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原文传递基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法

专利名称：	基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法
摘要：	本发明涉及一种基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法，包括以下步骤：第一步，收集正常人和不孕不育患者血清并将其分组；第二步，将血清样本和银纳米粒子充分震荡混匀并孵育反应30min；第三步，对孵育反应后的样本进行拉曼光谱扫面并采集400‑1800cm‑1处的光谱数据；第四步，对采集的拉曼数据进行预处理和归一化处理；第五步，对光谱数据进行正交偏最小二乘法判别分析(OPLS‑DA)。本方法采用SERS结合正交偏最小二乘判别分析方法，采用银纳米粒子作为活性增强基底，对比分析了不孕不育患者和正常人的血清，为临床不孕不育患者的快速诊断提供一种简单高效的备选新方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京中科遗传与生殖医学研究院有限责任公司
发明人：	张癸荣;费嘉;李如男;高超;郭兴道;陈文杨
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910248279.8
公开号：	CN109765214A
代理机构：	北京中企鸿阳知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	汪斌
分类号：	G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	102600 北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地天荣街19号院6幢203室
主权项：	1.一种基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法，按照先后顺序包括以下步骤： (1)收集正常人和不孕不育患者血清并将其分组； (2)将血清样本和银纳米粒子充分震荡混匀并孵育； (3)对孵育反应后的样本进行拉曼光谱扫描并采集光谱数据； (4)对采集的拉曼数据进行预处理和归一化处理； (5)对光谱数据进行正交偏最小二乘法判别分析。 2.根据权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，将不孕不育患者血清按临床卵巢功能的评价标准分为A高低雌二醇组，B高低AMH组，C高低AFC组以及D疾病组，疾病组包括子宫内膜异位症组和慢性盆腔炎组。 3.根据权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，血清样本和银纳米粒子的反应比例为1：1，孵育反应30min后用移液枪取混合样品2.5μl点样至贴有锡纸的载玻片上，待其自然风干后用拉曼光谱仪采集数据。 4.根据权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法，其特征在于，步骤(3)中，实验选用必达泰克i-Pro便携式拉曼仪检测，其激发波长为785nm，激发功率为60mW(激发功率为20％)，积分时间为10000ms，平均次数为3次，所有样本均在相同条件下测量，每个样品在不同位点测量5次，然后取平均谱，以此代表该样本的拉曼信号。 5.根据权利要求4所述的基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法，其特征在于，步骤(3)中，选用拉曼光谱扫面并采集400-1800cm-1处的光谱数据。 6.根据权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法，其特征在于，步骤(4)中，光谱预处理选用必达泰克i-Pro便携式拉曼仪自带的Bwspec4软件对所有拉曼谱图进行背景扣除和光谱平滑，归一化处理为面积归一化处理。 7.根据权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的不孕不育患者血清的检测方法，其特征在于，步骤(5)中，光谱数据用SIMCA14.1进行正交偏最小二乘法判别分析，受试者工作特征曲线用来评估该方法的准确性，置换检验验证模型的可靠性。
所属类别：	发明专利