详情

原文传递一种髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明涉及多肽化学和免疫学技术领域，具体是公开了一种髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒，所述试剂盒采用双抗原夹心法检测所述人MBP抗体的含量；所述试剂盒内包括包被板、校准品、MBP结合抗原、酶结合物、质控品、显色剂A、显色剂B、终止液和浓缩洗涤液；所述包被板包被有MBP包被抗原，所述MBP包被抗原是通过使所述人MBP抗原表位肽中的X片段与载体蛋白偶联制备而成的，所述MBP结合抗原是通过使所述人MBP抗原表位肽中的Y片段与载体蛋白偶联制备而成的，所述MBP结合抗原标记有生物素。本发明克服了现有技术的不足，采用双抗原夹心法定量检测人MBP抗体的含量，操作简便、快速，并且检测准确度和精密度好、特异性高、灵敏度好、稳定性好。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	安徽;34
申请人：	安徽恩禾生物技术有限公司
发明人：	余旭亮
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-23T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910786513.2
公开号：	CN110470848A
代理机构：	合肥律众知识产权代理有限公司
代理人：	刘苗
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	230000 安徽省合肥市高新区创新大道106号明珠产业园5#5层D区
主权项：	1.一种髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒采用双抗原夹心法检测所述人MBP抗体的含量；所述试剂盒内包括包被板、校准品、MBP结合抗原、酶结合物、质控品、显色剂A、显色剂B、终止液和浓缩洗涤液；所述包被板包被有MBP包被抗原，所述MBP包被抗原是通过使所述人MBP抗原表位肽中的X片段与载体蛋白偶联制备而成的，所述MBP结合抗原是通过使所述人MBP抗原表位肽中的Y片段与载体蛋白偶联制备而成的，所述MBP结合抗原标记有生物素，所述人MBP抗原表位肽的NCBI登录号为CAA35179.1。 2.根据权利要求1所述的一种髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒，其特征在于：所述MBP包被抗原的浓度为22μg/L，所述MBP结合抗原的浓度为24μg/L，所述酶结合物为链霉素标记的辣根过氧化物酶，其浓度为3μg/L。 3.根据权利要求1所述的一种髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒，其特征在于：所述显色剂A为10g/L的过氧化脲素溶液，所述显色剂B为2g/L的TMB·2HCl溶液，所述显色剂A和显色剂B的体积比为1:1。 4.根据权利要求1所述的一种髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒，其特征在于：所述质控品和校准品来自于人体血清，所述质控品的浓度为7ng/L，所述校准品的浓度梯度为10μg/L、5μg/L、2μg/L、1μg/L、0.5μg/L、0μg/L。 5.根据权利要求1所述的一种髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒，其特征在于：所述浓缩洗涤液为25倍浓缩的磷酸缓冲液，所述终止液为2M H2SO4溶液。 6.一种基于权利要求1-5任意一项所述髓鞘碱性蛋白抗体检测试剂盒试剂盒的制备方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤： S1、制备MBP包被抗原以及制备MBP结合抗原； S2、通过MBP结合抗原和链霉素标记的辣根过氧化物酶的偶联，制备得到MBP结合抗原-HRP标记物； S3、各种缓冲液及试剂的配制； S4、采用包被缓冲液以一定比例将MBP包被抗原稀释，100μL/孔加入到酶标板，封装于加有干燥剂的铝膜袋中，包被完毕；具体为：将MBP包被抗原溶于pH＝9.6的0.05M的包被缓冲液中，制成预包被液，在酶标板上每孔按0.1μg/孔加入100μl，置4℃放置18-24小时，取出，甩掉包被液，用样品/洗涤缓冲液洗涤，经1(w/v)％BSA-0.05M乙醇胺封闭16小时、过夜干燥后装入铝铂袋中抽真空密封，并置于4℃保存。
所属类别：	发明专利