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原文传递一种缬氨酸的高效液相检测方法

专利名称：	一种缬氨酸的高效液相检测方法
摘要：	本发明涉及柱色谱技术领域，尤其涉及一种缬氨酸的高效液相检测方法。其色谱条件为：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：体积比为25‑29:71‑75的磷酸盐缓冲溶液与乙腈的混合溶液，其中磷酸盐缓冲溶液的浓度为48‑52mmol/L，pH值为2.5‑2.7；流速：0.7‑1.0mL/min；柱温：25‑35℃；检测波长：205nm；进行高效液相色谱分析，测定含有缬氨酸的溶液中缬氨酸的含量。在本发明提供的检测条件下，缬氨酸与各杂质以及各杂质之间的分离均较好，出峰时间较为合适，预处理步骤简单，缬氨酸不需要衍生，检测时间短。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	内蒙古;15
申请人：	内蒙古精晶生物科技有限公司
发明人：	王阳;何连顺;李斌水;糙吉;马静;冯立双
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-05T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201910164348.7
公开号：	CN109725099A
代理机构：	石家庄国为知识产权事务所
代理人：	陆林生
分类号：	G01N30/74(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	028000 内蒙古自治区通辽市开鲁县工业园区
主权项：	1.一种缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：在以下色谱条件下进行高效液相色谱分析，测定含有缬氨酸的溶液中缬氨酸的含量：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：体积比为25-29:71-75的磷酸盐缓冲溶液与乙腈的混合溶液，其中磷酸盐缓冲溶液的浓度为48-52mmol/L，pH值为2.5-2.7；流速：0.7-1.0mL/min；柱温：25-35℃；检测波长：205nm。 2.如权利要求1所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：在以下色谱条件下进行高效液相色谱分析，测定含有缬氨酸的溶液中缬氨酸的含量：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：体积比为26-28:72-74的磷酸盐缓冲溶液与乙腈的混合溶液，其中磷酸盐缓冲溶液的浓度为49-51mmol/L，pH值为2.6-2.7；流速：0.7-0.8mL/min；柱温：28-32℃；检测波长：205nm。 3.如权利要求2所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：在以下色谱条件下进行高效液相色谱分析，测定含有缬氨酸的溶液中缬氨酸的含量：色谱柱：氨基键合硅胶色谱柱；流动相：体积比为27:73的磷酸盐缓冲溶液与乙腈的混合溶液，其中磷酸盐缓冲溶液的浓度为50mmol/L，pH值为2.62；流速：0.7mL/min；柱温：30℃；检测波长：205nm。 4.如权利要求1-3任一项所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲溶液为磷酸氢二铵溶液。 5.如权利要求1-3任一项所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：进样体积为20μL。 6.如权利要求1-3任一项所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：所述检测方法至少包括以下步骤：步骤a、配制缬氨酸标准溶液；步骤b、采用高效液相色谱分别对标准溶液进行液相色谱分析，记录分析得到的峰面积，并采用外标法绘制缬氨酸含量-峰面积的标准曲线回归方程；步骤c、将含有缬氨酸的溶液稀释，利用液相色谱仪进行液相色谱分析，采用与标准溶液完全相同的色谱条件，并同时记录峰面积，根据步骤b的标准曲线回归方程计算得出所述含有缬氨酸的溶液中缬氨酸的含量。 7.如权利要求6所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：步骤a中，将缬氨酸对照品溶于流动相中，得到缬氨酸标准储备液，再将所述缬氨酸标准储备液稀释成若干不同质量浓度的缬氨酸标准溶液。 8.如权利要求7所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：所述缬氨酸标准溶液的浓度分别为120μg/L、160μg/L、200μg/L、240μg/L和280μg/L。 9.如权利要求7所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：所述缬氨酸标准储备液的浓度为2.00mg/mL。 10.如权利要求6所述的缬氨酸的高效液相检测方法，其特征在于：步骤c中，将含有缬氨酸的溶液采用160-170倍体积的流动相稀释。
所属类别：	发明专利