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原文传递一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法

专利名称：	一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法
摘要：	本发明涉及一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法，包括如下步骤：犬或猫血浆样品前处理：向犬、猫血浆样品加入乙腈，混合后离心；取上清于40℃沙浴中氮气吹干，得到残渣；残渣加入流动相溶液，复溶、离心，取上清液，过滤得到滤液；高效液相色谱检测：检测波长：270 nm；流动相：乙腈：超纯水；流动相中，乙腈、超纯水体积比为26:74。本发明仅通过乙腈提取净化，氮吹浓缩血浆样品中的吡虫啉，是一种有效、经济和简便的前处理方法。有效改善了吡虫啉药峰的峰形，稳定了药峰保留时间，提升了药物回收率。本发明中的高效液相色谱检测方法线性关系良好，稳定性高，重现性好，灵敏高效，回收率高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	扬州大学
发明人：	李建基;陈军;蒋玮;王亨;崔璐莹;李俊;孟霞
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-20T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201910211322.3
公开号：	CN109856284A
代理机构：	南京纵横知识产权代理有限公司
代理人：	薛海霞;董建林
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	225009 江苏省扬州市大学南路88号
主权项：	1.一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法，包括如下步骤： 1）犬或猫血浆样品前处理：向犬、猫血浆样品加入乙腈，混合后离心；取上清于40 ℃沙浴中氮气吹干，得到残渣；残渣加入流动相溶液，复溶、离心，取上清液，过滤得到滤液； 2）高效液相色谱检测：色谱柱：Symmetry®C18；检测器：紫外检测器；柱温：35℃；检测波长：270 nm；样品流速：1 mL/min；流动相：乙腈：超纯水；流动相中，乙腈、超纯水体积比为26:74。 2.根据权利要求1所述的一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法，其特征在于，步骤1）具体为：取犬或猫血浆样品200 μL，置于2 mL EP管中，加入乙腈1 mL→涡旋3 min，超声3 min，4℃12000 r/min离心10 min→用移液器将上清液吸至10 mL EP管中，于40 ℃沙浴中氮气吹干→残渣加入流动相溶液200 μL，涡旋振荡3 min→将复溶后的溶液移至1.5mL EP管内，离心10 min 4 ℃，12000 r/min→取上清液经0.22 µm有机滤膜过滤并装瓶→滤液供 HPLC分析。 3.根据权利要求1所述的一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法，其特征在于，吡虫啉标准品的色谱峰保留时间为7.9 min，犬或猫血浆样品的色谱峰保留时间为7.7min。 4.根据权利要求1所述的一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法，其特征在于，使用的液相色谱仪为：高效液相色谱仪Waters 2695 恒流式双柱塞往复式串联泵。 5.根据权利要求1所述的一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法，其特征在于，色谱柱：Symmetry®C18 250 mm×4.6 mm，5 μm；检测器：紫外检测器Waters 2998 二极管阵列检测器， Empower 3 工作站；进样量：10 μL。 6.根据权利要求1所述的一种犬猫血浆中吡虫啉高效液相色谱检测方法，其特征在于，步骤1）中流动相溶液为乙腈、超纯水的混合物，流动相溶液中，乙腈、超纯水体积比为26:74。
所属类别：	发明专利