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原文传递一种前列欣胶囊指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

专利名称：	一种前列欣胶囊指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
摘要：	本发明提供了一种前列欣胶囊指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，该方法包括以下步骤：供试品溶液的制备、混合对照品溶液的制备、利用超高效液相色谱仪检测及利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统、用平均值计算法生成前列欣胶囊的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积。该前列欣胶囊指纹图谱的建立方法具有化合物分离度高、重复性好的优点；使用该方法提供的指纹图谱对前列欣胶囊中的特征化合物进行测定，能有效地表征前列欣胶囊的质量，有利于全面监控药物的质量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东宏济堂制药集团股份有限公司
发明人：	张玉伟;刘娟;孟兆青;范圣此;李秀凤;李樱
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-21T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201910055032.4
公开号：	CN109781884A
代理机构：	济南舜源专利事务所有限公司
代理人：	于晓晓
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	250103 山东省济南市历城区经十东路30766号
主权项：	1.一种前列欣胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤如下： (1)供试品溶液的制备：取一定重量的前列欣胶囊内容物置于容器中，向容器中加入甲醇并进行超声处理，冷却，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液； (2)混合对照品溶液的制备：分别取没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、迷迭香酸、丹酚酸A、水合氧化前胡素、花椒毒素、佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素、珊瑚菜素和隐丹参酮，置于同一容器中，然后向该容器中加入甲醇并进行超声处理，冷却，摇匀，滤过，取滤液即得混合对照品溶液，其中对香豆酸设为参照化合物，后续相应的对香豆酸色谱峰设为参照峰； (3)分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液，注入超高效液相色谱仪，记录色谱图； (4)将步骤(3)获得的前列欣胶囊色谱文件从仪器导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统；用平均值计算法生成前列欣胶囊的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积。 2.如权利要求1所述的前列欣胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于，在步骤(1)中，制备供试品溶液的具体过程为：取前列欣胶囊内容物0.5～1.0g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇20ml，在300W/40kHz超声条件下超声处理30-40min。 3.如权利要求1所述的前列欣胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于，在步骤(3)中，分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液各1μl，注入超高效液相色谱仪，记录80min的色谱图。 4.如权利要求1所述的前列欣胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于，在步骤(3)中，前列欣胶囊指纹图谱测定的色谱条件为：以乙腈为流动相A，以体积百分比浓度0.1％甲酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱；流速为0.3ml/min；检测波长为300nm；柱温为25℃；理论板数按对香豆酸峰计算不低于8000；梯度洗脱的流程为：0～5min，5％流动相A，95％流动相B；5～20min，5→10％流动相A，95→90％流动相B；20～50min，10→30％流动相A，90→70％流动相B；50～65min，30→50％流动相A，70→50％流动相B；65～80min，50→72.5％流动相A，50→27.5％流动相B。 5.如权利要求1所述的前列欣胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于，在步骤(3)中，色谱柱规格为：AdvanceBio Peptide Mapping，2.7μm,2.1×250mm(PN:651750-902)。 6.根据权利要求1所述的前列欣胶囊指纹图谱的建立方法获得的前列欣胶囊指纹图谱，其特征在于，其特征峰为与没食子酸对应的2号峰，与新绿原酸对应的6号峰，与绿原酸对应的8号峰，与咖啡酸对应的10号峰，与隐绿原酸对应的11号峰，与对香豆酸对应的S号峰，与异绿原酸B对应的15号峰，与异绿原酸A对应的16号峰，与异绿原酸C对应的17号峰，与迷迭香酸对应的18号峰，与水合氧化前胡素对应的20号峰，与丹酚酸A对应的21号峰，与花椒毒素对应的24号峰，与佛手柑内酯对应的27号峰，与氧化前胡素对应的31号峰，与欧前胡素对应的33号峰，与珊瑚菜素对应的36号峰，与异欧前胡素对应的38号峰，与隐丹参酮对应的41号峰；特征峰以对香豆酸色谱峰为参照，上述19个色谱峰的相对保留时间分别为0.144、0.418、0.673、0.738、0.767、1.000、1.330、1.360、1.430、1.455、1.613、1.663、1.830、1.971、2.153、2.380、2.439、2.495、2.602。 7.根据权利要求6所述的前列欣胶囊指纹图谱，其特征在于，特征峰还包括以对香豆酸色谱峰为参照，相对保留时间为0.133的1号峰、相对保留时间为0.154的3号峰、相对保留时间为0.197的4号峰、相对保留时间为0.307的5号峰、相对保留时间为0.595的7号峰、相对保留时间为0.702的9号峰、相对保留时间为0.827的12号峰、相对保留时间为0.891的13号峰、相对保留时间为1.603的19号峰、相对保留时间为1.697的22号峰、相对保留时间为1.753的23号峰、相对保留时间为1.922的25号峰、相对保留时间为1.951的26号峰、相对保留时间为2.030的28号峰、相对保留时间为2.050的29号峰、相对保留时间为2.109的30号峰、相对保留时间为2.237的32号峰、相对保留时间为2.387的34号峰、相对保留时间为2.397的35号峰、相对保留时间为2.480的37号峰、相对保留时间为2.551的39号峰、相对保留时间为2.575的40号峰。
所属类别：	发明专利