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原文传递一种提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性的催化剂

专利名称：	一种提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性的催化剂
摘要：	本发明属于侧向流动免疫分析技术领域，具体涉及一种提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性的催化剂，所述目标蛋白为兔免疫球蛋白，所述催化剂为金铂纳米花，所述金铂纳米花作为标记物与抗体相连得到金铂纳米花‑抗体混合液，用于侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测，检测前添加显色底物。本发明相比现有技术具有以下优点：由本发明中方法制备所得金铂纳米花用于兔免疫球蛋白相比现有技术对过氧化酶的显色底物AEC有催化作用，在检测目标蛋白的情况下，对显色底物的催化作用较强，提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	安徽;34
申请人：	安徽科技学院
发明人：	刘国东;于庆才;张静;钱立生;张学记
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201910040701.0
公开号：	CN109738634A
代理机构：	合肥广源知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	宋宇晴
分类号：	G01N33/535(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	233100 安徽省滁州市凤阳县东华路
主权项：	1.一种提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性的催化剂，其特征在于，所述目标蛋白为兔免疫球蛋白，所述催化剂为金铂纳米花，所述金铂纳米花的制备方法包括以下步骤：（1）将0.5mL的1wt％氯金酸溶液加入到50mL水溶液中，得到氯金酸预制液，加热至沸腾，并在搅拌条件下，将0.8mL的1wt％柠檬酸钠溶液快速加入，得到金红色溶液，即得到了金纳米颗粒溶液；（2）将上述金纳米颗粒溶液加热至沸腾，加入1mL的0.1M抗坏血酸，再加入1.25 mL的1wt％氯铂酸溶液持续加热25分钟后，得到金铂纳米花溶液。 2.如权利要求1所述一种提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性的催化剂，其特征在于，所述金铂纳米花作为标记物与抗体相连得到金铂纳米花-抗体混合液，用于侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测，检测前添加显色底物。 3.如权利要求2所述一种提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性的催化剂，其特征在于，所述目标蛋白为兔免疫球蛋白，抗体为羊抗兔IgG。 4.如权利要求3所述一种提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性的催化剂，其特征在于，所述金铂纳米花-抗体混合液的制备方法包括：在9000转/分钟的条件下离心10分钟洗涤500微升浓度为1.0mg/mL的金铂纳米花溶液，完成后弃去上清液，得到沉淀重悬于1.0mL、pH9.0的水中，然后加入25微升浓度为1.0mg/mL的抗体，在室温条件下搅拌反应2小时，加入相当于其重量5%乙醇胺溶液搅拌30分钟，再加入相当于其重量10%BSA搅拌1小时，然后将所得混合物在9000转/分钟的条件下离心10分钟；弃去上清液，将沉淀重悬于洗涤缓冲液中，重复上述步骤3次，将沉淀重悬于含有20mM磷酸钠缓冲液、5wt%牛血清白蛋白、10wt%蔗糖和0.25wt%吐温-20的洗脱缓冲液中，得到金铂纳米花-抗体混合液，在4℃的条件下备用。 5.如权利要求4所述一种提高侧向流动生物传感器对低浓度目标蛋白检测灵敏性的催化剂，其特征在于，所述兔免疫球蛋白与金铂纳米花-抗体混合液混合发生免疫反应，得到金铂纳米花-抗体-兔免疫球蛋白复合物，所述侧向流动生物传感器的测试区设有抗体，当金铂纳米花-抗体-兔免疫球蛋白复合物到达测试区时，通过二次免疫反应，得到夹心型复合物金铂纳米花-抗体-兔免疫球蛋白-抗体，在兔免疫球蛋白的浓度为0.5ng/mL的情况下，测试区出现可见测试条带；在二次免疫反应完成后在测试区添加显色底物AEC 和H 2O2，在兔免疫球蛋白的浓度为0.05ng/mL的情况下，测试区出现可见测试条带。
所属类别：	发明专利