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原文传递一种基于AuNPs@ZIF-8的适配体荧光传感器的制备方法及其应用

专利名称：	一种基于AuNPs@ZIF-8的适配体荧光传感器的制备方法及其应用
摘要：	本发明公开了一种基于AuNPs@ZIF‑8的适配体荧光传感器的制备方法及其应用，合成了粒径在70nm左右的ZIF‑8，利用硼氢化钠对氯金酸的还原作用原位合成金纳米粒子，并且利用巯基与金纳米粒子结合形成金硫键将巯基修饰的FAM‑S1和锁定的DNAzyme修饰到金纳米粒子上面，在有目标物miRNA存在的情况下，miRNA与锁定链互补配对，DNAzyme释放出来，当pH为酸性时，ZIF‑8降解释放出锌离子，DNAzyme在锌离子的辅助下切割基质链S1，释放出FAM信号，并通过DNAzyme在金纳米粒子表面的行走实现信号放大。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	安徽;34
申请人：	安徽师范大学
发明人：	王广凤;胡慧
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-12-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910631745.0
公开号：	CN110618112A
代理机构：	芜湖安汇知识产权代理有限公司
代理人：	尹婷婷
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	241000 安徽省芜湖市弋江区花津南路安徽师范大学
主权项：	1.一种基于AuNPs@ZIF-8的适配体荧光传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤： (1)制备AuNPs@ZIF-8材料； (2)将DNA Lock1溶液和DNA DNAzyme溶液混合，加热后冷却，得到锁定的DNAzyme溶液； (3)将锁定的DNAzyme溶液和DNA S1溶液加入到AuNPs@ZIF-8溶液中，再加入吐温-20溶液，室温培育10～15h； (4)分四次向步骤(3)中加入氯化钠水溶液，每次加入的时间间隔为40～45min；加入完成后继续培育22～26h，所得产物经离心、洗涤后，分散在缓冲溶液中，即可得到所述基于AuNPs@ZIF-8的适配体荧光传感器DNAzyme-AuNPs@ZIF-8荧光传感器。 2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述AuNPs@ZIF-8材料的制备方法为：向ZIF-8的甲醇溶液中，逐滴加入氯金酸水溶液，搅拌反应5～8h；然后迅速加入新配置的硼氢化钠甲醇溶液，继续反应1～1.5h，所得产物经清洗、离心、干燥，即可得到所述AuNPs@ZIF-8材料。 3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述ZIF-8的甲醇溶液的浓度为1.5～2.5mg/mL；所述氯金酸水溶液的重量浓度为0.8～1.5％；所述硼氢化钠甲醇溶液的浓度为6.0～8.0mg/mL，ZIF-8的甲醇溶液、氯金酸水溶液、硼氢化钠甲醇溶液的体积之比为8～12：0.2～0.4：1。 4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述DNA Lock1、DNA DNAzyme、DNA S1的序列分别为： DNA Lock1：5'-TTGAAG CAC AAA TTC GGT TCT ACA GGG TA-3’； DNA DNAzyme： 5'-SH-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTATTCTTCCGACCGGTCGAAAATAGTGGCCCGAATTTGTGCTTCAA-3’； DNA S1：5’-SH-TTTTTTTTTTTTTTGGGCCACTAT rAGGAAT-FAM-3’。 5.根据权利要求1或4所述的制备方法，其特征在于，所述DNA Lock1溶液、DNA DNAzyme溶液和DNA S1溶液的浓度均为100μM，AuNPs@ZIF-8溶液的浓度为1mg/mL。 6.根据权利要求1或4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述DNA Lock1溶液与DNA DNAzyme溶液的体积之比为1:3；所述加热冷却指的是：加热到70～80℃保持3～5min后，以0.5～1.5℃/min的速度缓慢降温到室温。 7.根据权利要求1或4所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，锁定的DNAzyme溶液、DNA S1溶液与AuNPs@ZIF-8溶液的体积之比为1:5:194；所述吐温-20在体系中的终浓度为0.05％。 8.根据权利要求1或4所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述氯化钠水溶液的浓度为0.1M；每次加入的氯化钠水溶液与DNA S1溶液的体积之比为2:1。 9.根据权利要求1-8任意一项所述的制备方法制备得到的基于AuNPs@ZIF-8的适配体荧光传感器在检测miRNA中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述miRNA的检测方法包括以下步骤：将所述基于AuNPs@ZIF-8的适配体荧光传感器分散到pH5.5的Tris-HCl缓冲溶液，分别加入一系列不同浓度的miRNA-10b溶液，培养后，检测各体系对应的荧光信号，构建荧光强度和miRNA-10b溶液的浓度的线性关系，进而实现对miRNA-10b的定量检测。
所属类别：	发明专利