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原文传递一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法

专利名称：	一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法
摘要：	本发明公开了一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法，确定待检测的目标肿瘤标志物；合成g‑C3N4纳米片；合成AuNPs；金电极的预处理；制备Ru(bpy)32+/AuNPs/g‑C3N4复合薄膜修饰电极；电化学发光生物传感的定量分析。本发明的有益效果是基于二茂铁与三联吡啶钌之间作用，通过探针构型的转换引起电化学发光信号的改变，从而更灵敏地检测目标肿瘤标志物。该方法操作简便、无需封闭、特异性强、重现性高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	青岛农业大学
发明人：	王修中;孙萍;于宁
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910288936.1
公开号：	CN109946355A
代理机构：	北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	汤东凤
分类号：	G01N27/26(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	266109 山东省青岛市城阳区长城路700号
主权项：	1.一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法，其特征在于按照以下步骤进行： 1)确定待检测的目标肿瘤标志物； 2)合成g-C3N4纳米片； 3)合成AuNPs； 4)金电极的预处理； 5)制备Ru(bpy)32+/AuNPs/g-C3N4复合薄膜修饰电极； 6)电化学发光生物传感的定量分析。 2.按照权利要求1所述一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法，其特征在于：所述步骤2)通过典型的高温煅烧法制备g-C3N4纳米片，将5g三聚氰胺接地并置于坩埚中，在马弗炉中加热至550℃，保持4小时，并自然冷却至室温，得到黄色固体。然后，将黄色粉末研磨成粉末，接下来，将100mg黄色粉末和100mL去离子水混合并超声8小时以供g-C3N4纳米片用于下一次使用。 3.按照权利要求1所述一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法，其特征在于：所述步骤3)通过柠檬酸盐还原溶液中的HAuCl4合成AuNPs，使含有96mLH2O和4mL1％HAuCl4的反应液加热回流，当溶液沸腾时，加入10mL38.8mM柠檬酸钠溶液，将混合液保持沸腾15分钟，然后自然冷却至室温，将产品储存在4℃以备后续使用。 4.按照权利要求1所述一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法，其特征在于：所述步骤4)金电极经0.05μm的α-A12O3抛光粉抛光后，用去离子水冲洗干净，并分别在去离子水和乙醇中超声10min，采用三电极系统检测，工作电极为金电极，对电极为铂丝电极，参比电极为Ag/AgCl电极，在0.5Μ硫酸中，对金电极进行循环伏安扫描，检测完毕后，用去离子水冲洗电极，吹干电极表面，备用。 5.按照权利要求1所述一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法，其特征在于：所述步骤5)首先将5mg g-C3N4和10nMAuNP与2％CS溶液混合，得到AuNPs/g-C3N4，2mg/mL，然后，将上述溶液与Ru(bpy)32+溶液混合，将产物在室温下在黑暗中保持摇动10小时，获得Ru(bpy)32+/AuNPs/g-C3N4混合液，吸取5μL上述混合液滴加在金电极上，室温下避光放置干燥，该过程重复两次。 6.按照权利要求1所述一种检测肿瘤标志物的电化学发光方法，其特征在于：所述步骤6)在含有20mM三丙胺的反应溶液中，扫描速率为100mV/s，在0～2.0V的电位范围内测量ECL信号，每个样品检测三次，取其平均值。ECL信号随着Mucin I浓度的增加而降低，此外，ECL信号与Mucin I浓度的对数之间存在良好的线性关系，浓度范围为0-200ng/mL，线性回归方程为I＝-5873.81log10c+13522.31，I：ECL信号，c：Mucin I浓度，ng/mL，相关系数为0.9932。
所属类别：	发明专利