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原文传递一种水产品中吡虫啉代谢物检测方法

专利名称：	一种水产品中吡虫啉代谢物检测方法
摘要：	本发明提供了一种水产品中吡虫啉代谢物检测方法，包括：采用含0.1%（v/v）乙酸的乙腈溶液对粉末状/肉泥状的待检测水产品萃取至少两次，合并上清液；合并后的上清液顺序经过无水硫酸镁、脂肪酸类吸附剂以及中性氧化铝处理，得到待检测样品；通过含0.1%（v/v）乙酸的甲醇‑水溶液（8:2，v/v）定容所述待检测样品；利用高效液相色谱‑串联三重四极杆质谱仪，检测定容后的待检测样品，得到待检测样品的色谱数据，基于吡虫啉代谢物的标准工作曲线和所述待检测样品的色谱数据，得到所述待检测水产品中吡虫啉代谢物的含量，实现了对水产品中吡虫啉代谢物检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	中国水产科学研究院长江水产研究所
发明人：	杨秋红;李司棋;艾晓辉;刘永涛;董靖;周顺;杨移斌;胥宁
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910512807.6
公开号：	CN110455937A
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	430223湖北省武汉市东湖新技术开发区武大科技园武大园一路8号
主权项：	1.水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，包括：采用含0.1%（v/v）乙酸的乙腈溶液对粉末状/肉泥状的待检测水产品萃取至少两次，合并上清液；合并后的所述上清液顺序经过无水硫酸镁、脂肪酸类吸附剂以及中性氧化铝处理，得到待检测样品；通过含0.1%（v/v）乙酸的甲醇-水溶液（8:2，v/v）定容所述待检测样品；利用高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪，检测定容后的所述待检测样品，得到待检测样品的色谱数据，基于吡虫啉代谢物的标准工作曲线和所述待检测样品的色谱数据，得到所述待检测水产品中吡虫啉代谢物的含量。 2.根据权利要求1所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪中，高效液相色谱的色谱条件包括：长度为100mm、内径为2.1mm以及填料粒径为1.8μm的C18色谱柱；柱温为35℃；洗脱流动相为含0.1%（v/v）甲酸的甲醇以及含0.1%（v/v）乙酸水溶液；进样量为10μL；流速为0.3mL/min。 3.根据权利要求2所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱采用80%含0.1%（v/v）甲酸的甲醇以及20%含0.1%（v/v）乙酸水溶液等度洗脱。 4.根据权利要求1至3任一所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，所述高效液相串联质谱仪中，串联质谱条件包括：离子源为加热大气压电喷雾源；扫描方式为反应监测模式；喷雾电压为3500V；蒸发气温度为200℃；鞘气和辅助气为高纯氮气，压力均为5bar；碰撞气为高纯氩气，压力为1.5mTorr；离子传输毛细管温度为350℃；一极质谱扫描（Q1）半峰宽为0.7Da，三极质谱扫描（Q3）半峰宽为0.7 Da。 5.根据权利要求1所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，所述采用含0.1%（v/v）乙酸的乙腈溶液对粉末状/肉泥状的待检测水产品萃取至少两次，包括：称取定量的粉末状/肉泥状的待检测水产品，向称取的所述待检测水产品中加入定量的已知浓度的吡虫啉-D4内标标准液，随后加入含0.1%（v/v）乙酸的乙腈溶液，涡旋混合1min，加入超纯水，涡旋混合，再加入无水硫酸镁，以及氯化钠，立即涡旋混合2min，并上下摇晃30s，以5000 r/min离心5 min，完成第一次萃取，取上清液，其中，待检测水产品的质量：含0.1%（v/v）乙酸的乙腈溶液的体积：水的体积：无水硫酸镁的质量：氯化钠质量=2：3：3：1：0.5，待检测水产品的质量为1.5~4g；采用含0.1%（v/v）乙酸的乙腈溶液对第一次萃取后的沉淀物重复萃取一次。 6.根据权利要求5所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，所述加入定量的已知浓度的吡虫啉-D4内标标准液，包括：加入50μL，100μg/L吡虫啉-D4内标标准液。 7.根据权利要求1所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，进一步包括：向中性氧化铝柱中顺序加入0.01g脂肪酸类吸附剂以及0.1g无水硫酸镁，得到目标处理柱；所述合并后的所述上清液顺序经过无水硫酸镁、脂肪酸类吸附剂以及中性氧化铝处理，包括：将合并后的所述上清液过所述目标处理柱，并收集流出液；通过氮吹得方式，吹干所述流出液。 8.根据权利要求1至3，5，6，7任一所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，所述吡虫啉代谢物，包括： 5-羟基吡虫啉、吡虫啉脲和6-氯烟酸。 9.根据权利要求8所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，进一步包括：制备标准储备液：分别称取吡虫啉-D4、5-羟基吡虫啉、吡虫啉脲和6-氯烟酸标准品5.00mg，置于10mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制质量浓度为500mg/L的标准储备液，于-18 ℃冰箱中避光保存；制备系列标准工作液：用含0.1%（v/v）乙酸的甲醇-水溶液（8:2，v/v）稀释含有吡虫啉-D4的5-羟基吡虫啉、吡虫啉脲和6-氯烟酸标准储备液，分别配制质量浓度为0.5~200 µg/L的系列标准工作液；利用所述高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪，检测所述质量浓度为0.5~200µg/L的系列标准工作液，得到标准品的色谱数据；利用所述标准品的色谱数据，拟合出所述标准工作曲线。 10.根据权利要求8所述的水产品中吡虫啉代谢物检测方法，其特征在于，所述高效液相串联质谱仪中，串联质谱条件进一步包括：所述5-羟基吡虫啉对应的质谱参数包括：离子化模式为正离子模式，母离子为260.0m/z，子离子为179/213m/z，碰撞能量为19/19eV；所述吡虫啉脲对应的质谱参数包括：离子化模式为正离子模式，母离子为272.0m/z，子离子为126/128m/z，碰撞能量为24/18eV；所述6-氯烟酸对应的质谱参数包括：离子化模式为正离子模式，母离子为156.1m/z，子离子为112/35.1m/z，碰撞能量为13/26eV。
所属类别：	发明专利