详情

原文传递结合纳米孔技术的肿瘤标志miRNA检测装置及方法

专利名称：	结合纳米孔技术的肿瘤标志miRNA检测装置及方法
摘要：	本发明提供一种结合纳米孔技术的肿瘤标志miRNA检测装置及方法，主要由门电压控制模块和纳米孔检测模块构成。其中门电压控制模块由门电压控制器和电池组组成；纳米孔检测模块由集成门电极的纳米孔传感器、膜片钳放大器和计算机组成。本方法结合纳米孔检测技术，在不需要扩增以及荧光标记被检测物的基础上，可以有效提高肿瘤标志miRNA的检测效率。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	东南大学
发明人：	章寅;赵佳斌;陈云飞;司伟;沙菁
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910680952.5
公开号：	CN110488013A
代理机构：	南京众联专利代理有限公司
代理人：	张伟
分类号：	G01N33/574(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	210096 江苏省南京市玄武区四牌楼2号
主权项：	1.一种结合纳米孔技术的肿瘤标志miRNA检测装置，其特征在于：包括门电压控制模块和纳米孔检测模块；所述的门电压控制模块由门电压控制器和电池组组成，门电压控制器的电压由电池组提供；所述的纳米孔检测模块由集成门电极纳米孔传感器、膜片钳放大器和计算机组成，所述的集成门电极纳米孔传感器包括Si基底、SiN薄膜、金属金和氧化铝绝缘层，所述的Si基底、SiN薄膜、金属金和氧化铝绝缘层由下到上依次分布，所述的金属金表面与门电压控制器相连；在所述的纳米孔检测模块上还设置有纳米孔；所述的膜片钳放大器的两个Ag/AgCl电极分别置于集成门电极纳米孔传感器的两端，膜片钳放大器将采集到的信号进行放大，再通过数据传输线将膜片钳设备与计算机相连。 2.根据权利要求1所述的结合纳米孔技术的肿瘤标志miRNA检测装置的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：一、校准步骤：（1）将膜片钳放大器的Ag/AgCl负电极置于集成门电极纳米孔传感器的上端，Ag/AgCl正电极置于集成门电极纳米孔传感器的下端，外加电场通过两个Ag/AgCl电极施加，将集成门电极纳米孔传感器周边充满中性电解液，中性电解液中的离子在外加电场作用下通过集成门电极纳米孔传感器中的纳米孔，此时通过膜片钳放大器，在计算机上得到的电流信号即为基准信号；（2）将绑有亲和素的PNA探针加入到Ag/AgCl负电极一端；（3）通过门电压控制器对集成门电极纳米孔传感器的表面电性和带电量进行调节，通过膜片钳放大器，在计算机上观察得到的电流信号，与基准信号进行比对，信号一致；（4）将肿瘤标志miRNA分子与绑有亲和素的PNA探针在合适的条件下相互混合，进行杂化反应；（5）往Ag/AgCl负电极一端加入肿瘤标志miRNA分子与绑有亲和素的PNA探针杂交反应后的溶液，由于肿瘤标志miRNA分子能与带有亲和素的PNA探针特异性结合，此时亲和素整体在外加电场和电渗力的作用下，会通过集成门电极纳米孔传感器的纳米孔，通过膜片钳放大器，得到电流脉冲信号，在计算机上得到的电流脉冲信号即为参考信号，此时完成校准；二、检测步骤：（6）将待测物质与绑有亲和素的PNA探针在合适的条件下进行杂化反应；（7）往Ag/AgCl负电极一端加入待测物质与绑有亲和素的PNA探针杂交反应后的溶液，通过膜片钳放大器，在计算机上观察得到的电流脉冲信号，与参考信号进行比对，如果出现和参考信号相同的电流脉冲信号，则代表含有肿瘤标志miRNA分子。
所属类别：	发明专利