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前列腺特异性抗原的检测试剂与试剂盒
| 专利名称： | 前列腺特异性抗原的检测试剂与试剂盒 |
| 摘要： | 通过对人血清白蛋白（HSA）与荧光染料分子相互作用的研究，我们发现HSA能够使DNA嵌入性染料ethyl‑4‑[3,6‑bis(1‑methyl‑4‑vinylpyridium iodine)‑9H‑carbazol‑9‑yl)]butanoate（EBCB）的荧光显著增强。基于此，本发明公开了一种前列腺特异性抗原（PSA）的检测试剂与试剂盒，包括以下步骤：利用PSA核酸适配体序列和三链DNA的组成原理构建三链分子信标（TMS），并通过Au‑S键修饰在金纳米颗粒表面，加入双功能荧光染料EBCB嵌入分子信标得到检测探针。当PSA存在时，荧光快速产生。加入dansylamide(DNSA)后，荧光进一步放大。该发明试剂和试剂盒以内源HSA作为荧光信号放大器，工作范围可调，检出限较低，具有较好的检测效果。此外，该体系对血清中其他生物标志物有较好的选择性，不需要外来工具酶或纳米催化体系，具有成本效益，具有原始创新性和应用前景。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 湖南;43 |
| 申请人： | 长沙理工大学 |
| 发明人： | 邹振;贺丽蓓;杨荣华;齐鹏;杨华;罗梓凌 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-05-10T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-12-31T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910389359.5 |
| 公开号： | CN110632040A |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21 |
| 申请人地址： | 410114 湖南省长沙市雨花区万家丽南路二段960号 |
| 主权项： | 1.一种血清中前列腺特异性抗原的检测试剂与试剂盒，其特征在于： 利用 PSA 核酸适配体序列和三链 DNA 的组成原理构建三链分子信标，并通过Au-S键修饰在金纳米颗粒表面，加入双功能荧光染料 EBCB 嵌入分子信标得到检测探针，当 PSA存在时，荧光快速产生，进而实现对前列腺特异性抗原的高灵敏检测。 2.根据权利要求1所述的前列腺特异性抗原的分析方法，其特征在于，在含有AuNPs 的PBS 缓冲溶液中加入巯基修饰的 TMS，形成 TMS 修饰的 AuNPs，向上述溶液中加入 EBCB，摇晃混匀，使 EBCB 与 DNA 充分作用，离心取下清液，形成用于 PSA 的 TMS纳米探针，然后加入DNSA，最后加入被检测样品；以475 nm为激发光源，收集500 nm-750 nm的荧光，根据荧光强度对PSA实现定性与定量检测。 3.根据权利要求1所述的前列腺特异性抗原的分析方法，其特征在于，所述 HSA 为血液中的固有成分，作为本方法的信号放大器。 4.根据权利要求1所述的前列腺特异性抗原的分析方法，其特征在于，所述染料 EBCB是一种双功能染料，既可以和 DNA 结合，又能和HSA特异性结合放大荧光信号。 5.根据权利要求1所述的前列腺特异性抗原的分析方法，其特征在于，所述 HSA -EBCB配合物在加入 DNSA 后可以进一步增强荧光，其最佳浓度为10 μM。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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