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原文传递一种提高胶乳试剂灵敏性和线性的方法

专利名称：	一种提高胶乳试剂灵敏性和线性的方法
摘要：	本发明提供了一种提高胶乳试剂灵敏性和线性的方法，属于医学检测领域，该方法包括以下步骤：(1)制备溶液A：所述的溶液A包括与胶乳微球连接的针对待测抗原的单克隆抗体；(2)制备溶液B：所述的溶液B包括苯丙氨酸、赖氨酸和维生素C；(3)混合步骤(1)制得的溶液A和步骤(2)得到的溶液B得到溶液C，将溶液C用于对待测抗原的检测。本发明还提供了一种检测试剂盒的制备方法，该方法试剂R2中加入了一定含量的溶液B发现溶液B的加入不仅提高了检测的灵敏度，还可以明显提高检测的线性关系，意外地发现溶液B的加入可以提高试剂R2的稳定性，在无需加入防腐剂的条件下，试剂R2的稳定性依然较高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江夸克生物科技有限公司
发明人：	陈青松;林耀文
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910087799.5
公开号：	CN109765385A
代理机构：	北京精金石知识产权代理有限公司
代理人：	宋秀兰
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	312500 浙江省绍兴市新昌省级高新技术产业园区(江东路1号)
主权项：	1.一种提高胶乳试剂灵敏性和线性的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤： (1)制备溶液A：所述的溶液A包括与胶乳微球连接的针对待测抗原的单克隆抗体；所述的针对待测抗原的单克隆抗体与胶乳微球连接的方法为：用2-吗啉乙磺酸缓冲溶液洗涤胶乳微球后，将乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺与洗涤好的胶乳微球混合进行第一步反应，将第一步反应后的胶乳微球与己二酸二酰肼溶液混合进行第二步反应，得到激活的胶乳微球，将氧化后的针对待测抗原的单克隆抗体与激活的胶乳微球混合进行第三步反应，即得与胶乳微球连接的针对待测抗原的单克隆抗体； (2)制备溶液B：所述的溶液B包括苯丙氨酸、赖氨酸和维生素C；所述的溶液B的制备方法为：将苯丙氨酸、赖氨酸和维生素按质量比为1-3:1-2:1的比例溶于水，即得溶液B； (3)混合步骤(1)制得的溶液A和步骤(2)得到的溶液B得到溶液C，将溶液C用于对待测抗原的检测。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的第一步反应的反应温度为24℃，反应时间为0.5-1小时；所述的第二步反应的反应条件为4-8℃反应过夜；所述的第三步反应的反应条件为4-8℃反应过夜；步骤(1)中所述的氧化后的针对待测抗原的单克隆抗体的氧化步骤为将抗体溶液中加入磷酸钠缓冲溶液配置的高碘酸钠，24℃条件下混合10-15分钟。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述的胶乳微球为聚苯乙烯微球、聚己内酯微球、聚甲基丙烯酸甲酯微球或聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球中的一种。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺和胶乳微球的重量份数比为0.6-0.8：80-100。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的己二酸二酰肼与第一步反应后的胶乳微球的重量份数比为20-40:80。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的针对待测抗原的单克隆抗体与激活的乳胶微球的重量份数比为2-25:100。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的待测抗原为载脂蛋白E、抗链球菌溶血素O、肝胆酸、C反应蛋白、肌钙蛋白I、胱抑素C、D二聚体、纤维蛋白(原)降解产物、铁蛋白、纤维结合蛋白、心型脂肪酸结合蛋白、胰岛素、脂蛋白、尿微量白蛋白、肌红蛋白和视黄醇结合蛋白中的一种。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的苯丙氨酸、赖氨酸和维生素混合物与水的质量体积比为5-20:100。 9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)混合过程中所述的溶液A和溶液B的体积比为2-5:10-50。 10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：溶液C中所述的苯丙氨酸、赖氨酸和维生素C的混合物与胶乳微球的重量份数比为10-20:100。
所属类别：	发明专利