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原文传递一种用于甲胎蛋白检测的电化学传感器及其制备方法和应用

专利名称：	一种用于甲胎蛋白检测的电化学传感器及其制备方法和应用
摘要：	本发明提供一种用于甲胎蛋白检测的电化学传感器及其制备方法和应用，所述电化学传感器以玻碳电极为基底，所述玻碳电极上修饰有碳纳米管‑甲胎蛋白适体复合物，所述碳纳米管为表面具有活性末端和非活性末端的碳纳米管，所述甲胎蛋白适体与碳纳米管上的活性末端连接形成碳纳米管‑甲胎蛋白适体复合物；所述修饰有碳纳米管‑甲胎蛋白适体复合物的玻碳电极上捕获有甲胎蛋白。该电化学传感器检测甲胎蛋白的最低检测限度为0.0015‑0.002ng/mL，检测灵敏度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	昆山迪安医学检验实验室有限公司
发明人：	顾军;强建新;张晓楠
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-12-31T00:00:00+0800
申请号：	CN201910927004.7
公开号：	CN110632149A
代理机构：	北京品源专利代理有限公司
代理人：	巩克栋
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	215300 江苏省苏州市昆山市花桥镇金洋路15号金融园15号楼
主权项：	1.一种用于甲胎蛋白检测的电化学传感器，其特征在于，所述电化学传感器以玻碳电极为基底，所述玻碳电极上修饰有碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物，所述碳纳米管为表面具有活性末端和非活性末端的碳纳米管，所述甲胎蛋白适体与碳纳米管上的活性末端连接形成碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物；所述修饰有碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物的玻碳电极上捕获有甲胎蛋白。 2.根据权利要求1所述的用于甲胎蛋白检测的电化学传感器，其特征在于，所述表面具有活性末端和非活性末端的碳纳米管的制备方法包括以下步骤：将表面具有羧基的碳纳米管利用活化试剂进行末端活化，而后加入至混合硫醇溶液中，室温反应，得到表面具有活性末端和非活性末端的碳纳米管。 3.根据权利要求1或2所述的用于甲胎蛋白检测的电化学传感器，其特征在于，所述活化试剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的混合物；优选地，所述活化试剂的用量为表面具有羧基的碳纳米管质量的5-10％；优选地，所述混合硫醇溶液为活性末端硫醇溶液和非活性末端硫醇溶液的混合物；优选地，所述活性末端硫醇溶液为羧基末端硫醇、醛基末端硫醇或氰基末端硫醇中的任意一种，优选羧基末端硫醇；优选地，所述非活性末端硫醇为烷基末端硫醇或烷氧基末端硫醇中的任意一种；优选地，所述混合硫醇溶液中活性末端硫醇与非活性末端硫醇的摩尔比为1:(1-3)；优选地，所述混合硫醇溶液中活性末端硫醇和非活性末端硫醇的总质量与表面具有羧基的碳纳米管的质量比为(2-5):1；优选地，所述室温反应的时间为3-10小时。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的用于甲胎蛋白检测的电化学传感器，其特征在于，将甲胎蛋白适体与碳纳米管上的活性末端连接的方法为：利用活化试剂将表面具有活性末端和非活性末端的碳纳米管进行活化，而后将其加入氨基化甲胎蛋白适体溶液中进行反应，洗涤去除未结合的甲胎蛋白适体，从而将甲胎蛋白适体连接在碳纳米管的活性末端上。 5.根据权利要求4所述的用于甲胎蛋白检测的电化学传感器，其特征在于，所述活化试剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的混合物；优选地，所述活化试剂的用量为表面具有活性末端和非活性末端的碳纳米管质量的1-10％；优选地，所述氨基化甲胎蛋白适体溶液的浓度为50-150μg/mL；优选地，所述氨基化甲胎蛋白适体与表面具有活性末端和非活性末端的碳纳米管的质量比为(0.01-0.75):1。 6.根据权利要求4或5所述的用于甲胎蛋白检测的电化学传感器，其特征在于，所述加入氨基化甲胎蛋白适体溶液中进行反应的温度为室温；优选地，所述加入氨基化甲胎蛋白适体溶液中进行反应的时间为10-30min。 7.根据权利要求1-6中任一项所述的用于甲胎蛋白检测的电化学传感器的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： (1)利用碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物修饰玻碳电极，并用牛血清白蛋白封闭修饰后的玻碳电极上的非特异性吸附位点，得到碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物-电极； (2)将碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物-电极浸在甲胎蛋白溶液中孵化，得到捕获有甲胎蛋白的所述用于甲胎蛋白检测的电化学传感器。 8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)在对玻碳电极进行修饰前对其进行预处理，所述预处理为对玻碳电极进行抛光以及超声清洗；优选地，所述利用碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物修饰玻碳电极为将碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物分散液涂于玻碳电极表面，晾干；优选地，所述碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物分散液为碳纳米管-甲胎蛋白适体复合物的PBS分散液。 9.根据权利要求7或8所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述胎蛋白溶液的浓度为5-50ng/mL；优选地，步骤(2)所述孵化的温度为室温；优选地，步骤(2)所述孵化的时间为20-40min。 10.根据权利要求1-6中任一项所述的用于甲胎蛋白检测的电化学传感器在甲胎蛋白检测装置中的应用。
所属类别：	发明专利