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原文传递一种岗梅根药材HPLC-ELSD指纹图谱的建立方法

专利名称：	一种岗梅根药材HPLC-ELSD指纹图谱的建立方法
摘要：	本发明公开了一种岗梅根药HPLC‑ELSD指纹图谱的建立方法，所述建立方法包括以下步骤：(1)对照品的制备；(2)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)药材HPLC‑ELSD指纹图谱测定条件的建立及测定。上述岗梅根药材HPLC‑ELSD指纹图谱确认了17个共有峰，通过对照品，对其中10个主要色谱峰进行了明确的化学指认，其中9个为新化合物，以此建立了岗梅根药材HPLC‑ELSD特征指纹图谱。该指纹图谱的建立方法专属性强、操作简便，且具有良好的精密度、重现性和稳定性，可较全面地反映岗梅根药材化学组成的整体特征，可应用于岗梅根药材的真伪和品质鉴别，能有效地控制岗梅根药材的质量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	暨南大学
发明人：	叶文才;王英;范春林;黄晓君;张晓琦;王磊;文思
专利状态：	有效
申请日期：	2018-07-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201810856790.1
公开号：	CN110346463A
代理机构：	北京君有知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	夏娟娟
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510632 广东省广州市黄埔大道西601号
主权项：	1.一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下操作步骤： (1)对照品溶液的制备精密称取对照品岗梅皂苷A、岗梅皂苷B、岗梅皂苷C、岗梅皂苷D、岗梅皂苷E、岗梅皂苷F、岗梅皂苷G、岗梅皂苷H、岗梅皂苷I和岗梅皂苷J适量，分别用30～90％甲醇溶解各稀释成浓度为0.01～0.1mg/mL的溶液，滤过，即得；其中岗梅皂苷A、岗梅皂苷B、岗梅皂苷C、岗梅皂苷D、岗梅皂苷E、岗梅皂苷F、岗梅皂苷G、岗梅皂苷H、岗梅皂苷I和岗梅皂苷J为如下结构式的化合物： (2)供试品溶液的制备精密称取岗梅根药材细粉，置具塞锥形瓶，精密加入60～80％甲醇，浸泡，超声处理，放至室温，微孔滤膜滤过，然后用60～80％甲醇定容，摇匀，即得。 (3)采用HPLC-ELSD色谱法测定将步骤(2)的供试品溶液进样分析，色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；柱温：20～50℃；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为三氟乙酸体积百分比为0.01～0.5％的甲酸、乙酸或三氟乙酸-水溶液，采用梯度洗脱；检测器：蒸发光散射检测器。 2.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中所述的梯度洗脱，洗脱程序按如下体积浓度配置进行： 0分钟时，流动相A的体积百分比为20％、流动相B体积百分比为80％； 10分钟时，流动相A的体积百分比为26％、流动相B体积百分比为74％； 26分钟时，流动相A的体积百分比为26％、流动相B体积百分比为74％； 34分钟时，流动相A的体积百分比为31％、流动相B体积百分比为69％； 46分钟时，流动相A的体积百分比为33％、流动相B体积百分比为67％； 58分钟时，流动相A的体积百分比为38％、流动相B体积百分比为62％； 66分钟时，流动相A的体积百分比为38％、流动相B体积百分比为62％； 68分钟时，流动相A的体积百分比为45％、流动相B体积百分比为55％； 75分钟时，流动相A的体积百分比为50％、流动相B体积百分比为50％； 80分钟时，流动相A的体积百分比为50％、流动相B体积百分比为50％。 3.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中的色谱条件还包括：流速：0.8～1.2mL/min；进样量：10～30μL；蒸发光散射检测器的漂移管温度：90～110℃；气体流速：2.0～3.0L/min；增益值：1～4。 4.根据权利要求3所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中所述的流速为1mL/min，进样量为20μL，蒸发光散射检测器的漂移管温度为100℃，气体流速为2.5L/min，增益值为1。 5.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中所述的色谱柱为Waters XBridge C18，其规格为4.6mm×250mm,5.0μm。 6.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中所述柱温为35℃。 7.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中所述流动相B为0.1％三氟乙酸-水溶液或0.4％甲酸-水溶液或0.6％乙酸-水溶液。 8.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述指纹图谱中有17个共有峰，5号峰岗梅皂苷B为参照峰，图谱总长度为80分钟，其中选自以下一种或多种共有峰进行指认：4号峰为岗梅皂苷A、5号峰为岗梅皂苷B、6号峰为岗梅皂苷C、7号峰为岗梅皂苷J、8号峰为岗梅皂苷D、9号峰为岗梅皂苷E、10号峰为岗梅皂苷F、11号峰为岗梅皂苷G、12号峰为岗梅皂苷H和14号峰为岗梅皂苷I。 9.根据权利要求8所述的一种岗梅根药材特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，对以下共有峰进行指认：4号峰为岗梅皂苷A、5号峰为岗梅皂苷B、6号峰为岗梅皂苷C、7号峰为岗梅皂苷J、8号峰为岗梅皂苷D、9号峰为岗梅皂苷E、10号峰为岗梅皂苷F、11号峰为岗梅皂苷G、12号峰为岗梅皂苷H和14号峰为岗梅皂苷I。 10.权利要求1-9任意一项所述的岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，应用于岗梅根药材的真伪鉴别、基源鉴别和质量控制。
所属类别：	发明专利