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原文传递一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法

专利名称：	一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法
摘要：	本发明属于柔性杂化膜材料和可视化检测探针的制备技术领域，具体涉及一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法。采用超声和溶剂热制备金属离子掺杂黑磷量子点M‑BPQDs，在其表面生长介孔SiO2和氨基化改性，连接羧基化单链DNA1，受体分子进入孔内，单链DNA2适体与DNA1因碱基互补结合封装受体于孔内，制得M‑BPQDs探针。DNA1终端‑SH与聚异丁烯酸甲酯‑聚酰亚胺‑金纳米粒层层组装复合薄膜以Au‑S键结合，连接薄膜与探针构筑柔性杂化膜。与现有技术相比，本发明柔性杂化膜的制备简单，成本低，灵敏度高，当含有肿瘤标志物的生物流体样品滴加到杂化膜上，在近红外光激发下构建上转换发光强度与标志物浓度之间的联系，实现标志物可视化检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	青岛大学
发明人：	金辉;桂日军;孙玉娇;姜晓文
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201910226383.7
公开号：	CN109724949A
代理机构：	青岛高晓专利事务所(普通合伙)
代理人：	张世功
分类号：	G01N21/63(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	266071 山东省青岛市崂山区香港东路7号
主权项：	1.一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤： (1)将块状黑磷晶体研磨成粉末，加入溶解了金属盐的极性溶剂中，采用探头和浴池超声剥离出黑磷纳米片，加入硫醇配体，通过超声辅助溶剂热制备金属离子掺杂的黑磷量子点M-BPQDs； (2)依据法在M-BPQDs表面生长介孔二氧化硅mSiO2，然后进行-NH2功能化改性制得M-BPQDs/mSiO2-NH2，再与单链DNA1(HS-DNA1-COOH)通过羧-胺偶联反应结合，制备M-BPQDs/mSiO2@DNA1； (3)电子受体分子进入mSiO2孔道内完成受体分子负载，添加特异性适体单链DNA2与DNA1碱基互补配对形成双螺旋结构，封装受体分子，得到纳米杂化物载体探针M-BPQDs/mSiO2@DNA1-DNA2@受体； (4)以聚异丁烯酸甲酯PMMA为层状基底，表面黏合一层聚酰亚胺PI，电极夹固定PMAA-PI薄膜浸没在电解液中，以KCl饱和甘汞电极为参比，铂丝电极为辅助，PMAA-PI薄膜为工作电极，在电解液中加入HAuCl4，循环伏安扫描，在薄膜表面电化学还原生成金纳米颗粒AuNPs制得PMMA-PI-AuNPs复合薄膜； (5)探针上DNA1(HS-DNA1-COOH)末端-SH与薄膜上AuNPs通过Au-S键结合，将薄膜与探针连接在一起构筑成柔性杂化膜。当生物流体样品中含有肿瘤标志物时，将其滴加至该杂化膜上，在近红外光激发下观察浸润杂化膜的上转换发光颜色变化，实现对肿瘤标志物的可视化检测。 2.一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的金属离子为Ag+,Mn2+,Co2+,Ni2+等，M-BPQDs为1～5nm。 3.一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的表面mSiO2厚度为50～200nm。 4.一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的受体为5-氟尿嘧啶、多巴胺、芦丁、槲皮素等，DNA2是癌胚抗原、甲胎蛋白、糖类抗原、前列腺特异性抗原等标志物的单链DNA适体。 5.一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的PMMA厚度为50～100nm，PI厚度为1～2μm，AuNPs厚度为10～100nm。 6.一种用于肿瘤标志物可视化检测的上转换发光柔性杂化膜的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述的上转换发光发射峰波长为500～600nm，肿瘤标志物浓度为1nM～1mM。
所属类别：	发明专利