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原文传递一种海狗人参丸中非法添加物的筛查方法

专利名称：	一种海狗人参丸中非法添加物的筛查方法
摘要：	本发明涉及一种海狗人参丸中非法添加物的筛查方法。该筛查方法包括如下步骤：向海狗人参丸粉末样品中加入有机溶剂和水，微波辅助萃取，然后加入盐析剂，摇振，离心分相，取其上相吹干，溶解过滤后进行HPLC分析，并与海狗人参丸多维指纹图谱和非法添加物的色谱信息进行对比分析即可。本发明利用微波辅助盐析分相萃取结合多维指纹图谱的方法，用于海狗人参丸中非法添加物的筛查，通过对各组成因素的优化，确定了最佳萃取条件；根据非法添加物的光谱特征，对其色谱行为进行了研究，结合多批次海狗人参丸样品的色谱信息，获得了海狗人参丸的多维指纹图谱特征。本发明的筛查方法可检测16种非法添加物，筛查效率高，具有较佳的准确性和可靠性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东药科大学
发明人：	范华均;张薇;王珂
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910703328.2
公开号：	CN110470776A
代理机构：	广州粤高专利商标代理有限公司
代理人：	陈娟
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510006 广东省广州市海珠区宝岗光汉直街40号
主权项：	1.一种海狗人参丸中非法添加物的筛查方法，其特征在于，包括如下步骤：向海狗人参丸粉末样品中加入有机溶剂和水形成混合溶剂萃取体系，微波辅助萃取，然后加入盐析剂，摇振，离心分相，上相吹干，溶解过滤后进行HPLC分析，并与海狗人参丸多维指纹图谱和非法添加物的色谱信息进行对比分析即可；所述有机溶剂为丙酸乙酯、碳酸二甲酯、碳酸二乙酯或氯仿；所述混合溶剂萃取体系中海狗人参丸粉末样品和混合溶剂的质量体积比不大于1:25g/mL；所述有机溶剂和水的体积比不大于1:1；所述有机溶剂和盐析剂的体积质量比为1:1.6～4mL/g。 2.根据权利要求1所述筛查方法，其特征在于，所述有机溶剂为碳酸二甲酯；所述混合溶剂萃取体系中海狗人参丸粉末样品和有机溶剂的质量体积比为1:25g/mL。 3.根据权利要求1所述筛查方法，其特征在于，所述有机溶剂和水的体积比为1:8。 4.根据权利要求1所述筛查方法，其特征在于，所述盐析剂为所述盐析剂为NaCl、Na2SO4、MgSO4、NH4Cl或硫酸铵中的一种或几种。 5.根据权利要求1所述筛查方法，其特征在于，所述有机溶剂和盐析剂的体积质量比为2.5:8mL/g。 6.根据权利要求1所述筛查方法，其特征在于，所述HPLC分析选用的色谱柱为YMC-Triart C18色谱柱；流动相选用流动相A：乙腈，流动相B：磷酸二氢钾水溶液；洗脱条件为：0～15min，25～35％流动相A；15～25min，35％流动相A；25～45min，35～50％流动相A；45～60min，50％～65％流动相A。 7.根据权利要求1所述筛查方法，其特征在于，所述非法添加物为伐地那非类、雄性激素类、育亨宾、α受体拮抗剂、红地那非类、他达拉非类、西地那非类、硫代那非类、他达拉非类和伐地那非类化合物中的一种或几种。 8.根据权利要求1所述筛查方法，其特征在于，所述海狗人参丸多维指纹图谱数据库的建立及对比分析过程如下： S1：在220nm的检测波长下利用紫外光谱检测测定多批次海狗人参丸样品的色谱信息，拟合得到标准指纹图谱R0；HPLC分析结果与标准指纹图谱R0进行比对可对海狗人参丸中是否存在非法添加物作出初步判断； S2：在230nm的检测波长下利用紫外光谱检测测定多批次海狗人参丸样品的色谱信息，得到海狗人参丸的一级指纹图谱，拟合得到标准指纹图谱R1；通过比较一级指纹图谱的差异，并与非法添加物的色谱定位比较，可初步直观的判定出非法添加物的存在； S3：分别在246nm、278nm、280nm、284nm、294nm和355nm的检测波长下利用紫外光谱检测测定多批次海狗人参丸样品的色谱信息，得到海狗人参丸的二级级指纹图谱，分别拟合得到标准指纹图谱R2、R3、R4、R5、R6和R7；通过比较一级图谱的差异，并与非法添加物的色谱定位比较，可对非法添加物进行进一步的确认； S4：分别在激发波长280nm和275nm及发射波长330nm和470nm下进行检测，利用荧光检测测定多批次海狗人参丸样品的荧光光谱信息，得到海狗人参丸的二级指纹图谱，分别拟合得到标准指纹图谱R8和R9；通过比较一级图谱的差异，并与非法添加物的色谱定位比较，可对非法添加物进行筛查。 9.根据权利要求8所述筛查方法，其特征在于，S3中在246nm检测波长下得到的二级指纹图谱和标准指纹图谱R2用于伐地那非类和雄性激素类的确认；S3中在278nm检测波长下得到的二级指纹图谱和标准指纹图谱R3用于育亨宾和α受体拮抗剂的确认；S3中在280nm检测波长下得到的二级指纹图谱和标准指纹图谱R4用于红地那非类的确认；S3中284nm检测波长下得到的二级指纹图谱和标准指纹图谱R5用于他达拉非类的确认；S3中294nm检测波长下得到的二级指纹图谱和标准指纹图谱R6用于西地那非类的确认；S3中355nm检测波长下得到的二级指纹图谱和标准指纹图谱R7用于硫代那非类的确认。 10.根据权利要求8所述筛查方法，其特征在于，S4中激发波长280nm和发射波长330下进行检测得到的二级指纹图谱和标准指纹图谱R8用于他达拉非类的确认；S4中激发波长275nm和发射波长470nm下进行检测得到的二级指纹图谱和标准指纹图谱R9用于伐地那非类的确认。
所属类别：	发明专利