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一种O型口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒
| 专利名称： | 一种O型口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒 |
| 摘要： | 本发明公开一种采用O型口蹄疫病毒样颗粒（VLPs）制备的检测试剂盒及制备方法。本发明的试剂盒的制备方法是将HRP直接标记在跟被检抗体同时作用的竞争性抗体上，其内酶标板包被的O型口蹄疫病毒样颗粒是由O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP1和经优化的VP3组装而成。本发明采用的VLPs能高效组装，且不影响其诊断效率，有利于降低诊断制剂的成本。本发明方法相对现有技术的检测步骤有所减少，实验操作简单，工作量小，用时短，并可提高诊断试剂的特异性和敏感性。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 甘肃;62 |
| 申请人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 发明人： | 郭慧琛;白满元;孙世琪;张韵;茹嘉喜;杨志元 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2018-12-07T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-05-24T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201811491852.X |
| 公开号： | CN109799342A |
| 代理机构： | 兰州振华专利代理有限责任公司 |
| 代理人： | 张晋 |
| 分类号： | G01N33/569(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 730046 甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号 |
| 主权项： | 1.一种O型口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒，其特征在于检测试剂盒内包括有：包被O型口蹄疫病毒样颗粒的酶标板，HRP标记的兔抗、含有吐温和磷酸盐缓冲液的样品稀释液和洗涤液、TMB底物、阳性对照血清、阴性对照血清、以及浓硫酸与水混合的终止液。 2.权利要求1所述的O型口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒制备方法，其特征在于HRP直接标记在跟被检抗体同时作用的竞争性抗体上，其制备过程包括：用O型口蹄疫病毒样颗粒免疫4~5周龄兔，免疫结束后，从兔心脏采血，分离血清并用Protein A亲和层析法分离纯化得到IgG，采用过碘酸钠方法将HRP标记到IgG上。 3.根据权利要求2所述的O型口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒制备方法，其特征在于内酶标板包被的O型口蹄疫病毒样颗粒是由O型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP1和VP3组装而成。 4.根据权利要求3所述的O型口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒制备方法，其特征在于VP3的序列为SEQ ID No.3。 5.根据权利要求2或3或4所述的O型口蹄疫病毒抗体竞争ELISA检测试剂盒制备方法，其特征在于其中的酶标板制备是用0.05%（pH=9.6）的碳酸盐包被缓冲液将O型FMDV VLPs稀释为0.5 µg/mL，以每孔100 µL的量加入酶标板，4℃包被过夜，洗涤液洗板3次；加入以酶标板稳定剂配制的含1%BSA封闭液，每孔120 µL，37℃恒温箱封闭1 h，洗板3次，干燥，真空包装。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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