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原文传递一种基于高分辨质谱的农药残留侦测方法

专利名称：	一种基于高分辨质谱的农药残留侦测方法
摘要：	本发明提供了一种基于高分辨质谱的农药残留侦测方法，同时兼具GC‑Q‑TOF/MS和LC‑Q‑TOF/MS的优点，检测能力相对于单一技术得到了显著提高，对于GC‑Q‑TOF/MS来说，检测能力提高了51.1％，对于LC‑Q‑TOF/MS来说，检测能力提高了39.6％，彰显两种技术的良好互补性，充分体现了两种技术联用后实现了高效灵敏的检测。所述农药残留侦测方法运用高分辨率质谱技术与数据科学融合，是一种不需要标准物对照，快速、高通量、准确可靠的农药残留检测新技术；实现了食用农产品农药残留数据的及时采集、管理和分析，并在短时间内生成农药残留检测结果，为农药残留追根溯源、风险评估以及农药的科学管理与使用，提供便利可行的方案。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	河北大学
发明人：	徐建中;乔晓强;陈晓欣;常巧英;梁淑轩;申世刚
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-05T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-26T00:00:00+0800
申请号：	CN201910163768.3
公开号：	CN109682905A
代理机构：	北京科石知识产权代理有限公司
代理人：	刘艳春
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	071002 河北省保定市五四东路180号
主权项：	1.一种基于高分辨质谱的农药残留侦测方法，其特征在于，所述农药残留侦测方法包括以下步骤： A、将GC-Q-TOF/MS和LC-Q-TOF/MS技术联用，对多种农药样品进行检测，获得农药样品的全谱数据，并将多种农药样品的全谱数据录入农药数据库中；将农药最大残留限量标准数据录入标准数据库中； B、将待测水果蔬菜取可食用部分，粉碎、匀浆后，使用1％醋酸-乙腈作为提取液，乙腈-甲苯作为洗脱液，分别进行GC-Q-TOF/MS和LC-Q-TOF/MS检测；得到待测水果蔬菜的图谱数据； C、将步骤B得到的待测水果蔬菜的图谱数据按照和农药样品的全谱数据相同的格式上传至对比服务器中，与步骤A得到的农药数据库进行对比分析，当未对比分析出有相同化合物时，输出“未检出”结果，当对比分析出有相同化合物时，分析计算出待测水果蔬菜中的农药残余种类和含量，并继续分析； D、将待测水果蔬菜农药残余含量与步骤A中的标准数据库相同种类的最大残留限量标准数据进行对比，当待测水果蔬菜农药残余含量大于等于最大残留限量标准数据时，输出“检出且超标”结果；当待测水果蔬菜农药残余含量小于最大残留限量标准数据时，输出“检出但未超标”结果。 2.根据权利要求1所述的农药残留侦测方法，其特征在于，步骤A中，所述农药样品的配制方法为：称取10.00mg各种农药标准品，使用甲醇、甲苯或丙酮溶解并定容至25mL，即得到农药样品单标溶液。 3.根据权利要求1所述的农药残留侦测方法，其特征在于，步骤B中，将待测水果蔬菜取可食用部分，粉碎、匀浆后，称取10.00g置于80mL具塞离心管中，加入40mL 1％醋酸-乙腈，然后在1200r/min的转速下匀浆提取1min，再向其中加入1g NaCl，4g无水MgSO4，震荡10min，在4200r/min的转速下离心5min，取上清液20mL至鸡心瓶中，在40℃水浴中旋蒸浓缩至2mL，得到样品浓缩液，然后在Carbon/NH2柱中加入2cm高无水硫酸钠，用4mL乙腈-甲苯淋洗SPE柱，然后将样品浓缩液转移至SPE柱上，使用25mL乙腈-甲苯进行洗脱，洗脱完成后，在40℃水浴中旋蒸浓缩至0.5mL，得到样品净化浓缩液，将所述样品净化浓缩液在氮气下吹干，然后加入2mL的乙腈-甲苯，超声复溶并混匀，平均分成两份，并分别在氮气下吹干，然后分别使用1mL 1％甲酸乙腈溶液和1mL正己烷定容，经0.22μm滤膜过滤后，分别供GC-Q-TOF/MS和LC-Q-TOF/MS检测。 4.根据权利要求1所述的农药残留侦测方法，其特征在于，GC-Q-TOF/MS的操作条件为：质谱仪采用电子轰击电离源，能量70eV；离子源温度230℃，传输线温度280℃；溶剂延迟6min，质量扫描范围50-600m/z，采集速率2spectrum/s；程序升温过程：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min程序升温至250℃，再以10℃/min程序升温至300℃，保持5min；载气使用氦气，流速为1.2mL/min；进样口温度280℃，进样量1μL。 5.根据权利要求1所述的农药残留侦测方法，其特征在于，LC-Q-TOF/MS的操作条件为：质谱仪采用电喷雾电离正离子模式；毛细管电压4000V；干燥温度325℃，流速10L/min；鞘气温度325℃，流速11L/min；雾化气压为40psi；锥孔气压60V；碎裂电压140V；质量扫描范围50-1600m/z；流动相A为5mM的乙酸铵-0.1％甲酸-水，流动相B为乙腈；梯度洗脱程序为，0min：1％B，3min：30％B，6min：40％B，9min：40％B，15min：60％B，19min：90％B，23min：90％B，23.01min：1％B，后运行4min；流速为0.4mL/min，柱温40℃；进样量10μL。 6.根据权利要求1所述的农药残留侦测方法，其特征在于，GC-Q-TOF/MS数据库的构建方法为：向仪器中注入1μL浓度为1mg/L的农药样品单标溶液，GC-Q-TOF/MS在MS模式下进行测定，在定性软件中打开一级模式全谱数据，记录下该峰在色谱分离条件下的保留时间；并使用NIST库识别匹配当前化合物的全面化合物信息，包括名称、分子式、精确分子量以及离子碎片组成信息，然后将编辑完成的质谱图和化合物信息发送至PCDL Manager软件，并对相应的农药信息相关联，建立农药化学污染物一级碎片离子谱图库。 7.根据权利要求1所述的农药残留侦测方法，其特征在于，LC-Q-TOF/MS数据库的构建方法为：向仪器中注入1μL浓度为1mg/L的农药样品单标溶液，LC-Q-TOF/MS在MS模式下进行测定，记录下该峰在色谱分离条件下的保留时间，离子化形式，并将每种农药的名称、化学分子式、精确分子量和保留时间录入数据文件，建立农药化学污染物一级精确质量数据库。 8.根据权利要求7所述的农药残留侦测方法，其特征在于，LC-Q-TOF/MS数据库还包括农药化学污染物二级谱图库，所述农药化学污染物二级谱图库的构建方法为：在TargetedMS/MS采集界面输入各种农药的母离子、保留时间和不同碰撞能量，进行数据采集，并将不同碰撞能下的碎片离子全扫描质谱图生成CEF文件，将生成的SEF文件导入PCDL软件中，选择4张最佳碰撞能下的质谱图并与对应的农药信息相对应并保存，建成农药化学污染物二级谱图库。 9.根据权利要求1所述的农药残留侦测方法，其特征在于，步骤C中，将步骤B得到的待测水果蔬菜的图谱数据按照和农药样品的全谱数据进行对比分析，依据农药数据库对待测水果蔬菜检测结果中目标化合物定性检索，检索参数保留时间偏差限定为±0.5min，精确质量偏差限定为±5ppm，离子化形式选择+H，+NH4，+Na模式，依据每种化合物各要素的实测值与农药数据库中理论值的偏差，给出检索匹配得分值，检索匹配得分值＞90的化合物，认定化合物被识别，分析计算出待测水果蔬菜中的农药残余种类和含量，并继续分析。 10.根据权利要求9所述的农药残留侦测方法，其特征在于，步骤D中，当待测水果蔬菜农药残余含量大于等于最大残留限量标准数据时，输出“检出且超标”报告，并说明超标农药的种类和超标量；当待测水果蔬菜农药残余含量小于最大残留限量标准数据时，输出“检出但未超标”报告，并说明农药的种类、残留量和最大残留限量。
所属类别：	发明专利