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原文传递淡水鱼中孔雀石绿的快速提取和检测方法

专利名称：	淡水鱼中孔雀石绿的快速提取和检测方法
摘要：	本发明涉及孔雀石绿的检测方法，具体涉及淡水鱼中孔雀石绿的快速提取和检测方法，首先利用乙腈快速提取淡水鱼(在含有孔雀石绿的水池中饲养)中的孔雀石绿和隐性孔雀石绿，分成两份，一份加入硼氢化钾粉末将孔雀石绿转化成隐性孔雀石绿，得到不含孔雀石绿的样品本底，采集其紫外‑可见光谱得到本底的数据N，另一份直接采集紫外‑可见光谱作为待测样本数据c，第二，建立孔雀石绿的紫外‑可见标准光谱数据库V，第三，采用向量‑子空间夹角判据法计算待测样品中的孔雀石绿含量。本发明解决了现有国标中孔雀石绿提取方法繁琐以及采用高效液相色谱法分析孔雀石绿耗时长，大量使用溶剂等问题，实现淡水鱼中孔雀石绿的快速分析，便于推广。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	广西科技大学
发明人：	刘柳;徐传杰;韦媛媛;忻欣;韩莹;林华;粟晖;吴雨婷;覃雪霞
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910044586.4
公开号：	CN109765087A
代理机构：	北京国坤专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	王峰刚
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	545006 广西壮族自治区柳州市广西科技大学东环路268号
主权项：	1.淡水鱼中孔雀石绿的快速提取和检测方法，其特征在于，包括：步骤1，将淡水鱼放在含有孔雀石绿的水中培养24h，可食部分去除鱼鳞、鱼皮和骨头，鱼肉中加入乙腈，快速提取，得到含有孔雀石绿MG和隐性孔雀石绿LMG的样品。将样品提取液分成两份，在一份中加入硼氢化钾粉末，将孔雀石绿完全转化成隐性孔雀石绿，采集转化后不含孔雀石绿的样品本底紫外-可见光谱数据N，另一份直接采集样品紫外-可见光谱作为待测样本数据c；步骤2，建立孔雀石绿标准品数据库V，用分析天平准确称取孔雀石绿标准品，采用乙腈溶解标准品固体，配成标准储备液，再将标准储备液分别稀释成不同浓度的标准品，采集全波长下的紫外-可见光谱数据，经最小二乘回归法得到孔雀石绿标准品的紫外-可见光谱数据库V；步骤3，采用向量-子空间夹角判据方法计算样品的孔雀石绿含量。 2.根据权利要求1所述的快速提取和检测方法，其特征在于：步骤1中，所述淡水鱼为不同品种的多个淡水鱼。 3.根据权利要求1所述的快速提取和检测方法，其特征在于，所述向量-子空间夹角判据方法包括： (1)根据定量精度设定扣减步数Δ； (2)在算式yi＝aix+bi中带入较大的x1值，得到v1，yi表示i波长下孔雀石绿的吸光度值，ai、bi指代常数，x表示孔雀石绿的浓度，v1即为浓度为x1下孔雀石绿的多波长吸光度y1，v1是所有yi的值所组成的矩阵； (3)从光谱数据c中扣除v1/Δ，扣除后的变量记为dc；将本底数据N和变量dc合并，记为对照空间R，计算对照空间R与v1的夹角； (4)从光谱数据c中一步一步扣除v1，重复步骤(3)，计算R与v1夹角值； (5)重复步骤(4)，当光谱数据c中孔雀石绿完全被扣除后，对照空间R和v1的空间夹角会出现最大值θmax，记录θmax出现时所对应的扣减步数λmax，通过孔雀石绿的浓度x1和扣减步数λmax，计算样品中孔雀石绿的含量y1；计算方法为y1＝x1×λmax/Δ，得到的y1值即为样品中孔雀石绿的含量；若空间夹角所对应的扣减步数为1，或者空间夹角值随扣减步数单调递增(递减)，则样品中不含待测组分孔雀石绿。 4.根据权利要求1所述的快速提取和检测方法，其特征在于：孔雀石绿检出限为100μg/kg，0.002μg/mL。 5.根据权利要求1所述的快速提取和检测方法，其特征在于：所述快速提取，具体是样品加乙腈后在10000r/min匀浆机中匀浆，加入5g酸性氧化铝(200-300目)净化，然后用快速混匀器振荡，在4000r/min高速离心机离心5min，上清液过0.45μm微孔滤膜。 6.根据权利要求1所述的快速提取和检测方法，其特征在于：步骤1中，1mL10.0μg/mL孔雀石绿可以完全转化成6.5μg/mL隐性孔雀石绿，硼氢化钾粉末的加入量为0.8mg，加入过量的硼氢化钾不影响其他本底组分的含量。 7.根据权利要求1所述的快速提取和检测方法，其特征在于：步骤1中，加入硼氢化钾粉末后，样品进行高速离心，取上清液进行检测。 8.根据权利要求1所述的快速提取和检测方法，其特征在于：步骤1中，取样时，鱼肉样品不少于5g。
所属类别：	发明专利