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原文传递一种鉴定辛硫磷在淡水鱼不同组织中代谢产物的方法

专利名称：	一种鉴定辛硫磷在淡水鱼不同组织中代谢产物的方法
摘要：	本发明公开了一种鉴定辛硫磷在淡水鱼不同组织中代谢产物的方法，采用浸泡法给药，通过超高效液相色谱串联四级杆飞行时间高分辨率质谱（UPLC‑QTOFMS）定性检测辛硫磷在不同组织中的代谢产物，包括以下步骤：（1）淡水鱼在辛硫磷溶液浸泡后采集不同组织；（2）提取样品，提取剂为乙腈和乙酸乙酯以体积比5：1混合，净化剂为无水硫酸镁和十八烷基硅烷键合硅胶以质量比10:1混合；（3）UPLC‑QTOFMS定性分析：与辛硫磷、O,O,O’,O’,‑四乙基二硫逐磷酸酯和O,O‑二乙基硫代磷酸的保留时间和离子质量进行比对，判断各组织样品的代谢产物。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	中国水产科学研究院长江水产研究所
发明人：	刘永涛;艾晓辉;董靖;王桢月;胥宁;杨秋红;杨移斌;周顺
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910096527.1
公开号：	CN109813820A
代理机构：	武汉宇晨专利事务所
代理人：	江丽丽;王敏锋
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	430223 湖北省武汉市东湖新技术开发区武大园一路8号
主权项：	1.一种鉴定辛硫磷在淡水鱼不同组织中代谢产物的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)辛硫磷浸泡给药将淡水鱼浸泡在1～5mg/L的辛硫磷溶液中，浸泡2h、4h、6h、8h、10h、24h、48h后分别采集血浆以及肝脏、肾脏、鳃、肠、皮肤、肌肉组织并匀质处理； (2)样品处理分别称取上述各组织的样品，依次加入提取剂A和净化剂B，涡旋振荡后离心，收集提取液，用提取剂A重复提取样品残渣，合并提取液，氮气吹干后用甲醇定容，经0.22μm的滤膜过滤，滤液供UPLC-Q-TOFMS检测；所述的提取剂A为乙腈和乙酸乙酯以体积比5：1混合；所述的净化剂为无水硫酸镁和十八烷基硅烷键合硅胶以质量比10:1混合； (3)UPLC-QTOFMS定性分析利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间高分辨率质谱技术检测各组织样品，测得化合物的保留时间和离子质量，与辛硫磷、O,O,O’,O’,-四乙基二硫逐磷酸酯和O,O-二乙基硫代磷酸的保留时间和离子质量进行比对，判断各组织样品的代谢产物。 2.根据权利要求1所述的鉴定辛硫磷在淡水鱼不同组织中代谢产物的方法，其特征在于，UHPLC分析条件具体为：C18色谱柱，100mm×2.1mm×1.8μm；柱温：30℃，流速：0.25mL/min；流动相：有机相为甲醇，水相为0.1％甲酸水溶液，梯度洗脱程序：起始梯度有机相为10％的甲醇和水相为90％的0.1％甲酸水溶液，维持1min，然后在5min内有机相线性上升到体积浓度为90％的甲醇，水相线性下降为10％的0.1％甲酸水溶液，维持4min，0.1min内有机相体积线性下降到10％的甲醇，水相体积线性上升到90％，最后维持1.9min；进样体积为5.0μL。 3.根据权利要求1或2所述的鉴定辛硫磷在淡水鱼不同组织中代谢产物的方法，其特征在于，QTOFMS分析条件具体为：电喷雾离子源，正离子模式，扫描范围为M/Z 100～1000Da，积累时间0.199957secs；飞行时间质谱扫描的产物离子质量范围为50～1000Da，去簇电压：45V，碰撞能量为35eV，扩展碰撞能量为15.0eV；离子释放延迟为67，离子释放宽度为25，离子源：双喷雾离子源，喷雾气为50Psi，辅助加热气为55Psi，气窗气为25Psi，离子化温度为400℃，正离子喷雾电压5500V。
所属类别：	发明专利