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原文传递一种改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法

专利名称：	一种改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法
摘要：	本发明涉及一种改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，属于脂滴检测的技术领域。本发明所述方法包括冰冻切片的制备；所述冰冻切片的制备包括组织固定步骤、组织脱水步骤、组织切片步骤；其中，所述组织固定步骤为：将新鲜的小鼠肝脏采用10％福尔马林固定3天‑10天；所述组织脱水步骤为：将固定后的小鼠肝脏先采用15％蔗糖溶液浸泡24小时，再采用30％蔗糖溶液浸泡24小时。本发明先采用10％福尔马林对小鼠肝脏进行固定，再采用15％蔗糖溶液和30％蔗糖溶液对小鼠肝脏进行梯度脱水，有利于提高染色结果判断的准确性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	辽宁;21
申请人：	大连医科大学
发明人：	孙杰;吴英杰;米艾;冉丽媛;李有为
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910740022.4
公开号：	CN110487790A
代理机构：	大连至诚专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	杨威;涂文诗
分类号：	G01N21/84(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	116044 辽宁省大连市旅顺口区旅顺南路西段9号大连医科大学重大疾病基因工程模式动物研究所
主权项：	1.一种改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，其特征在于：所述改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法包括冰冻切片的制备；所述冰冻切片的制备包括组织固定步骤、组织脱水步骤、组织切片步骤；其中，所述组织固定步骤为：将新鲜的小鼠肝脏采用10％福尔马林固定3天-10天；所述组织脱水步骤为：将固定后的小鼠肝脏先采用15％蔗糖溶液浸泡24小时，再采用30％蔗糖溶液浸泡24小时。 2.根据权利要求1所述改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，其特征在于：所述组织切片步骤为：将脱水后的小鼠肝脏切片，切片的厚度为8μm-10μm，-80℃～-60℃保存组织切片。 3.根据权利要求2所述改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，其特征在于：所述改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法包括组织切片的油红O染色；所述组织切片的油红O染色包括如下步骤：将冻存的组织切片取出，冷风吹干； 10％福尔马林-1％氯化钙固定液固定15min-20min；油红O染色液染色10min-15min； 50％乙醇分化；水洗终止分化。 4.根据权利要求3所述改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，其特征在于：所述组织切片的油红O染色还包括如下步骤：水洗终止分化后苏木素复染核；水中浸泡，返蓝；甘油明胶封片。 5.根据权利要求4所述改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，其特征在于：所述油红O染色液的制备方法为：将每0.5g的油红O加入到100mL的60％异丙醇中混匀，过滤，得到油红O染色液的储备液，4℃避光保存；在使用时，将油红O染色液的储备液与超纯水按体积比3：2混匀，过滤，并在2小时内染色、显微镜下观察。 6.根据权利要求5所述改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，其特征在于：所述60％异丙醇的制备方法为：将异丙醇与超纯水按体积比3：2混匀。 7.根据权利要求6所述改进的小鼠肝脏脂滴油红O染色方法，其特征在于：所述10％福尔马林-1％氯化钙固定液的制备方法为：将每10g的氯化钙加入到100mL超纯水中混匀，得到10％氯化钙溶液；再将10％氯化钙溶液采用10％福尔马林稀释10倍。
所属类别：	发明专利