征在于，包括如下步骤：将待检样品的HPLC检测图谱与标准指纹图谱进行对比，按中药指纹图谱相似度评价系统计算，18分钟以后的色谱图，供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度应不得低于0.90，则判断为合格样品；其中待检样品的HPLC图谱通过如下步骤获得： S1.供试品溶液制备：取金樱根药粉，用体积分数为80～100％的甲醇浸泡并加热回流提取，过滤后即得供试品溶液； S2.HPLC分析的色谱条件：将S1所得供试品溶液经HPLC技术进行检测，检测过程中：色谱柱为ACE Excel 3 C18-PFP；柱温25～35℃；流速为1.0mL/min；检测波长为210nm；流动相A为甲醇，流动相B为乙腈，流动相C为0.1％磷酸水溶液，以流动相A-B-C进行梯度洗脱；在梯度洗脱过程中，流动相的比例持续性的变化，具体变化节点为：开始洗脱时，流动相的体积比为A:B:C＝5:15:80；第10min时，流动相体积比变为A:B:C＝5:23:72；在第55min时，流动相体积比为A:B:C＝5:35:60；在第62min时，流动相的体积比为A:B:C＝5:39:56；在第65min时，流动相体积比为A:B:C＝5:43:52；在第80min时，流动相体积比为A:B:C＝5:55:40；在第90min时，流动相体积比为A:B:C＝5:70:25，持续洗脱至结束；即可得到金樱根指纹图谱。 8.根据权利要求7所述金樱根的质量控制方法，其特征在于，当供试品溶液中刺梨苷的含量为1.19～3.86mg/g、野蔷薇苷的含量为0.99～5.89mg/g、千花木酸的含量为0.72～2.02mg/g、蔷薇酸的含量为2.52～5.82mg/g和委陵菜酸的含量为1.36～2.85mg/g时，则为合格样品。 9.根据权利要求7所述金樱根的质量控制方法，其特征在于，以干燥品计，所述金樱根药粉中刺梨苷含量不得低于0.9mg/g、野蔷薇苷不得低于0.8mg/g、千花木酸不得低于0.5mg/g、蔷薇酸不得低于2mg/g、委陵菜酸不得低于1.1mg/g。 10.根据权利要求7所述金樱根的质量控制方法，其特征在于，以干燥品计，所述金樱根的水分不超过其质量的12％；总灰分不超过其质量的5％，50％乙醇浸出物不低于其质量的10％。
所属类别：	发明专利